Оценка спермы на пунктах искусственного осеменения
На пунктах искусственного осеменения оценивают только активность движения спермиев. Для проверки качества спермы, сохраняемой при температуре 2—5 °С, открывают термос, берут из флакона каплю спермы, кладут на предметное стекло и исследуют под микроскопом подвижность спермиев. Пробу надо брать быстро, чтобы не допускать нагревания спермы.
Исследуют сперму при температуре 40—41 °С, для этого используют обогревательные столики различных конструкций (В. А. Морозова и др.) или термостаты. Нельзя подогревать предметное стекло на пламени спиртовки или другими методами без контроля температуры. При активности спермиев быка ниже 7 баллов, барана — 8, жеребца — 5 и хряка — 6 баллов сперму не используют для осеменения.
Порядок оттаивания замороженной спермы приведен в таблице 11. Оттаянную сперму в любой расфасовке вынимают из водяной бани и оставляют при температуре 18—20 °С до использования, но не более 10—15 мин. Вновь замораживать оттаянную сперму нельзя. Подвижность спермиев в оттаянных необлицованных гранулах определяют так же, как в сперме, сохраненной при температуре 2—5 °С. Оболочку упаковки доз спермы в облицованных гранулах 2после оттаивания гранул насухо вытирают марлевой салфеткой, край упаковки зажимают между двумя предметными
11. Оттаивание замороженной спермы
Температура оттаивания, "С |
Продолжительность оттаивания, с |
Вид животного |
Фасовка спермы и доза
Бык Необлицованные мелкие гранулы по 0,1— 0,2 мл
Необлицованные крупные гранулы по 0,5 мл
Облицованные гранулы по 0,25 мл
Соломинки по 0,25 мл
Баран Гранулы по 0,2 мл
Жеребец Алюминиевые пакеты по 25 мл
Гранулы по 0,5 мл
40—42 Ампулу или флакон с 0,8—1 мл 5—8
2,9%-ного стерильного раствора цитрата натрия помещают в водяную баню на 2—3 мин, затем в теплый раствор опускают одну гранулу
40—45 Выдержав в водяной бане 2—3 мин 90—120 стерильный флакон, в него опускают две гранулы 40 Дозу спермы пинцетом с широ- 8—10
кими браншами опускают в водяную баню
38 Соломинки погружают в водяную 10—11 баню заводской пробкой вниз, оставляя верхний конец ее на 0,5— 1 см выше поверхности воды 70—80 В разогретый водяной или До полного
электрический отгаиватель оттаивания
засыпают одновременно до 20 гранул; оттаявшая сперма стекает в стерильный флакон 40 Удерживают пакет пинцетом, его 45—50
погружают в водяную баню и слегка покачивают 40 В стерильную коническую кол- До полного бу быстро насыпают гранулы в оттаивания
один слой и погружают колбу в водяную баню
стеклами 1 с помощью специальных пружинных зажимов 3 или бельевых прищепок 4 (рис. 31), ставят на обогревательный столик микроскопа под малое увеличение и просматривают спермии через пленочную упаковку. Допускается использование оттаянной спермы с подвижностью спермиев не ниже 3—4 баллов для коров и телок, 4 баллов для овец и 2 баллов для кобыл.
Рис. 31. Фиксация оттаянной дозы спермы между двумя предметными стеклами с помощью пружинных зажимов (справа) и бельевых прищепок (слева) перед исследованием на подвижность спермиев: 7 — предметное стекло; 2 — упаковка с гранулами спермы; 3— зажимы для фиксации стекол; 4 — бельевые прищепки |
Сохраняемую сперму периодически направляют в лабораторию для бакте-
Правильный выбор времени осеменения — одно из главных условий получения высокой оплодотворяемости. Это сложный и ответственный этап по искусственному осеменению животных всех видов, особенно коров, у которых по сравнению с другими животными половая охота намного короче и чаще регистрируются неполноценные половые циклы.
Рассчитывать на успешное осеменение можно только при наличии всех феноменов стадии возбуждения полового цикла: течки, полового возбуждения, охоты и овуляции. Ориентация на признаки одного из феноменов позволяет рассчитывать только на большую или меньшую вероятность оплодотворения.
