Лабораторная диагностика эпидермомикозов

Рубромикоз (руброфития).

Возбудитель - Trichophyton rubrum поражает кожу стоп, ногтевые пластинки пальцев стоп и кистей, крупные складки, кожу туловища и конечностей. Руброфития относится к широко распространенным заболеваниям. Источником инфекции является больной человек. Нередко встречаются ассоциации красного трихофитона с плесневыми грибами, кандидами, бактериальной флорой. Исследованию при руброфитии подвергают чешуйки кожи, соскобы из глубоких слоев ногтя.

Микроскопический метод позволяет найти в нативных препаратах споры и мицелий гриба, однако требует подтверждения выделением чистой культуры гриба.

Микологический метод - посев на плотную среду Сабуро с целью выделения культуры руброфитона. Сначала на среде образуются белые пушистые (реже кожистые или мучнистые) колонии, которые через 1-2 недели приобретают ярко-красный цвет. При микроскопии культуры обнаруживают тонкий мицелий, микрокони­дии грушевидной, реже овальной и палочковидной формы.

Эпидермофития паховая.

Возбудитель - Epidermophyton floccosum. Паховая эпидермофития относится к широко распространенным и весьма контагиозным заболеваниям, которым чаще болеют мужчины. Поражается кожа паховых и межъягодичных складок, реже — подмышечных складок и под молочными железами, в ряде случаев – ногти. Диагностика проводится микроскопическим методом и выделени­ем культуры гриба.

При микроскопическом исследовании соскоба пораженных участков кожи обнаруживают переплетенные разветвляющиеся короткие (2-4мкм) нити мицелия и артроспоры пря­моугольной формы в виде цепочек.

Микологический метод - на среде Сабуро вырастают округлые, куполообразные или плоские колонии, часто с углублением в центре. Поверхность колоний мучнистая, отмечается их радиальная складчатость, цвет - серый или желтовато-зеленый. При микроскопии культуры обнаруживают септированный мицелий с характерными макроконидиями, напоминающими связки бананов или дубинки.

Эпидермофития стоп.

Микоз стоп может вызывать такжеTrichophyton interdigitale (T.mentagrophytes var. interdigitale).Заболевание весьма распространенное, передается от человека человеку чешуйками с поражен­ных участков кожи или ногтей больного.

Микроскопический метод диагностики эпидермофитии позволяет определить в нативных препаратах из материала от больного нити мицелия и споры гриба (рис. 36).

Микологический метод. Возбудитель эпидермофитии образует на среде Сабуро быстро растущие разнообразные по культуральным характеристикам колонии (бархатисто-мучнистые, пушистые, ровные, куполообразные, складчатые или бугристые). Цвет колоний обычно белый, однако встречаются желтые, розовые, красные, коричневые колонии. При микроскопичеком исследовании культур находят длинный ветвистый септированный мицелий, на концах которого

Рис. 36. Элементы гриба (нити мицелия и споры гриба) в чешуйках кожи при эпидермофитии

расположены длинные завитки и спирали, а также полиморфные хламидоспоры. Обильные Микроконидии, диаметром 2-Змкм, располагаются в обилии по бокам мицелия и на его концах, часто располагаясь гроздьями. Макроконидии выглядят характерно: размерами 20-З0х5-7 мкм, разделе­ны поперечными перегородками на 5-6 клеток, средние из которых наиболее широкие.

ТРИХОМИКОЗЫ

Трихофития

Повсеместно распространенное заболевание, вызываемое антропофильными и зоофильными трихофитонами различных видов. Инфицирование происходит через пораженные грибами волосы, чешуйки кожи и разрушающиеся ногтевые пластинки. Чаще болеют дети. При поверхностной трихофитии поражается гладкая кожа и волосистая часть головы, при хронической могут также поражаться ногти, глубокие слои кожи, внутренние органы. Пораженные трихофитонами волосы короткие (1-2мм и короче), беловатые, сухие, ломкие, выглядят в виде черной точки или запятой, находятся в мелкой чешуйке.

Наиболее часто среди антропофильных трихофитонов встречаются Trichophyton tonsuransи T.violaceum, среди зофильных -T.mentagrophytes.

