VΙ. Люминесцирующие сыворотки

1. Люминесцирующая сыворотка брюшнотифознаяполучена гипериммунизацией животных взвесью возбудителей брюшного тифа с последующей меткой антител флюорохромом. Применяют для быстрого обнаружения возбудителя брюшного тифа в исследуемом материале в прямой РИФ (экспресс-метод диагностики).

2. Люминесцирующая антииммуноглобулиновая сыворотка против глобулинов кроликаполучена гипериммунизацией барана иммуноглобулинами кролика с последующей меткой антител флюорохромом. Применяют в непрямой РИФ с целью быстрого обнаружения антигенов любой специфичности.

3. Люминесцирующая антииммуноглобулиновая сыворотка против глобулинов человека получена гипериммунизацией кролика иммуноглобулинами человека с последующей меткой антител флюорохромом. Применяют в непрямой РИФ с целью быстрого обнаружения антител в исследуемой сыворотке с целью серодиагностики различных заболеваний.

III. ДИАГНОСТИКУМЫ

В настоящее время в лабораториях используются следу­ющие диагностикумы.

1 .Бактериальный диагностикум сальмонелл брюшного тифа(или сальмонелл паратифа А и В, шигелл Флекснера, Зонне и др. бактерий семейства Enterobacteriaceae) является взвесью убитых бактерий соответствующего вида и приме­няется в реакции агглютинации для обнаружения антител в сыворотке больных, т.е для серодиагностики.

2. Сальмонеллезные 0-диагностикумысодержат О-антигены различных групп сальмонелл. Получают из взвеси убитых нагреванием сальмонелл. Применяются для выявления О-антител при сальмонеллезных инфекциях в реакции агглю­тинации с сывороткой больных (серодиагностика).

3. Сальмонеллезные Н-диагностикумыпредставляют собой жгутиковые антигены формалинизированных буль­онных культур сальмонелл соответствующих видов и исполь­зуются в реакции агглютинации для серодиагностики заболевания, т.е. для определения Н- антител в сываротке.

4. Vi — брюшнотифозный диагностикум —препарат, полу­ченный из S. typhi, содержащей Vi-антиген, воздействием формалина Применяется в реакции агглютинации для обнаружения Vi-антител в сыворотке для серодиагностики брюшноти­фозного бактерионосительства.

5. Диагностикум бруцеллезный единый – взвесь убитых бруцелл, подкрашенная метиленовым синим. Единый бруцеллезный диагностикум применяется для определения антител в сыворотках крови больных бруцеллезом людей и животных в реакциях агглютинации Хеддльсона и Райта (серодиагностика бруцеллеза).

6.Диагностикум риккетсиозный Провачека -взвесь убитых риккетсий Провачека. Применяется для определения антител в сыворотке больных эпидемическим сыпным тифом в реакции агглютинации риккетсий (РАР) – серодиагностика эпидемического сыпного тифа.

7. Кардиолипиновый антигенготовят из мышечной ткани сердца быка в виде спиртового экстракта с добавлением холестерина. Применяют в качестве неспецифического антигена для постановки реакции Вассермана с целью серодиагностики сифилиса.

8. Антиген Вассермана – специфический антиген из тканевых трепонем, обработанных ультразвуком. Применяется для постановки реакции Вассермана с целью серодиагностики сифилиса.

9. Эритроцитарный сальмонеллезный 0-диагностикум –взвесь эритроцитов с адсорбированными на них О-антигенами различных групп сальмонелл. Используется для постановки РПГА с сывороткой больного для серодиагностики сальмонеллезной инфекции.

10. Эритроцитарный брюшнотифозный Vi-диагностикум -эритроциты, сенси­билизированные очищенным Vi-антигеном S. typhi. Применяет­ся в РПГА для определения Vi-антител в сыворотке для серодиагностики брюшноти­фозного бактерионосительства.

11. Эритроцитарный дифтерийный диагностикум –эритроциты, сенсибилизированные дифтерийным анатоксином. Применяется в РПГА для определения антитоксических противодифтерийных антител в исследуемой сыворотке с целью оценки напряженности антитоксического иммунитета для выявления контингента лиц, подлежащих ревакцинации против дифтерии.