Осеменение необходимо производить в наиболее благоприятный для встречи спермиев с яйцом момент. У коров половая охота всегда наступает позднее течки и не всегда совпадает во времени с половым возбуждением. Поэтому осеменение коров только на основании учета признаков течки и полового возбуждения малоплодотворно, так как спермии в этом случае погибают, не дождавшись выхода яйцеклетки. Выделения из половой щели — не всегда признак течки, они наблюдаются также при воспалительных процессах в половых органах и при нормальном состоянии у коров на 4—5-м месяце беременности. Более точным признаком готовности животного к оплодотворению служит наличие половой охоты и течки. В этот период все процессы, направленные на осуществление осеменения, достигают максимального развития. Отмечается значительное усиление антиперистальтических сокращений матки, играющих решающую роль в засасывании спермы в матку. Выделение слизи, обладающей высокой бактерицидностью, эластичностью, низкой вязкостью и имеющей щелочную реакцию, улучшает переживае- мость спермиев и ускоряет их продвижение. Канал шейки матки полностью открыт, что способствует правильному введению спермы. Отмеченные признаки свидетельствуют о необходимости осеменения животных только в период половой охоты. Поэтому своевременное и безошибочное выявление охоты, особенно у коров, рассматривается во всех странах мира как самая важнейшая проблема, от решения которой в первую очередь зависят результативность искусственного осеменения и увеличение выхода приплода.
В производственных условиях охоту у самок нужно определять самцом- пробником. Некоторые специалисты считают, что охоту у самок можно выявлять и без пробника. Но такое утверждение неправильно. Можно заметить общее возбуждение самки, течку, но не охоту, так как охота — строго специфический феномен (рефлекс), реакция самки на самца. Рефлексологический метод — единственный способ диагностики охоты. При пробе у одних животных решающее значение имеет реакция самки на самца, у других (овца) учитывается и реакция самца на самку в охоте, которую он выявляет прежде всего при помощи обонятельных восприятий.
риологического исследования. Нельзя грибы, вирусы и другие микроорганизмы; использовать сперму, содержащую пато- число непатогенных микробов в одной генные и условно-патогенные бактерии, дозе спермы не должно быть более 500. ОСЕМЕНЕНИЕ ЖИВОТНЫХ ВРЕМЯ ОСЕМЕНЕНИЯ |
Для выбора времени осеменения отдельные авторы предлагают руковод
ствоваться визуальным выявлением общей реакции (полового возбуждения), отождествляя ее с охотой. Однако половая охота всегда наступает позднее течки и не всегда совпадает по времени с половым возбуждением. Вот почему при визуальном выборе времени осеменения неизбежны ошибки, а на пункты искусственного осеменения обычно доставляют в среднем 30 % и более коров, не проявивших охоту. К тому же при наличии половой охоты признаки общей реакции могут проявляться слабо (тихо) или отсутствовать (ареактивный половой цикл). Поэтому при визуальном выборе времени осеменения отмечаются не только ошибки в определении половой охоты, но и ее пропуски (40 % и более). Даже при трехкратном в течение суток визуальном наблюдении пропуски половой охоты достигают 20 %.
Самец выявляет самок в охоте в основном путем восприятия специфических запахов (половых феромонов: эпа- гонов, гонофионов и гамофионов). Эти запахи не улавливаются ни визуальным, ни различными инструментальными или какими-либо другими способами, позволяющими диагностировать охоту.
Для проведения пробы на охоту у коров выделяют рядом с пунктом искусственного осеменения и коровником специальный загон с твердым покрытием и высоким навесом. Загон огораживают сплошным забором. Наличие такого загона позволяет проводить пробу коров на охоту и стимуляцию половой функции пробником в любое время года.
В загон, где находится бык-пробник, выпускают коров, находящихся в послеродовом периоде (с 4—5-го дня после родов, для стимуляции половой функции), телок, достигших 16-месячного возраста, а также всех осемененных самок (с 10-го по 30-й день после осеменения, для диагностики начальных стадий беременности и бесплодия). Быка- пробника выпускают к самкам 2 раза в день по 1,5—2 ч утром и вечером. В это время ведут тщательное наблюдение за животными. Более длительное пребывание быка-пробника среди маточного поголовья и тем более совместная пастьба с коровами недопустимы, так как это может быстро вызвать у быка торможение половых рефлексов.
После выявления охоты корову или телку немедленно выводят из загона, для того чтобы пробник отыскивал других самок в охоте.
Удобно проводить пробу коров на охоту в молочном комплексе с цеховой системой. Здесь в цехе осеменения сосредоточивают отелившихся коров и содержат их до осеменения и установления беременности. В комплексе на 800 коров содержат в цехе осеменения (при пункте) четырех пробников и используют их попеременно (по два в день). В момент осеменения пробника помещают около коров. Это усиливает проявление половых рефлексов у животных и облегчает их осеменение.
В нетельных хозяйствах загон с расколом и «накопителем» устраивают напротив каждой секции, где размещены ремонтные телки.