Микроскопический метод.При микроскопии нативных препаратов гриб в пораженном волосе встречается в виде спор и мицелия. Размеры и расположение спор является важным моментом в дифференциации различных видов гриба.

По отношению к волосу трихофитоны подразделяют на 3 группы:

endothrix (обычно антропофильные трихофитоны, вызывающие поверхностную трихофитию) - крупные круглые споры расположены только внутри волоса и не выходят за его пределы, напоминая пробирку, заполненную горохом;

ectothrix (обычно зоофильные трихофитоны, вызывающие глубокую трихофитию) - крупные или мелкие споры несколь­кими слоями окружают волос и его основание, создавая широкий (у крупноспоровых) или более узкий (у мелкоспоровых) чехол;

neoendothrix, когда гриб располагается и в волосе, и вне его.

Наряду со спорами, в пораженном волосе встречаются цепочки из округлых спор, изредка – нити мицелия.

Микроскопия соскоба пораженных участков кожи позволяет обнаружить нити мицелия, а также цепочки и кучки круглых или овальных спор диаметром 4-5мкм. В ногтевых пластинках элементы гриба имеют вид ветвящегося мицелия, цепочек из округлых и многогранных спор, а также крупных (5-8мкм) двухконтурных клеток.

Микроскопический метод позволяет быстро поставить диагноз трихофитии и отдифференцировать зоофильные трихофитоны от антропофильных, что имеет важное практическое значение. При необходимости при трихофитии выполняется культуральное исследование.

Микологический метод.На среде Сабуро рост T.tonsurans появляется на 4-5-й день, колонии гриба плотные, морщинистые, крупноскладчатые с пупкообразным или вдавленным центром (наподобие кратера вулкана) или же плоские, сухие, изрезанные. Поверхность колонии покрыта порошком наподобие пудры, колонии окрашены в различные цвета - от бело-серого до желтого и коричневого. При микроско­пии культуры находят микроконидии, длиной 3-7мкм, реже макроконидии, мицелий.

Колонии T.violaceum на среде Сабуро появляются только к 3-4 неделе. Поверх­ность колонии складчатая, кожистая, маслянистая или матовая с хорошо ограниченными краями, диаметр - 2,5-3,0 см, цвет от фиолетового до бледно-сиреневого, иногда окраска отсутствует. Микроскопия культуры гриба дает возможность выявить септированный мицелий длиной 2-4мкм, а также хламидоспоры.

Из зоофильных трихофитонов наибольшее значение имеет вид T.mentagrophytes. Колонии на среде Сабуро появляются на 2-3 день после посева, колонии плоские, поверхность порошкообразная или изрезанная. Цвет колоний белый, кремовый, реже красно-коричне­вый. При микроско­пии обнаруживают ветвящиеся нити септированного мицелия, закрученные в спирали или в виде штопора, округлые или реже грушевидные микроконидии, располагающиеся вдоль гиф в виде гроздьев. Макроконидии многокамерные (от 2 до 8 камер), размером от 8 до 40-50мкм. В старых культурах обнаруживаются хламидоспоры.

Методы генодиагностики.Разработаны методы ПЦР-диагностики три­хофитии.

Микроспория.

Возбудителями микроспории чаще всего являются зоофильный гриб Microsporum canis, вызывающий заболевание у кошек, собак и человека, а также антропофильный гриб M.ferrugineum.

Люди (чаще дети), заражаются от больных бродячих животных или больных людей. Поражаются кожа, волосы и очень редко ногти. При микроспории, вызванной зоонозными видами гриба, на волосистой части головы возникает крупный очаг, в котором волосы обломаны на высоте 5-8мм над поверхностью кожи. В очагах поражения имеются и непораженные волосы. Рядом с крупным очагом видны множественные мелкие очаги. Вокруг пеньков волос имеется чехол из спор гриба. При микроспории, вызванной антропонозными видами гриба, на гладкой коже появляются четко отграниченные множественные кольцевидные шелушащиеся очаги розового цвета. признаком Для микроспории характерно появление зеленого свечения пораженных волос при люми­несцентном освещении очага поражения в темном помещении. Лабораторная диагностика микроспории включает следующие методы исследования.