12. Эритроцитарный микоплазменный диагностикум -эритроциты, сенсибилизированные микоплазменным антигеном. Применяется для определения нарастания титра антимикоплазменных антител в парных сыворотках больного в РПГА с целью серодиагностики микоплазменных инфекций.

13. Эритроцитарный сыпнотифозный (риккетсиозный Провачека) диагностикум – эритроциты, сенсибилизированные риккетсиозным Провачека антигеном. Применяется в РПГА для определения антириккетсиозных Провачека антител в сыворотке больного (серодиагностика эпидемического сыпного тифа).

14. Эритроцитарный риккетсиозный Музера диагностикум - эритроциты, сенсибилизированные риккетсиозным Музера антигеном. Применяется в РПГА для определения антириккетсиозных Музера антител в сыворотке больного (серодиагностика эндемического сыпного тифа).

15. Эритроцитарный риккетсиозный Бернета диагностикум - эритроциты, сенсибилизированные риккетсиозным Бернета антигеном. Применяется в РПГА для определения антириккетсиозных Бернета антител в сыворотке больного (серодиагностика Ку-лихорадки).

16. Эритроцитарный антительный ботулинический диагностикум – эритроциты с адсорбированными на них антитоксическими антибутулиническими антителами. Используется для постановки РПГА с целью быстрого выявления экзотоксина в сыворотке больного (экспресс-метод диагностики ботулизма).

17.Эритроцитарный антительный противостолбнячный диагностикум – эритроциты с адсорбированными на них антитоксическими антистолбнячными антителами. Используется для постановки РПГА с целью быстрого выявления экзотоксина в сыворотке больного (экспресс- метод диагностики столбняка).

18. Эритроцитарный антительный противогангренозный диагностикум – эритроциты с адсорбированными на них антитоксическими противогангренозными антителами. Используется для постановки РПГА с целью быстрого выявления противогангренозного экзотоксина в сыворотке больного (экспресс-метод диагностики газовой гангрены).

19. Эритроцитарный антительный менингококковый диагностикум– эритроциты с адсорбированными на них антименингококковыми антителами. Применяется в РПГА для выявления менингококкового антигена в ликворе больного.

20. Гриппозный диагностикумпредставляет собой аллантоисную жидкость инфицированных вирусом гриппа (типов А, В) куриных эмбрионов и инактивированную. Диагностикум применяется при постановке РТГА или РСК с парными сыворотками больных для определения нарастания титра антител (серодиагностика гриппа)

21. Диагностикум вируса клещевого энцефалитаполучают из суспензии мозга белых мышей, зараженных вирусом кле­щевого энцефалита с последующей инактивацией вируса.

Диагностикум используется в РТГА или РСК для определения нарастания титра антител в парных сыворотках больного (серодиагностика клещевого энцефалита).

IV. АЛЛЕРГЕНЫ И ТОКСИНЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ КОЖНЫХ ПРОБ

Некоторые аллергены, применяемые с диагностической целью.

1. Туберкулин.В настоящее время чаще применяется для проведения аллергических туберкулиновых проб сухой очищенный туберкулин (РРД).

Сухой очищенный туберкулин (РРД) - (Derivatum proteinos purificatum tuberculin) представляет собой белковый препарат, полученный из фильтрата культуры микобактерий туберкулеза осаждением химическими веществами с последующей очисткой. Препарат применяется для внутрикожной пробы Манту с целью обнаружения инфицированности населения микобактериями туберкулеза, при отборе людей, подлежащих привив­кам против туберкулеза; для определения эффективности вакци­нации.

2. Тулярин содержит убитые нагреванием мик­роорганизмы – возбудители туляремии. Применяется для постановки кожно-аллергической пробы с целью выявления ПЧЗТ для диагностики туляремии, а также для определения поствакцинального иммунитета.

3. Бруцеллинпредставляет собой фильтрат 3-недельной бульонной культуры, убитой нагреванием, трех видов бруцелл. Препарат применяется с целью выявления ПЧЗТ для диагностики бруцеллеза (кожно-аллергическая проба Бюрне).

4 Антраксин – препарат, содержащий белковые фракции сибиреязвенных бацилл. Используется с целью определения ПЧЗТ для диагно­стики сибирской язвы путем постановки кожно-аллергической пробы.

5. Дизентерииявляется белковой фракцией шигелл Флекснера и Зонне и использует­ся для выявления ПЧЗТ при подозрении на дизентерию в кожно-аллергической пробе.