Могут быть различные варианты использования быков-пробников. Но во всех случаях должны строго соблюдаться принцип временного пребывания пробников среди коров и телок и контроль за их использованием со стороны зооветспециалистов. В ряде стран широко используют быков-пробников с маркерами (рис. 32). Маркер представляет собой сферическую металлическую коробку, в центре которой имеется выдвигающийся выступ. Полость коробки заполняют цветной пастой (в зависимости от масти коров). В момент садки быка-пробника выступающий из коробки выступ, соприкасаясь с поясницей коровы, перемещается внутрь, в результате чего краска вытекает. На корове остаются многочисленные мазки краски (единичный не считается), свидетельствующие о наличии охоты у коровы. По материалам американских ученых, об-
Рис. 32. Бык-пробник с метчиком |
щение по 30 мин утром и вечером двух быков-пробников с метчиками позволяет выбрать для осеменения на 15 % коров больше, чем при визуальном наблюдении. Особенно важно то, что пробники выявляют охоту у коров, не проявляющих признаков полового возбуждения (ареактивный половой цикл). При визуальном выборе времени осеменения такие животные остаются неосемененны- ми.
У о в е ц быстрее и надежнее выявлять охоту баранами-пробниками вазэк- томированными. Бараны-пробники с фартуками менее желательны, так как у них быстро возникает торможение половых рефлексов и они по сравнению с вазэктомированными баранами не выявляют 12— 15 % овец в охоте. Чтобы облегчить процесс выборки овец в охоте, вазэктомированнцм баранам прикрепляют в области груди специальные красящие метчики. В отару пускают пробников поочередно, используя ежедневно по 5—6 баранов. Такие пробники за 18 дней случного сезона выявляют охоту у 93—98 % овец маточного поголовья (Н. А. Желгобрюх).
Находясь в отаре, вазэктомирован- ные бараны делают садки на овец в охоте и с помощью метчиков окрашивают их.
Пропуская отару через раскол, удается за 10—15 мин отобрать всех овец в охоте вместо 1,5—2 ч при ручном способе отбора. Общение овец с вазэктомированными баранами, сопровождаемое многократными коитусами, укорачивает охоту, усиливает моторику матки и ускоряет овуляцию. Это позволяет заменить двукратное осеменение однократным.
В некоторых хозяйствах в качестве пробников с успехом используют крип- торхидов. Они, как и вазэктомирован- ные бараны, — ценные пробники. Крипторхиды быстро отыскивают овец в охоте, сильно стимулируют их половую функцию, что значительно повышает оплодотворяемость при искусственном осеменении. В Болгарии специально готовят искусственных криптор- хидов, оперируя баранчиковдо 3-месячного возраста.
Пробу молодых кобыл на охоту жеребцом-пробником начинают с начала планового осеменения, а подсосных — с 3-го дня после родов. При этом следует учитывать, что ручная проба не обеспечивает 100%-ного выявления кобыл в охоте, а поэтому ее следует дополнять пробой при помощи оперированного жеребца-пробника. Особенно это необходимо для подсосных кобыл, у которых под влиянием материнского инстинкта половая функция тормозится. Исследования X. И. Животкова показали, что нередко молодые, нервные, мало приученные к обстановке ручной пробы кобылы также отбивают жеребца, в то время как в табуне они постоянно находятся около оперированного пробника и допускают его садку. Поэтому лучший метод пробы кобыл на охоту — двойной: проба оперированным жеребцом в табуне (на ночь пробника удаляют из табуна на отдых) и ручная проба, которая должна тщательно проводиться опытным специалистом.
У с в и н е й, как и у других животных, охоту можно достоверно определить только путем индивидуального контакта свиноматки с хряком-пробником. Некоторые специалисты для определения охоты у свиней рекомендуют прогонять хряка-пробника по проходу свинарника, что является ошибочным. В этом случае на хряка-пробника реагируют не только матки в охоте, но и матки с признаками течки, полового возбуждения и даже вне периода стадии возбуждения полового цикла. Используют хряков-пробников попеременно (один пробник на 200 маток). Очень активны хряки-пробники, полученные от гибридизации домашних свиней с диким кабаном. Во избежание торможения половых рефлексов от хряков-пробников через каждые 3 дня использования получают сперму на искусственную вагину. Менее трудоемко и более эффективно использование оперированных, особенно вазэктомированных хряков-пробни- ков. Но эффект от использования вазэктомированных хряков, как и других пробников, будет только при правильной методике их применения. При садке вазэктомированного хряка на самку, что свидетельствует о наличии у нее половой охоты, нельзя допускать коитуса с этим хряком, так как он затем успокаивается и плохо отыскивает других маток в охоте. Коитус с вазэктомированным хряком следует допускать только после выявления последней свинки в охоте и то не ежедневно, а через каждые 2—3 дня. Это активизирует проявление половых рефлексов. У такого пробника длительное время (известны случаи использования маловесных вазэктомированных хряков более 4 лет) сохраняется половая активность, он быстро отыскивает маток в охоте. Если в качестве пробников используют хрячков с отведением препуциального мешка в правую сторону (на 70—80°), то от них для активизации их половых рефлексов регулярно получают сперму на искусственную вагину.
