Основные методы исследования

ПРИМЕНЯЕМЫЕ В ВИРУСОЛОГИЧЕСКОЙ ПрОКТИКЕ

В вирусологической практике применяют вирусоскопический ме­тод, метод выделения и культивирования вирусов, биологический и се­рологический методы исследования.

Сущность вирусоскопического метода исследования заключается в использовании различных видов микроскопии с целью изучения вирусов.

Световая вирусоскопия позволяет выявлять крупные вирусы (вирусы оспы, эктимы овец), обнаруживать внутриклеточные включения, вы­являть дегенерацию и гибель клеток в культурах, т. е. цитопатогенное действие вирусов.

Метод флюорохромирования основан на свечении (люминесценции) вирусов после обработки их специальными веществами — флюорохромами, которые под действием ультрафиолетовых лучей светятся. С по­мощью этого метода можно установить морфологию вирусов, внутрик­леточные включения и за счет различного свечения нуклеиновых кис­лот можно дифференцировать (различать) вирусы на ДНК- или же РНК-содержащие.

Метод иммунофлуоресценции базируется на специфическом взаимо­действии вирусного антигена с антителами, меченными флюрохромом. Этот метод позволяет выявлять патогенные вирусы непосредственно в патматериале и определять их вид.

Электронная вирусоскопия позволяет визуально наблюдать вирусные частицы в поле зрения электронного микроскопа. С помощью элект­ронного микроскопа можно определить морфологию вирионов и диф­ференцировать вирусы по семействам, наблюдать взаимодействие ви­русов и антител, что позволяет установить вид вирусов.

Метод выделения и культивирования вирусов основан на их способ­ности репродуцироваться (размножаться) в живых клетках. Этот метод позволяет обнаружить присутствие вирусов в исследуемом материале, поддерживать их в активном состоянии, титровать вирусы, изучать их патогенные свойства, проводить постановку реакции нейтрализации, накапливать вирусный материал и применять его для изготовления противовирусных вакцин, предназначенных для профилактики вирус­ных болезней.

Биологический метод (биопроба) основан на заражении лаборатор­ных, а при необходимости и производственных животных с целью определения патогенности вирусов и их вирулентности.

Серологический метод исследования основан на взаимодействии го­мологичных друг другу антител и антигенов. Осуществляют этот метод путем постановки серологических реакций (РИД, РН, РСКи др.) in vitro с целью установления достоверного диагноза на вирусную болезнь.

Контрольные вопросы

1. Какая наука изучает вирусы?

2. Как устроены вирусы?

3. Из каких частей и химических веществ состоят вирусы?

4. Какие клеточные культуры применяют для выращивания вирусов?

5. Назовите основные методы исследований, применяемые в вирусоскопической практике?

Глава 2 ОСНОВЫ ОБЩЕЙ ЭПИЗООТОЛОГИИ

Предмет эпизоотологии

Болезни животных делятся на две большие группы: заразные и неза­разные. В свою очередь заразные болезни подразделяются на инфек­ционные (вирозы, бактериозы, микозы и микотоксикозы) и инвазион­ные (паразитарные).

Инфекционные болезни занимают особое место среди болезней жи­вотных и имеют следующие отличительные особенности от других па­тологий животных:

♦ во-первых, для их возникновения необходимо внедрение в орга­низм животного специфического патогенного микроба или продуктов его жизнедеятельности (ботулизм и др.);

♦ во-вторых, возможна передача возбудителя инфекционной болез­ни от больного животного здоровому;

♦ в-третьих, при инфекционных болезнях возможно массовое забо­левание животных (заболеваемость может достигать 100 % при ящуре животных, классической чуме свиней и др.);

♦ в-четвертых, инфекционные болезни обладают способностью широкого территориального распространения (в пределах района, об­ласти, государства и материка могут распространяться высокопатоген­ный грипп птиц, ящур животных, чума крупного рогатого скота и дру­гие болезни);

♦ в-пятых, отдельные болезни могут передаваться от животных че­ловеку (таких болезней в мире зарегистрировано около 200, а в Белару­си — около 30: сибирская язва, туберкулез, бешенство, сальмонеллез, хламидиоз, лептоспироз и др.);

♦ в-шестых, инфекционным болезням свойственна стадийность (различают следующие периоды болезни: инкубационный, продро­мальный (период предвестников), основных признаков болезни и уга­сания (реконвалесценции);

♦ в-седьмых, отдельным инфекционным болезням свойственна стационарность, которая может быть обусловлена длительным сохранением возбудителя во внешней среде (сибирская язва, ЭМКАР и др.), продолжительным микробоносительством (инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота, бруцеллез и др.) и другими причинами;

♦ в-восьмых, у абсолютного большинства переболевших животных создается невосприимчивость к повторному заболеванию, т. е. у них образуется иммунитет.