6. Бактериальные аллергены протейный, стафилококковый, стрептококковый, синегнойный, из коринебактерий, эшерихий и др. –это белковые фракции бульонных культур соответствующих микроорганизмов. Препараты предназначены для выявления повышенной чувст­вительности организма к микроорганизмам, из которых они получены, т.е. для кожно-аллергических проб при диагностике заболеваний, вызванных данными микроорганизмами.

7. Токсоплазмин – антигенный комплекс, выделенный из Toxoplasma gondii. Токсоплазмин применяется для выявления ПЧЗТ в кожно-аллергической пробе с целью диагностики токсоплазмоза.

Бактериальные экзотоксины (дифтерийный и скарлатиноз­ный)применяются для определения антитоксического имму­нитета к дифтерии в реакции Шика и к скарлатине в реакции Дика.

Дифтерийный токсинготовят из очищенного экзотоксина. Токсин вводят внутрикожно с целью определения наличия антитоксического иммунитета (реакция Шика). Положительная реакция на токсин (инфильтрат, гиперемия) свидетельствует об отсутствии антитоксического иммунитета у обследуемого и требует проведения ревакцинации против дифтерии. При наличии антитоксического иммунитета реакция Шика отрицательная, т.е отсутствует местная реакция на месте введения токсина, так как происходит нейтрализация токсина антитоксином.

V. БАКТЕРИОФАГИ

Препараты бактериофагов применяют для лечения и про­филактики инфекционных болезней, а также для определе­ния фагочувствительности и фаготипирования при индика­ции микроорганизмов. Действие фагов основано на их стро­гой специфичности. Препарат фага представляет собой фильтрат бульонной культуры бактерий, зараженной соответствующим фа­гом.

В настоящее время выпускаются сле­дующие препараты фагов, используемые для лечения и профилак­тики.

1. Поливалентный брюшнотифозный бактериофагпредставляет собой фильтрат фаголизата брюшнотифозных бактерий. Препарат применяется для массовой профи­лактики брюшного тифа, а также при противоэпидемических мероприятиях в очагах брюшного тифа.

2. Поливалентный сальмонеллезный бактериофаг групп А, В, С, Д, Еполучен из смеси фаголизатов несколь­ких типов наиболее распространенных сальмонелл (из серо­логических групп А, В, С, Д, Е). Бактериофаг применяют для лечения больных сальмонеллезами, для санации реконвалесцентов и носителей сальмонелл и с целью профилактики сальмонеллезной инфекции.

3. Поливалентный дизентерийный бактериофагявляется смесью фильтратов фаголизатов шигелл Зоне и Флекснера. Бактериофаг применяют с профилактиче­ской целью в сезон подъема заболеваемости дизентерией (в детских уч­реждениях и среди работников пищевой промышленности) и в очагах заболевания по эпидемическим показаниям, а также для лечения дизентерии.

4. Бактериофаг колипредставляет собой фильтрат фаголизатов наиболее часто выделяющихся энтеропатогенных сероваров эшерихий. Коли-бактериофаг рекомендуется для лечения больных с заболеваниями, вызванными энтеропатогенными сероварами эшерихий.

5. Бактериофаг протейный состоит из смеси фильтратов фаголизатов основных видов протеев. Фаг применяют с лечебной целью местно.

6. Коли-протейный фаг представляет собой смесь фильтратов фаголизатов энтеропатогенных эшерихий и проте­ев. Фаг применяется per os при лечении детей с кишечной инфекцией, вызванной энтеропатогенными эшерихиями и про­теем.

7. Стафилококковый фаг является фильтратом фаголизата патогенных стафилококков. Применяется с лечеб­ной целью при стафилококковых поражениях кожи и подкож­ной клетчатки. Стафилококковый фаг используют и с профилактической целью для орошения ран.

8. Стрептококковый фаг получен из фаголизата патогенных для человека стрептококков. Фаг применяют для лечения и профилактики заболеваний, вызванных стрептококками.

Диагностические бактериофаги широко применяются для идентификации бактерий, выделенных от больного или из ин­фицированных объектов внешней среды. С помощью бакте­риофагов можно опреде­лить виды бактерий и их фаговары.

