Исследование микробов, содержащихся в исследуемом материале в высокой концентрации
Готовят ряд стерильных пробирок с изотоническим раствором хлорида натрия для приготовления разведений исследуемого материала (рис. 4.1).
Рис. 4.1. Схема приготовления разведений при проведении метода количественного посева исследуемого материала
Последовательное разведение исследуемого материала приводит к снижению концентрации бактерий. При посеве на питательную среду в одинаковом объеме (0,05 мл, например) содержимого каждой пробирки с разведенным исследуемым материалом есть возможность подсчета числа колоний (рис.4.2).
Рис.4.2. Результаты количественного посева для определения содержания КОЕ в исследуемом материале
Каждая колония - это потомство одной бактериальной клетки, поэтому число колоний равняется числу бактериальных клеток в исследуемой пробе, или числу колониеобразующих единиц - КОЕ. Для определения количества бактерий в единице объема исследуемого материала остается число колоний умножить на фактор разведения исследуемого материала:
КОЕ =10 ´ 106´ 20 = 2 ´ 108 / мл,
где 10 - число колоний, 106 - концентрация микробов в третьем разведении, 20 - часть от 1 мл, составляющая 0,05 мл, т.е. посевную дозу в данном примере.