При отдельных инфекционных болезнях переболевшие или имму­низированные животные могут создать иммунную защиту колостральным путем (через молозиво) у новорожденных животных (колибактериоз, ротаикоронавирусная инфекция, болезнь Ауески и мно­гие другие).

Вместе с тем не всем инфекционным болезням свойственны пере­численные особенности. Так, например, для злокачественной ката­ральной горячки крупного рогатого скота, столбняка животных и не­которых других инфекционных болезней не свойственны массовость. Они, как правило, регистрируются в виде единичных (спорадических) случаев и не наносят большого экономического ущерба. В то же время массовость заболевания, характерная инфекционным болезням, может быть присуща и некоторым незаразным болезням. Массовыми и при­носящими значительный экономический ущерб могут быть отравления животных, эндемические болезни, заболевания обмена веществ и др. Главной же отличительной особенностью инфекционных болезней от незаразных, что в конечном итоге инфекционные болезни и объединя­ет, является свойственный только им эпизоотический процесс. Инфек­ционная болезнь существует только вследствие непрерывности эпизо­отического процесса, т. е. последовательной передачи возбудителя от зараженного животного здоровому непосредственно (контактным пу­тем, при случке и т. д.) или посредством элементов внешней среды (воз­дух, корма, вода, предметы ухода и др.). Без непрерывности передачи возбудителя нет и не может быть эпизоотического процесса.

Термин «эпизоотология» (от гр. epi — на и won — животное, logos — учение) подразумевает одновременное заболевание большого количес­тва животных какой-либо инфекционной болезнью на конкретной территории в определенный период времени.

Термин «эпизоотология» как наука об эпизоотиях был научно обос­нованным и приемлемым для того времени, когда имели место массо­вые вспышки инфекционных болезней животных (чума и повальное воспаление легких крупного рогатого скота, сибирская язва животных, сап лошадей и др.). На современном этапе указанные болезни не полу­чают массового распространения. В силу этого такое определение эпизоотологии как науки об эпизоотиях (повальных болезнях живот­ных) устарело и его нельзя считать правильным, ибо она изучает и дру­гие формы проявления интенсивности эпизоотического процесса — на уровне спорадических случаев, энзоотии, а также микробоносительства, в том числе здоровыми животными. Отсюда более точным будет определение эпизоотологии как науки об эпизоотическом про­цессе — закономерностях возникновения, распространения и угаса­ния инфекционных болезней животных, методах их профилактики и ликвидации.

Эпизоотология изучает не только эпизоотический процесс на уровне стада, группы, популяции при возникновении инфекционных болез­ней, но и суть конкретной инфекционной болезни. В связи с этим дис­циплину называют эпизоотология и инфекционные болезни, а в методи­ческом отношении эпизоотологию разделяют на общую и частную.

Общая эпизоотология выявляет и изучает общие закономерности воз­никновения, распространения и угасания инфекционных болезней животных и методы их управления (профилактики и ликвидации). Ее предметом являются учение об инфекции, эпизоотические аспекты учения об иммунитете, эпизоотический процесс, эволюция, номенк­латура и классификация инфекционных болезней, общие принципы профилактики и ликвидации инфекционных болезней.

Частная эпизоотология изучает этиологию, эпизоотологические осо­бенности, патогенез, симптомы, патологоанатомические изменения, диагностику, лечение, вопросы профилактики и ликвидации конкрет­ных инфекционных болезней животных.

В общей эпизоотологии основной целью изучения является эпизоо­тический процесс, а в частной — инфекционный.

Во всем мире в учебниках и руководствах по эпизоотологии инфек­ционные болезни традиционно принято описывать по определенной схеме.