Микроскопический метод.Пораженный при микроспории волос характеризуется наличием многочисленных мелких круглых спор гриба, диаметром 2-З мкм, сплошь окружающих волос в основании и тесно прилегающих друг к другу в виде мозаики. Внутри волоса можно обнаружить септированный мицелий. В чешуйках пораженной кожи или в ногте мицелий гриба выглядит в виде тонких ветвящихся септированных нитей. Споры гриба в пушко­вом волосе располагаются мозаично, вне волоса или же по типу эндотрикса, сплошь заполняя волос параллельными цепочками из мелких спор.

Микологический метод состоит в посеве исследуемого материала на среду Сабуро или другие среды для грибов.

Колонии М.canisкрупные, серого цвета или белые, мучнистые или пушистые. Мицелий напоминает ствол бамбука, состоит из утолщенных на одном конце клеток ракетообразной формы. Имеются многоклеточные макроконидии в виде веретена, покрытые ворсистой оболочкой, небольшое количество микроконидий, округлые хламидоспоры; концы мицелия заканчиваются образованиями, напоминающими гребешки.

Рост M.ferrugineum характеризуется появлением плоских, бугристых или кожистых куполообразных изрезанных на сектора колоний желтого, коричневого, реже красного цвета. Могут встречаться желтые строчковидные, восковидные, а также беловато-мучнистые мелкобугристые или складчатые колонии. В культурах обнаруживают широкий мицелий, хламидоспоры, цепочки из полиморфных клеток. Макроконидий, как правило, нет, микроконидии встречаются редко.

Фавус (парша).

В настоящее время этот микоз встречается крайне редко. Возбудителем в подавляющем большинстве случаев является гриб Trichophyton schonleini (Achorion schonleini). Источником заражения людей (чаще всего детей), является больной фавусом человек, пути заражения - прямой контакт или через загрязненные предметы (расчески, полотенца и т.д.).

При фавусе поражаются гладкая кожа, волосы и ногти. Характерным элементом являются скутулы - круглые, плоские или в виде блюдечка образования желтого цвета, 2-3 см в диаметре, крошковидной консистенции, плотно спаянные с кожей и состоящие из элементов гриба, а также поврежденных клеток эпидермиса. Скутулы могут сливаться друг с другом, при этом образуются корки зеленовато-желтого или желто-бурого цвета. Характерным признаком фавозных скутул является их «амбарный», или «мышиный» запах. Пораженные грибом волосы сухие, мутные, серого цвета, спаяны в толще скутулы. Крайне редко поражаются при фавусе лимфатические узлы, легкие, слизистая кишечника, кости и мозг. Применяются следующие методы лабораторной диагностики фавуса.

Микроскопический метод.При фавусе элементы гриба полиморфны - наряду с тонким (2-Змкм) септированным мицелием встречается более широкий (4-6мкм) мицелий, распадающийся на прямоугольные клетки с двухконтурной оболочкой, а также цепочки и кучки из круглых и многогранных спор, при этом волос никогда не заполняется элементами гриба сплошь. Наличие пузырьков воздуха и капелек жира не является характерным признаком микоза. В зрелой скутуле находят большое количество крупных многогранных и округлых спор, расположенных кучками или короткими цепочками; клеточных элементов кожи почти не видно. В пораженных ногтевых пластинках элементы гриба расположены неравномерно в виде одиночных клеток или нитей мицелия или в виде ветвящегося мицелия в большом количестве с цепочками или кучками полиморфных спор.

Микологический метод– выделение чистой культуры гриба на среде Сабуро. Колонии Trichophyton schonleini на этой среде сначала гладкие, желтовато-бе­лые, затем высокие, похожи на строчок или губку, коричневого цвета, крошковидной консистенции. Описаны также кратерообразные, гипсовидные, складчатые, барха­тисто-мучнистые колонии. При микроскопии культур обнаруживают септированный мицелий с ветвлениями в виде рогов северного оленя или канделябров, на концах которого расположены крупные округлые хламидоспоры, а также тупоконечные длинные и широкие веретенообразные образования. Кроме того, встречаются булавовидные вздутия и широкие сплющенные клетки, похожие на шляпку гвоздя («фавозные гвозди»), и крупные грушевидные микроконидии, располагающиеся кучками по бокам и на концах мицелия или вне его.