Пользуясь пробником при искусственном осеменении, надо учитывать наличие и других феноменов стадии возбуждения, так как половой цикл может быть полноценным и неполноценным.
КРАТНОСТЬ ОСЕМЕНЕНИЯ
При выявлении охоты корову следует осеменить немедленно. Задержка с осеменением на 10—12 ч и более недопустима. В данном случае создаются явно неблагоприятные условия для осеменения и оплодотворения: охота, как правило, прекращается, канал шейки матки закрывается, моторика матки ослабевает, слизь становится вязкой, малоэластичной и в ней появляется много лейкоцитов. Продвижение и переживаемость спермиев в половых органах самки значительно ухудшаются. Все это и обусловливает снижение оплодотворяемос- ти.
Безошибочное выявление половой охоты пробником позволило правильно решить вопрос и о кратности осеменения. Главным при искусственном осеменении является не кратность осеменения, а правильный выбор времени проведения первого осеменения, состояние нервной системы самки, определяющее физиологическую готовность половых органов и всего организма в целом к осеменению. Так, эффективность однократного осеменения коров при установлении половой охоты пробником значительно выше, чем при двукратном осеменении с интервалом 10—12 ч, производимом при визуальном определении момента осеменения. Но это не дает основания отказываться от повторного осеменения. Целесообразность его решается главным образом в зависимости от продолжительности охоты и вида используемого пробника. При установлении охоты вазэктомированным быком- пробником корову осеменяют немедленно и однократно. В этом случае охота в результате коитуса укорачивается, овуляция происходит быстрее и двукратное осеменение излишне, так как оно проводится, как правило, после прекращения охоты и не повышает оплодотворяе- мости.
Если половую охоту у коров выявляют быком-пробником, неспособным к коитусу (отведение препуциального мешка в правую сторону и др.), то охота более продолжительная. Поэтому через 10—12 ч после первого осеменения следует еще раз провести пробником пробу коров на охоту. К этому времени у большинства коров охота прекращается, она сохраняется лишь у небольшой части животных. Вторичное осеменение таких коров увеличивает выход приплода, что имеет большое практическое значение.
Некоторые авторы утверждают, что двукратное осеменение коров в течение половой охоты значительно повышает титр спермиоагглютини- нов в сыворотке крови и является одной из главных причин бесплодия. Такое утверждение необоснованно. Повышение титра спермиоагглюти- нинов в крови отмечается только у больных коров с пораженным эндометрием. У здоровых коров процессу агглютинации спермиев препятствуют антиагглютинины, содержащиеся в сперме (секрет простатической железы), в слизи половых органов самки и фолликулярной жидкости граафо- вых фолликулов. Поэтому говорить о большом распространении иммуногенного бесплодия у коров нет оснований.
Овец при двукратном выявлении половой охоты вазэктомированными пробниками с метчиками осеменяют искусственно однократно через 4—5 ч после окончания работы по диагностике охоты. Если применяют обычных баранов-пробников с фартуками и выявляют половую охоту однократно, то овец осеменяют дважды: первый раз — немедленно после выявления охоты и второй раз — через 24 ч. По данным Е. Ф. Лютова, лучшие результаты достигаются при двукратном выявлении охоты и двукратном осеменении с интервалом 12 ч. Повторные осеменения увеличивают плодовитость рождением двоен, троен, так как у овец, особенно некоторых пород (например, романовской), во время стадии возбуждения полового цикла созревают не один, а три фолликула и больше. Сроки их овуляции могут варьировать, вследствие чего важно, чтобы к каждой овуляции в половых органах имелись спермии, способные оплодотворить выделившуюся яйцеклетку.
При использовании хранившейся спермы (ее срок переживаемое™ короче) и двукратном выявлении охоты проводят двукратное осеменение с интервалом 8—10 ч.
Для сокращения числа искусственных осеменений и продолжительности срока осеменения целесообразно за месяц до случного сезона пускать (дозиро- ванно) в отары вазэктомированных баранов (один баран на 100 овец).