В настоящее время наиболее разработана фагодиагностика и фаготипирование в отношении бактерий рода Salmonella, Vibrio и патогенных стафилококков. Фаготипирование имеет эпидемиологическое значение, т.е. помо­гает устанавливать источник инфекции, пути распространения, изучать эпидемические связи.

В основе фагодиагностики и фаготипирования лежит прин­цип совместного культивирования выделенного микроорганиз­ма с соответствующими видовыми или типовыми фагами. По­ложительным результатом считается наличие хорошо выра­женного лизиса исследуемой культуры с видовым или типовым фагом.

Стафилококковые типовые фаги (29, 52, 52А, 79, 80 и др.) являются фильтратом фаголизата патогенных стафилококков соответствующего типа. Применяются для фаготипирования стафилококков с целью установления источника инфекции при внутрибольничных инфекциях.

Брюшнотифозный Vi I бактериофагпредставляет собой фильтрат фаголизата брюшнотифозных бактерий, содержащихVi-антиген. Препарат применяется для определения наличия Vi-антигенау сальмонелл брюшного тифа с целью последующего Vi-фаготипирования.

Брюшнотифозные типовые Vi –II бактериофаги(А, В1, В2, В3,C1, C2, 28, 40, 41 и др.) представляют собой фильтраты фаголизатов брюшнотифозных бактерий, содержащихVi- антиген соответствующего типа. Применяются для определения фаготипа сальмонелл брюшного тифа.

VI. ПРОЧИЕ ПРЕПАРАТЫ

Бактерийные препараты из живых бактерий симбиотической микрофлоры кишечника человека (бифидобактерии, кишечная палочка, лактобактерии) получили широ­кое применение для восстановления нормального биоценоза после длительного лечения антибиотиками, при кишечных дисфункциях (особенно у детей), при аллергических состоя­ниях и т. д. Наряду с антагонистической активностью в от­ношении патогенных и условно-патогенных бактерий кишеч­ника существенной является роль этих препаратов в витаминообразовании, а также их ферментативные и иммунизирующие свойства.

В настоящее время выпускаются следующие препараты:

1. Бифидумбактерин – препарат, который содержит живые бифидобактерии. Применение бифидумбактерина необходимо при дефиците бактерий бифидум, который наблюдается при хронических формах дизен­терии, колитах, при дисбактериозах, развивающихся как ре­зультат длительной антибиотикотерапии. Препарат рекомен­дуется также для санации реконвалесцентов после перенесенной дизентерии.

2. Колибактерин содержит живые кишечные палочки штам­ма М-17, антагонистически активные в отношении условно-патогенных и патогенных микроорганизмов. Колибактерин применяют при хро­нических колитах, дисбактериозах, санации реконвалесцентов, для профилактики дизентерии и других кишечных заболеваний инфекционной природы.

3. Бификол– это смесь бифидумбактерина и колибактерина. Показания к применению препарата те же, что и бифидумбактерина и колибактерина.

4. Лактобактерин представляет собой живую культуру молочнокислых бактерий. Эти микроорганизмы об­ладают антагонистическими свойствами в отношении энтеропа-тогенных эшерихий, шигелл, протеев, патогенных стафило­кокков и некоторых других микроорганизмов. Отличительным признаком лактобактерий является их устойчивость к антибиотикам широ­кого спектра действия, что дает возможность применять лактобактерин параллельно с антибиотикотерапией.

Интерферон

По способу получения различают человеческий лейкоцитарный интерферон и рекомбинантный генно-инженерный интерферон.

Человеческий лейкоцитарный интерферон – видоспецифический белок, продуцируемый клетками культуры тканей из лейкоцитов донорской крови под воздействием интерфероногена (липополисахариды, полианионы, двунитчатые РНК и др.).

Препарат интерферон человеческий рекомбинантный представляет собой белок, синтезированный бактериями, в генетический аппарат которых встроен ген человеческого интерферона.

Интерферон обладает широким антивирусным спектром, то есть практически действует на все вирусы. Ему присуща вы­сокая видовая специфичность: интерферон, полученный на клетках культуры ткани человека, способен оказывать дейст­вие только в организме человека. Интерферон предназначен для профилактики и лечения гриппа и других вирусных респираторных заболеваний.

Учебное издание

ЗубареваИрина Валерьевна, БеренштейнТатьяна Феликсовна,

ДанющенковаНина Михайловна