Микрофлора ротовой жидкости
Ротовая жидкость является резервуаром микрофлоры и пищевых остатков, из которых формируются зубные отложения; определена тесная корреляция между численностью микроорганизмов в зубных отложениях и в ротовой жидкости. Учитывая это, а также то, что ротовая жидкость — более доступный для исследования материал, чем зубной налет, в клинической практике чаще изучают содержание микроорганизмов в слюне и по результатам исследования косвенно судят о качестве зубных отложений.
1. Бактериологическое определение концентрации Streptococcus mutans.Ротовую жидкость (3—5 мл) собирают в пробирку и передают ее в лабораторию. Материал разводят, засевают на селективную питательную среду и инкубируют его. Учитывают число колоний, выросших из 1 мл слюны. Результат вычисляется в КОЕ — колониеобразующих единицах, и часто именуется индексом стрептококков. Величина индекса стрептококков более 2-105 КОЕ/мл рассматривается как фактор риска развития кариеса.
2. Бактериологическое определение концентрации Lactobacillus. Техническое выполнение метода отличается от определения S. mutans лишь селективными условиями выращивания колоний. При индексе лактобацилл, превышающем 1*1О6 КОЕ/мл, делают вывод о значительном риске развития кариеса. Указывают, что величина индекса Lactobacillus коррелирует с уровнем потребления сладостей и с КПУЗ, но не соотносится с количеством зубных отложений, определяемым по индексам гигиены.
3. Определение концентрации Streptococcus mutans методом погруженных стекол. Для упрощения этапов забора ротовой жидкости, транспортировки, подбора сред и условий для инкубации материла, в течение последних 30 лет производятся бактериологические тест-системы, применимые в «полевых» условиях. Тест-система представляет собой флакон, наполненный селективной питательной средой (содержащей в том числе антибиотик бацитрацин, угнетающий рост всех других оральных микроорганизмов, способных к росту на этой среде, кроме S. mutans и S. sobrinus), к крышке которого присоединен небольшой пластиковый стеклянный шпатель. Для забора материла достаточно поместить шпатель под язык, так как S. mutans быстро прикрепляются к любой гладкой поверхности. Флакон плотно закрывают, шпатель при этом погружается в питательную среду. После инкубации флакона в термостате в течение 4 сут. изучают количество (плотность) колоний, выросших на шпателе.
Оценку проводят, зрительно сравнивая свой материал с фотографиями — шаблонами, полученными изготовителями тест-систем в ходе калибровочных бактериологических исследований и соответствующих КОЕ/мл=1*103; 1*1О4; 1*1О5; 1*1О6. При КОЕ/мл=105 диагностируют высокий риск кариеса (рис. 5.25).
4. Определение концентрации Lactobacillus в ротовой жидкости методом погружных стекол. Тест-система состоит из флакона и помещенного в него шпателя (предметного стекла), покрытого селективной средой. Поверхность шпателя поливают свежесобранной стимулированной слюной (считают, что на поверхности шпателя остается около
1 мл слюны), помещают его в пустой флакон и инкубируют в течение
2сут. (рис. 5.26). Результаты оценивают при помощи фотографий-шаблонов, так же как и при определении количества стрептококков.
5.Титр лактобактерий. Материал (ротовую жидкость) собирают через 1—3 ч после еды. В бактериологической лаборатории ротовую жидкость последовательно десятикратно разводят на 7—9 порядков (10-9) и засевают каждым «разведением» отдельный флакон с питательной средой. Логарифмический показатель наибольшего разведения, давшего рост лактобацилл, называют титром. Титр <10-4считают повышенным, соответствующим высокому риску развития кариеса.