Искусственное осеменение овец продолжается, как правило, 35 дней, а при плохих пастбищах — 25—30 дней. По окончании искусственного осеменения в отару осемененных маток пускают баранов для вольного спаривания овец, не оплодотворившихся от искусственного осеменения. Баранов разбивают на две группы и используют их поочередно (через день) только днем, а на ночь удаляют из отары.
В ряде хозяйств практикуют цикличное осеменение овец, когда из осемененных маток формируют новые отары. Этот метод позволяет провести роды в сжатые сроки (примерно у 60—70 % овец). Недостаток этого способа — концентрация всего поголовья овец на период осеменения около пункта искусственного осеменения, что создает проблему обеспечения животных кормами и опасность быстрого перезаражения овец при возникновении инфекционной болезни.
Кратность искусственного осеменения свиней в период стадии возбуждения полового цикла в разных хозяйствах решается по-разному. Свиноматок, выявленных в охоте утром, осеменяют первый раз вечером, а выявленных вечером — утром следующего дня. Повторно осеменение следует проводить через 10—12 ч. При однократном выявлении половой охоты свиноматок осеменяют немедленно, затем повторно через 24 ч.
А. В. Квасницкий рекомендует выявлять охоту у свиней трехкратно, а осеменять однократно: основных свиноматок — через 24 ч, ремонтных — через 30 ч от начала охоты. Материалы А. В. Квас- ницкого свидетельствуют, что однократное, но своевременное осеменение свиноматок дает лучшие результаты, чем различные варианты двукратного осеменения. По данным С. И. Сердюка, в условиях крупных свиноводческих комплексов целесообразно выявлять охоту у свиноматок только один раз в день (в 8 ч утра), а осеменять их спустя 6 ч, т. е. в 14 ч. Через 24 ч повторно осеменяют тех свиноматок, у которых продолжается охота. Такая система осеменения дает хорошие результаты.
Чтобы повысить плодовитость ремонтных свинок и добиться их высокой оплодотворяемости в максимально сжатые сроки, следует практиковать дозированное общение свинок, начиная с 5—6-месячного возраста, с вазэктоми- рованными хрячками-пробниками, а подсосных свиноматок — с 3—4-го дня послеродового периода.
Первое искусственное осеменение кобыл проводят на второй день (вечером) и повторяют до отбоя через 48 ч, а при наличии ярко выраженной охоты — через 24—36 ч (но не более 3 раз). Для сокращения количества осеменений, рационального использования спермы и повышения процента оплодотворяемое™ проводят осеменение кобыл с ректальным контролем фолликулов. В этом случае осеменение при обязательной пробе кобыл на охоту жеребцом- пробником максимально приближается к овуляции (фолликул четвертой степени). Чем короче отрезок времени между осеменением и разрывом фолликула, тем больше шансов на оплодотворение, и наоборот.
Некоторые специалисты это бесспорное положение механически распространяют на коров, у которых в отличие от кобыл овуляция происходит не в конце охоты, а спустя 10—15 ч после ее окончания. Поэтому осеменять коров в данный период (т. е. незадолго до овуляции) противоестественно, это ведет к массовому бесплодию.
Пользуясь методом ректального контроля фолликулов, X. И. Животков на каждые 100 конематок, осемененных в среднем не более 3 раз, впервые в истории коневодства получил 89—93 % оплодотворения. Этот опыт успешно проверен позже на большом количестве животных.
Данная система осеменения кропотлива, но ее экономическая эффективность компенсирует затраты труда. Ее нужно применять в практике искусственного осеменения. Ею должны владеть не только ветеринарные врачи, но и фельдшеры, зооинженеры, Техники по искусственному осеменению животных.
Хороший эффект ректального контроля привел к тому, что некоторые специалисты предложили заменить им метод диагностики охоты с использованием пробника, что неприемлемо. Не замена одного метода другим, а применение их обоих в умелом сочетании является залогом успеха работы по воспроизводству конского состава.
В период осеменения важно строго соблюдать режим кормления, доения, содержания и другие условия внутреннего распорядка; всякое нарушение привычной обстановки может тормозить половую функцию.
Очень важно своевременно проводить контроль эффективности осеменения. Для этого ежедневно выявляют охоту пробником у коров с 10-го по 30-й день, у овец —с 12-го по 30-й, у свиней — с 15-го по 30-й день, у лошадей — через каждые 1—2 дня на протяжении 25—30 дней после осеменения.
У бесплодной (не оплодотворившейся после осеменения) самки на 15—25-й день после осеменения вновь возникает охота, таких животных надо осеменять повторно.
Проведение повторных осеменений у самок домашних животных целесообразно лишь при наличии у них охоты. Поэтому после первого осеменения нужно продолжать пробу самок на охоту и только после выявления «отбоя» прекратить осеменения.
Способы осеменения. Искусственное осеменение млекопитающих и птиц может быть интравагиналь- ным, если сперму вводят в половые пути, или интраабдоминальным, когда сперму вводят в брюшную полость, возле яичников, через прокол брюшной стенки.
К интрагенитальным способам искусственного осеменения относятся влагалищное, цервикальное, маточное и яйцепроводное.
Выбор способа осеменения зависит от вида животных и главным образом от типа естественного осеменения. Так, у животных с влагалищным типом осеменения сперму вводят во влагалище или в канал шейки матки; у животных с маточным типом осеменения сперму вводят непосредственно в матку; у птицы сперму вводят в яйцепровод.
При всех способах искусственного осеменения надо строго соблюдать правила асептики и не допускать введения в половые пути спермы, загрязненной микробами. При проведении искусственного осеменения следует пользоваться прокипяченными хирургическими резиновыми или разовыми полиэтиленовыми перчатками, обрабатывают руки также, как при подготовке к операции. Их надо мыть горячей водой с мылом и щеткой в течение 3—5 мин, затем досуха обтирать стерильным или хорошо проутюженным полотенцем и 70%-ным или 96%-ным спиртом. Инструменты лучше стерилизовать кипячением или фламбированием. Шприцы- катетеры каждый раз после употребления должны быть тщательно промыты теплым физиологическим раствором и спиртом; хранить их лучше в 70%-ном спирте. Перед употреблением шприцы- катетеры тщательно промывают в двух банках (по 3—4 раза в каждой) стерильным раствором 2,8—3%-нОго цитрата натрия, 1%-ного гидрокарбоната или 1 %-ного хлорида натрия.
После осеменения каждой самки поверхность катетера протирают спиртовым тампоном, влагалищные зеркала моют и кипятят или фламбируют. При применении искусственного осеменения в карантинированных бригадах или фермах инструменты стерилизуют в кипящей воде или используют разовые инструменты, которые после использования сжигают, и выполняют другие профилактические мероприятия, предусмотренные ветеринарным законодательством.
Самок для осеменения помещают в соответствующий станок и фиксируют. Хвостудобнее подвязать ктуловищу животного. У кобыл необходимо фиксировать задние конечности случной шлейкой или веревкой. Затем обмывают вульву и кожу вокруг нее и насухо вытирают, после чего орошают раствором фурацилина 1 :5000 (приготовленным на физиологическом растворе). Для каждой самки должен быть, отдельный тампон. Использованные тампоны собирают в таз или ведро, дезинфицируют и уничтожают. Осеменяют животных в чистом, светлом помещении, которое должно соответствовать требованиям «Ветеринарно-санитарных правил при воспроизводстве сельскохозяйственных животных» и действующих инструкций по искусственному осеменению.
Влагалищный способ осеменения. Практикуется редко, поскольку при нем затрачивается значительно больше спермы, чем при цервикальном методе. Сперму вводят во влагалище шприцем- катетером или лучше полистироловой пипеткой, соединенной с капроновым шприцем или баллончиком. Так осеменяют крольчих, а также ярок и телок, имеющих узкое влагалище, когда его невозможно раскрыть зеркалом и ввести сперму в канал шейки матки под контролем зрения. Чтобы не попасть в мочеиспускательный канал, инструмент
надо вводить по верхней стенке влагалища у ярок на глубину 15—18 см, а у телок — 30—35 см.
Цервикальный способ осеменения с визуальным контролем. Он заключается во введении спермы в канал шейки матки шприцем-катетером* или другим инструментом. Его применяют у коров, овец и коз. Для удобства дозирования спермы к шприцу присоединяют специальный приборчик (рис. 33).
Для искусственного осеменения овец используют также шприцы-полуавто-
' Этот инструмент рассчитан на заполнение несколькими дозами спермы. С переходом на использование замороженной спермы быков ее оттаивают по одной дозе, так как необходимо ввести сперму не позднее 10—15 мин после оттаивания. При насасывании одной дозы в инструменте остается неиспользованным до 25—35 % объема набранной спермы. Поэтому применение шприца- катетера при искусственном осеменении коров и телок оттаянной спермой малоэффективно.
маты, имеющие в рукоятке автоматическое приспособление для дозирования спермы. При каждом нажиме на рычаг аппарат выталкивает через катетер определенную дозу спермы.
Рис. 33. Шприцы-катетеры для искусственного осеменения овец и коров: А — шприц-катетер для овец вместимостью 1 мл с бегунком; Я —тоже, вид сбоку; В — шприц-катетер вместимостью 2 мл; Г— шприц-катетер для коров вместимостью 4 мл; / — хомутик для поршня; 2 — рейка с делениями; За 5 — хомутики для цилиндра; 4 — гайка-бегунок |
После обычной подготовки инструментов самке, фиксированной в станке, вводят во влагалище влагалищное зеркало и под контролем глаза впрыскивают в канал шейки матки на глубину 0,5— 1 см овце и 4—5 см корове соответствующую дозу спермы. Недостаток применения зеркала в том, что оно быстро остывает, вызывает ущемления слизистой оболочки влагалища. При сильном раскрытии его ветвей возникает вагинизм, введенная сперма вытекает из шейки матки во влагалище. Чтобы избежать вагинизма и обеспечить надежное введение спермы в шейку матки, Л. Овчинников предложил применять модифицированное зеркало (у зеркала срезан правый край верхней ветви) (рис. 34). При помощи такого зеркала шприц-ка-
Рис. 34. Модифицированное влагалищное зеркало |
тетер вводят в шейку матки обычным путем на 4—5 см, затем зеркало извлекают; кончик шприца-катетера остается в шейке. Через 20—30 с животное успокаивается, усиливается моторика половых органов и согретая сперма почти полностью засасывается маткой (создается отрицательное давление). Таким образом происходит непринудительное введение спермы, что так важно при искусственном осеменении. Если моторика матки выражена слабо и всасывания спермы не происходит, то легким нажатием на поршень шприца ее постепенно выталкивают вдоль всего канала шейки матки. Практика показала, что использование усовершенствованного влагалищного зеркала обеспечивает глубокое введение спермы и способствует повышению оплодотворяемости коров.
Цервикальный способ осеменения с ректальной фиксацией шейки матки. Многие специалисты предпочитают осеменять животных без зеркала, вводя сперму с помощью пипетки при ректальной фиксации шейки матки. При фасовке спермы необлицованными гранулами используют одноразовую полиэтиленовую длинную перчатку и полистироловую или стеклянную пипетку. Инструменты одноразового использования особенно целесообразно применять в хозяйствах, неблагополучных в отношении инфекционных и инвазионных болезней.
Осеменение проводят следующим образом. Сухими, вымытыми и обтертыми спиртом руками из пакета извлекают полистароловую пипетку, на нее надевают пластмассовую ампулу или резиновый баллончик; удобнее прикрепить к пипетке соединительной муфтой маленький капроновый шприц; затем насасывают 1 мл спермы.
После обтирания влажным тампоном или прокипяченной влажной губкой кожи и краев вульвы одной рукой вводят пипетку во влагалище по верхней его стенке (чтобы не попасть в мочеиспускательный канал). Другую руку в полиэтиленовой перчатке (после увлажнения) вводят в прямую кишку, захватывают шейку и направляют в нее конец пипетки. Решающим при введении пипетки является правильная фиксация шейки матки, достигаемая одним из следующих приемов.
Первый прием — шейку матки захватывают сверху левой рукой так, чтобы большой палец находился справа на ней, три следующих — с левой стороны начальной ее части, мизинцем контролируют наружное отверстие шейки матки и конец пипетки.
Второй прием — шейку матки удерживают между указательным и средним пальцами, большим пальцем отыскивают отверстие шейки матки и под его контролем вводят пипетку (рис. 35).
Третий прием фиксации шейки матки могут выполнять только очень опытные специалисты. После нескольких легких давлений на шейку, обеспечивающих натяжение влагалища, необходимое для продвижения пипетки, пальцами руки прижимают шейку матки ко дну костного таза. Затем пипетку продвигают под ладонью руки вперед, и если возникает необходимость, то большим пальцем руки направляют ее конец в отверстие шейки матки.
После введения пипетки (любым способом) для дальнейшего продвижения ее шейку матки захватывают всеми пальцами руки и легкими вращательными движениями осторожно натягивают на пипетку. Выталкивают сперму вдоль всего цервикального канала. После осеменения полиэтиленовые перчатки и полистироловые пипетки уничтожают,
а стеклянные обрабатывают и хранят в отдельной металлической трубке до стерилизации.
При осеменении с ректальной фиксацией шейки матки, когда сперма находится в облицованных гранулах, используют зоошприц с удлинителем, а при расфасовке спермы в соломинки применяют специальный осеменитель- ный инструмент.
