Санитарно-микробиологическое исследование готовых лекарственных форм

Отбор проб: от каждой серии лекарственного средства отбирают среднюю пробу (не менее 50г, для мягких форм – не менее 15 г), состо­ящую из разовых проб, взятых, как минимум, из 10 разных упаковок. Отобранные пробы необходимо сопровождать актами. В за­висимости от физических свойств лекарственной формы образец для анали­за готовят в виде раствора, суспензии или эмульсии.

Методика исследования: 1. Определение общего микробного число. Образец лекарственного средства разводят 1:10, для чего 10 г (мл) препарата растворяют, суспензируют или эмульгируют в соответствующем объеме фосфатного буферного раствора. Посев проводят двухслойным агаровым методом: по 1 мл разведения 1:10 вносят в две пробирки с 4 мл расплавленного и охлажденного до +45-50°С пита­тельного агара, тщательно перемешивают и переносят в 2 чашки Петри с 15-20 мл питательного агара. Покачиванием равномерно расп­ределяют верхний слой агара. После застывания среды чашки инкубируют в термостате при +37°С в течение 5 суток, подсчитывают число колоний на 2 чашках, находят среднее значение и, умножая на показатель разведения, вычисляют число бактерий в 1 г (мл) лекарственного средства.

2. Определение плесневых и дрожжевых грибов. 1 мл разведения 1:10 (см. выше) вносят в 2 пробирки с расплавленной и остуженной сре­дой Сабуро, тщательно перемешивают и выливают в 2 чашки Петри, инкуби­руют при +20-22°С в течение 5 суток. Количество дрожжевых и плесневых грибов определяют, как и общее микробное число.

3. Определение стафилококка, синегнойной палочки, кишечной палоч­ки, сальмонелл. Для определения эшерихий и сальмонелл 10 г (мл) иссле­дуемого препарата вносят в среду накопления – лактозный бульон, из расчета 1:10, инкубируют при +37°С в течение 2-5 часов. После инкубации 10 мл среды накопления переносят в 100 мл глюкозо-пептонной среды, пе­ремешивают и инкубируют в течение 24 ч. Остальную среду накопления ставят в холодильник (для количественного определения энтеробактерий). При отсутствии эшерихий и сальмонелл глюкозо-пептонная среда остается прозрачной. При наличии признаков роста, делают высевы на висмут-суль­фит агар (для обнаружения сальмонелл) и MacConkey agar (для обнаружения эшерихий). Дальнейшая идентификация чистых культур проводится по схе­ме. Для количественного определения энтеробактерий материал (из холо­дильника) мерно засевают в различные объемы глюкозо-пептонной среды, инкубируют при +37°С 24 ч. При наличии роста делают высев на MacConkey agar для получения изолированных колоний. По появлению типичных колоний, образованных оксидазоотрицательными грамотрицательными палочками, определяют нали­чие в материале энтеробактерий. Количество клеток энтеробактерий в иссле­дуемой лекарственной форме определяют по специальной таблице.

Для обнаружения стафилококка и псевдомонад испытуемый образец в количестве 10 г (мл) вносят на специальную среду накопления и инкубируют при +35°С 24-48 ч. При наличии роста делают высевы на питательный агар с маннитом для обнаружения стафилококка и питательный агар с гли­церином и хлоридом магния для обнаружения псевдомонад.

Обсемененность лекарственных форм микроорганизмами регламентируют государственные фармакопейные статьи (см. таблицу).

Таблица «Требования к микробиологической чистоте готовых лекарственных форм»

Лекарственные формы	П о к а з а т е л и
Общее микробное число (в 1 г или 1 мл)	Плесневые, дрожжевые грибы ( в 1 г или 1 мл)	Pseudomonas aeruginosa, Staphylococ- cus aureus	Escherichia coli, Salmonella spp.	Другие энтеро- бактерии
Средства для новорожденных (для внутреннего или наружного применения)	C Т Е Р И Л Ь Н О С Т Ь
Средства для приема внутрь
Детские (до 1 года) лекарственные средства	<50 (суммарно)	отсутствие
Детские лекарственные средства	<500	<50	отсутствие
Жидкие (растворы, сиропы, кап­ли)	<500	<50	отсутствие	<100
1

Продолжение табл.

1
Тведые (таблетки, капсулы, гранулы и т.д.)	<1000	<100	отсутствие	<100
Жидкие лекар. средства из сырья природ­ного происхо­ждения	<5000	<100	отсутствие	<100
Средства для местного применения
Перкутанно, интраваги­нально, для ингаляций, в полость уха, носа.	<100 (суммарно)	отсутствие
Ректально	<1000	<100	отсутствие

Тема лабораторной работы № 3: