Тезисы изучаемого материала.
Кировская государственная медицинская академия
Кафедра микробиологии и вирусологии
Тема: “Серологические реакции в диагностике инфекционных и неинфекционных болезней.
Реакция агглютинации.’’
Тезисы изучаемого материала.
3.1 Серологические реакции: определение, компоненты, механизм, практическое использование.
Серологические реакции (от лат. serum – сыворотка) - это реакции между антигенами и антителами in vitro.
Суть всех серологических реакций состоит в специфическом взаимодействии антигенов и соответствующих антител. Поэтому основные компоненты серологических реакций:
1. антигены:
Ø корпускулярные (клетки, составные части клеток);
Ø растворимые (экстракты из органов и тканей, токсины и др.);
2. антитела, содержащиеся в сыворотках.
Продуктами реакции являются комплексы антиген–антитело. Серологическая реакция возможна, если имеется иммунологическое соответствие главных компонентов – антитела и антигена. Взаимодействие происходит в растворе электролита.
Серологическая реакция возможна, если имеется иммунологическое соответствие главных компонентов – антиген и антитело. В основе иммунологической специфичности лежит структурная комплементарность антигена и антитела.
Согласно гипотезе А. Поллинга, молекулы антител имеют, как минимум, 2 активных центра, а антигены – несколько детерминантных групп, поэтому молекула иммуноглобулина может соединяться с детерминантными группами 2-х разных антигенных частей.
Двухвалентность антитела обеспечивает возможность соединения большого числа антигенных частиц в конгломераты. Последние образуются по принципу каркаса или решетки. Поэтому механизм реакции можно представить в 2 фазы:
1. Специфическая: соединение детерминантной группы антигенов с активным центром антител;
2. Неспецифическая: видимые проявления реакции – выпадение комплекса антиген-антитело в осадок в изотонических растворах, лизис клеток в реакциях с участием комплемента, нейтрализация токсинов в реакциях с антитоксических сыворотках.
Внешние проявления реакции зависят от свойств антител и антигенов и от условий постановки реакций. В лабораторной практике используют РА, преципитации, лизиса и их многочисленные модификации. Все серологические реакции можно разделить на несколько групп:
1) Реакции, протекающие с укрупнением частиц антигена в растворе электролита (NaCl). К ним относятся реакции агглютинации, преципитации и ее модификации;
2) Реакции, протекающие с нейтрализацией антигена – реакция нейтрализации токсина антитоксической сывороткой (флоккуляция), реакция нейтрализации вирусов, реакция торможения гемагглютинации (РТГА);
3) Реакции, протекающие с участием комплемента. К ним относятся реакция связывания комплемента (РСК), гемолиза и их модификации;
4) Реакции, протекающие с участием фагоцитов – опсонофагоцитарная реакция и др.;
5) Реакции, протекающие с участием меченых антигенов или антител – РИФ, РИА, ИФА.
По количеству компонентов серологические реакции делят на:
- 2-х компонентные (в которых участвуют антигены и антитела);
- многокомпонентные (в которых кроме антигенов и антител может участвовать комплемент и другие компоненты).
Основные компоненты серологических реакций:
1. Антигены:
Ø Корпускулярные (клетки, составные части клеток);
Ø Растворимые (экстракты из органов и тканей, токсины и др.)
2. Антитела: содержатся в сыворотках.
Механизм:
Реакции протекают в 2 фазы:
1) Специфическая: соединение детерминантной группы антигенов с активным центром антител;
2) Неспецифическая: видимое проявление реакции – выпадение комплекса антиген-антитело в осадок в изотонических растворах, лизис клеток в реакциях с участием комплемента, нейтрализация токсинов в реакциях с антитоксической сывороткой.
Внешние проявления реакции зависят от свойств антител и антигенов и от условий постановки реакции. В лабораторной практике используют: реакции агглютинации, преципитации, лизиса в их многочисленных модификациях.
Практическое применение:
1. Сероидентификация – определение неизвестного антигена с помощью известных антител. Производится с целью установления родовой, видовой, типовой принадлежности возбудителей, выделенных у обследуемого.
Антигены – исследуемый материал, полученный от больного и содержащий возбудителей болезни.
Антитела – диагностические иммунные сыворотки.
2. Серодиагностика – определение неизвестных антител с помощью известного антигена. применяется для обнаружения антител в сыворотке крови обследуемого.
Антигены – стандартные диагностикумы (взвеси убитых микроорганизмов, экстракты или изолированные химические фракции из них).
Антитела – сыворотка крови обследуемого.
При серодиагностике оценку результатов необходимо проводить на основании:
1) диагностического титра антител;
2) нарастания титра антител.
Диагностический титр – критическая величина титра антител в сыворотке крови к конкретному возбудителю, превышение которой расценивается как диагностический признак заболевания.
Величина диагностического титра устанавливается эмпирическим путем для каждого заболевания и каждой серологической реакции.
Серологические реакции характеризуются:
· специфичностью – способностью антигенов реагировать только с гомологичными антителами.
· Чувствительностью – минимальным количеством антигенов или антител, которое выявляет данная реакция.
ДОСТОИНСТВА:
1. чувствительность;
2. специфичность;
3. достоверность;
4. дешевизна;
5. экспрессность;
6. наглядность;
7. бесприборность.
НЕДОСТАТКИ:
1. низкая чувствительность;
2. низкая специфичность;
3. ложноположительные результаты;
4. дороговизна;
5. трудоемкость;
6. длительность постановки;
7. необходимость оборудования;
8. отсутствие визуализации.