Бактериологический метод диагностики менингокковых инфекций
Цель: ____________
Материал: _____________________________________________________________
I этап
Ориентировочная бактериоскопия
Приготовить мазок из исследуемого материала, окрасить по грамму/метиленовым синим, микроскопировать
Морфологические свойства: форма_____________________
расположение_________________
Тинкториальные свойства____________________________
2. Посев на элективные среды с целью получения изолированных колоний с последующей инкубацией при t= 37° C в течение 18-24 ч.
Произвести посев отделяемого слизистой оболочки носогдотки на сывороточный агар с целью выделения чистой культуры менингококков.
II этап
Изучение культуральных свойств
Изучить культуральные свойства колоний, выросших сывороточном агаре
Признаки | Характеристика колоний на сывороточном агаре |
1. Размер | |
2. Цвет | |
3. Форма | |
4. Характер края | |
5. Характер поверхности | |
6. Консистенция | |
7. Внутренняя структура | |
8. Генетическая форма |
2. Приготовление мазка, окраска по Грамму, изучение морфологических и тинкториальных свойств: бобовидные грам(-) диплококки
Пересев на скошенный агар с целью накопления чистой культуры
Отсеять изолированную колонию, выросшую на электиной среде (штрихами) на среду накопления (скошенный сывороточный агар) с целью накопления чистой культуры и инкубируют при 37°C и 22°C
III этап
Идентификация выделенной чистой культуры по
1. морфологическим и тинкториальным свойствам: бобовидные грам(-) диплококки
2. культуральным свойствам: мелкие бесцветные нежные колонии вязкой консистенции
3. биохимическим свойствам. Посев изолированных колоний на пестрый ряд Гисса (см.табл.)
Постановка:______
____________________________________
глюкоза лактоза мальтоза маннит сахароза
МПА "____" "____" "____" "____" "____" МПБ
Учет реакции:____
__________________
4. определение факторов патогенности (оксидазы)
Постановка:на изолированную колонию наносят 1 каплю индикатора - диметилпарафенилендиамида
Учет:+ реация - окрашивание колонии в розовый цвет
Серологическая идентификация
Определение серогруппы:
Постановка:______
____________________________________
Учет: _____________
__________________
IV этап
Учет результатов. Выдача ответа
6. Учесть РПГА с “парными” сыворотками в диагностике менингококковой инфекции
Метод: ___________
Ингредиенты: _____
Постановка: ______
____________________________________
Разведения: 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 контроль эр. д-ма
I сыворотка
II сыворотка
“___“ “___“ “___“ “___” “___“ “___“
Учёт: _____________
Заключение: ______
__________________
7. Заполнить таблицу: «Свойства основных возбудителей бактериальных менингитов»
Подозреваемый микроб | Морфология | Интенсивность роста на агаре | Изменение цвета шоколадного агара вокруг колоний | Обработка колоний 3% р-ром KOH | Ферменты | Окраска по Граму | |||
Сывороточный агар | Шоколадный агар | Оксидаза | Каталаза | Уреаза | |||||
Neisseria meningitides | |||||||||
Haemophilus influenzae | |||||||||
Streptococcus pneumoniae | |||||||||
Streptococci B,D,viridans | |||||||||
Listeria monocytogenes | |||||||||
Acinetobacter calcoaceticus |
Подпись преподавателя______________________