Тема: Микробиологическая диагностика стафилококковых инфекций
Занятие №2
Тема
Цель занятия:
Тема: Микробиологическая диагностика стафилококковых инфекций
Задача: В стационар поступил ребенок 2-х лет с диагнозом гнойный ринит. У ребенка наблюдали головную боль, озноб, ломоту в мышцах, гнойные выделения из носа. После осмотра вокруг глаз и рта была обнаружена мелкоточечная сыпь, которая затем распространилась на туловище и конечности. Сыпь особенно выражена в крупных кожных складках. Кожа на ощупь напоминала наждачную бумагу, при прикосновении болезненна. Через несколько часов начался процесс отслойки верхних слоев кожи. Кожа стала похожа на папиросную бумагу; малейшее надавливание (даже на внешне здоровые участки) вызывало отслоение.
Был поставлен предварительный диагноз стафилококковый ринит с осложнением в виде синдрома ошпаренной кожи. Для уточнения диагноза отделяемое из носа и соскоб с пораженной кожи были доставлены в бактериологическую лабораторию.
1. Обнаружение предполагаемого возбудителя в исследуемом материале и идентификация по морфотинкториальным свойствам.
- Приготовление фиксированного препарата – мазка из гноя.
- Окраска по Граму.
- Иммерсионная микроскопия (х90).
Описание :
Заключение :
2. Посев на среду кровяной агар и ЖСА. Культивирование при 37оС, 18-24ч.
Результат:
Кровяной агар ЖСА
Описание :
Заключение :
3. Идентификация чистой культуры и определение ее чистоты с учетом морфотинкториальных свойств (окраска по Граму).
Электронная микроскопия, три различных метода.
Описание : Описание : Описание :
Заключение : Заключение : Заключение :
4. Окончательная идентификация исследуемой культуры по результатам исследования сахаролитических свойств, коагулазной активности.
Визуальная оценка результатов исследования:
1. Коагулазная активность: определяется по коагуляции цитратной плазмы, «+» - наличие желеобразного сгустка или комочка фибрина в виде «пустого чехольчика» на дне пробирки.
Или
Среда Baird-Parker, модификация теллурит-глициновой среды, наличие каталазной активности – зоны просветления.
Описание :
Заключение :
- Каталазная активность: газообразование свидетельство положительной реакции
Контроль Опыт
2. Сахаролитические свойства: появление красной окраски свидетельствует о ферментации данного углевода.
HiStaph Набор для биохимической идентификации стафилококков (12 тестов), (1уп. х 20 наборов) (панель с тестами, реагенты, пробирки со средами, петли, капельницы, таблицы) (ФСЗ 2008/01440), производство HiMedia
Контроль Глюкоза Маннит
Описание :
Заключение :
5. Определение антибиотикочувствительности с целью выбора рациональной антибиотикотерапии
Метод радиальной диффузии с помощью бумажных дисков.
Критерий учета: задержка роста микроорганизмов вокруг диска.
Критерий оценки: сравнение диаметра зоны задержки роста с данными, приведенными в таблице.
Цефазолин - 17 мм - умеренно чувствительны
Цефатаксим - 21 мм - чувствительны
Линкомицин - 18 мм - умеренно чувствительны
Рифампицин - 20 мм — чувствительны
Пенициллин - 6 мм – устойчивы
Доксициклин – 23мм – чувствительны
Заключение :