Аптечной посуды и вспомогательного материала

Отбор проб: аптечную посуду в количестве 3 штук одного объема от­бирают в момент приготовления лекарственных форм. Ее доставляют в ла­бораторию в укупоренном виде, используя пробки и прокладки для отпуска лекарственных средств. Вспомогательный материал (пробки, прокладки и др., по 5 штук) отбирают фламбированным пинцетом в отдельные стериль­ные флаконы. Флаконы закрывают ватно-марлевыми пробками и бумажными колпачками.

Методика исследования: 1. Определение общего микробного числа – количества мезо­фильных аэробных и факультативно анаэробных бактерий в 10 см³ (10 мл) смывной жидкости. Три одинаковых флакона последовательно ополаскивают 10 мл стерильной водопроводной воды. Воду из флакона во флакон перели­вают над пламенем горелки, тщательно ополаскивая каждый флакон. Во флаконы с вспомогательным материалом также наливают по 10 мл стериль­ной водопроводной воды и тщательно ополаскивают. По 1 мл смывной жид­кости вносят в две стерильные чашки Петри и заливают расплавленным и остуженным питательным агаром (метод глубинного посева). Инкубируют при +37°С 24 ч и еще 24 ч при комнатной температуре. Определяют среднее число колоний, выросших на поверхности и в глубине питательного агара и умножают на 10, что соответствует содержанию бактерий на поверхности трех одноименных флаконов или пяти предметах вспомогательного материа­ла.

2. Определение колиформных бактерий. Оставшиеся 8 мл смывной жид­кости засевают в 1 мл концентрированной глюкозо-пептонной среды и ин­кубируют при +37°С 24 часа. Дальнейший ход исследования описан в разде­ле «Санитарно-микробиологическое исследование дистиллированной воды».

Требования к микробиологической чистоте лабораторной посуды: общее микробное число не должно превышать 150 колонеобразующих единиц (КОЕ) в смыве с 3-х флаконов, с 5-ти пробок, с 5-ти прокладок; при­сутствие колиформных бактерий не допускаются.

Методика исследования: 1. Общее микробное число и присутствие колиформных бактерий опре­деляют у инъекционных растворов и глазных капель до стерилизации (см. санитарно-микробиологическое исследование воды).

2. Исследование на стерильность. Для контроля стерильности инъек­ционных растворов, глазных капель и др. лекарственных средств исполь­зуют метод прямого посева или метод мембранной фильтрации. Материал засевают в асептическом боксе. Перед исследованием флаконы проверяют визуально на целостность укупорки и обрабатывают 3% раствором перекиси водорода или 70% спирта. В предбоксе сотрудники лаборатории тщательно моют руки с мылом, вытирают стерильным полотенцем, надевают стерильные халаты, шапочки, четырехслойные марлевые маски и бахилы. Перед началом работы в боксе руки обрабатывают 70% спиртом. Для работы используют стерильные инструменты. Перед посевом содержимое флаконов встряхивают, а гор­лышки флаконов обжигают над пламенем горелки.

Метод прямого посева: исследуемый материал засевают по 1 мл в 2 про­бирки с 20 мл тиогликолевой среды и 1 пробирку с жидкой средой Сабуро. Тиогликолевую среду инкубируют при +30-35°С, среду Сабуро – при +20-25°С в течение 14 суток. При отсутствии помутнения пита­тельной среды (обычно через 3-7 суток) делают пересев на те же пита­тельные среды. Посевы просматривают в рассеянном свете ежедневно и по окончании периода инкубации. Наличие роста микроорганизмов в питатель­ных средах оценивают визуально по появлению мутности, пленки, осадка и другим признакам. Выявленный рост подтверждают микроскопией мазков, окрашенных по Граму. Испытуемый препарат считают стерильным при отсутствии роста микроорганизмов.

Метод мембранной фильтрации используют для определения стерильности лекарственных средств, обладающих антимикробным действием и лекарствен­ных средств, разлитых объемом более 100 мл. Испытуемый раствор пропус­кают через один или несколько мембранных фильтров. Фильтр извлекают из установки, разрезают стерильными ножницами пополам, одну половинку по­мещают во флакон с тиогликолевой средой, другую – со средой Сабуро и инкубируют, как после прямого посева.

Требования к микробиологической чистоте инъекционных растворов и глазных капель: общее микробное число инъекционных раство­ров до стерилизации должно быть менее 30 КОЕ, глазных капель до 5-7 КОЕ, присутс­твие колиформных бактерий не допускается. Инъекционные растворы и глазные капли после стерилизации, а также глазные капли, приготовлен­ные в асептических условиях на стерильной основе, должны быть стериль­ными.