При описанном выше способе осеменения предотвращается выливание спермы, так как слизистая оболочка влагалища не раздражается зеркалом. Исключается травмирование и инфицирование влагалища, что нередко отмечается при использовании влагалищного зеркала. По заключению ряда авторов, осеменение с ректальной фиксацией шейки матки повышает оплодотворяе- мость коров на 8—10 %. Однако этот метод труднее других поддается овладению, требуется основательная подготовка.
Рис. 35. Правильная фиксация шейки матки: / — рука; 2 — пипетка; 3 — вульва; 4— кости дна таза; 5—мочевой пузырь; 6— влагалище; 7—влагалищная часть шейки матки; 8 — яйцепровод; 9— рога матки; 10— яичник; 11 — прямая кишка |
Маноцервикальный (ручношеечный) способ осеменения. При этом способе используют стерильные одноразовые инструменты: полиэтиленовую ампулу с полистироловым катетером и полиэтиленовую перчатку (рис. 36). Обрезав у ампулы колпачок стерильными ножницами, ее соединяют с катетером. Расфасованную в облицованные гранулы сперму вводят зоошприцем (см. рис. 22).
3 |
Рис. 36. Одноразовые инструменты для маноцерви- кальиого осеменения коров(по Ф. И. Осташко и В. А. Чиркову)-. |
После обтирания вульвы и корня хвоста раствором фурацилина осторожно вводят во влагалище правую руку, одетую в полиэтиленовую перчатку и смоченную физиологическим раствором, и массируют влагалищную часть шейки матки. Не вынимая кисти руки из влагалища, другой рукой подают подготовленный инструмент со спермой. Под контролем руки катетер вводят в шейку матки, приподнимают ампулу и посте-
1 — перчатка; 2— ампула; 3— катетер; 4— инструменте собранном виде
пенным давлением сначала на донышко, затем ближе к катетеру сперму из ампулы выдавливают в канал шейки матки в момент ее расслабления.
После введения спермы, не разжимая ампулы, инструмент извлекают из шейки и кладут на дно влагалища, рукой проводят массаж шейки, способствующий перемещению спермы в полость матки. Затем руку осторожно выводят из влагалища вместе с ампулой и катетером.
Маноцервикальный способ осеменения применим только для крупных коров. Мелких коров, особенно первотелок, а также телок с узким влагалищем осеменять этим способом нельзя. При недостаточной асептике возникает опасность инфицирования половых органов коровы.
В производственных условиях не следует противопоставлять один метод осеменения другому, а нужно умело сочетать их. Каждый способ имеет свои преимущества и недостатки. Для обеспечения асептического введения спермы коровам и телкам любым из описанных способов М. П. Рязанский, Г. И. Швец, Б. Ф. Коновалов и В. П. Иванов предложили специальное устройство, позволяющее надежно предохранять осемени- тельный инструмент и, следовательно, внутренние половые органы животных от бактериального загрязнения. Эти же авторы рекомендуют вместо обмывания половых оргацов перед осеменением водой и обеззараживающими растворами использовать одноразовое защитное приспособление из полиэтиленовой пленки. После введения спермы животное надо выдержать на привязи не менее 20—30 мин, чтобы предотвратить вытекание спермы из канала шейки матки во влагалище, а затем спокойно отвести в стойло (при пункте). Полезен массаж клитора в течение 10 мин после искусственного осеменения. Этот прием повышает оплодотворяемость коров на 5-6%.
Если во время осеменения отмечают беспокойство животного, возникновение вагинизма, в результате чего введенная сперма изгоняется из шейки матки во влагалище, необходимо через 10— 15 мин осеменение повторить («дуплет- ное» осеменение).
Маточный способ осеменения. Применяют только у животных с маточным типом естественного осеменения (кобыла и свинья). Для осеменения кобыл пользуются преимущественно эбонитовым катетером. Под контролем глаза катетер при помощи влагалищного зеркала вводят непосредственно в матку на глубину 10—15 см. При использовании мягкого катетера его конец захватывают рукой, вводят во влагалище и под контролем пальца направляют через канал шейки в матку. Когда для выбора времени осеменения наряду с определением течки, общего возбуждения и охоты выявляют овуляцию, стремятся направлять сперму в тот рог матки, в стороне которого в яичнике созревает фолликул.
Вследствие значительного объема дозы спермы для введения ее в матку пользуются 20-граммовым шприцем или специальными ампулами. Ампуль- ный способ применяют на подсобных пунктах искусственного осеменения. Ампулы вместимостью 30 мл используют для перевозки спермы и для осеменения. Перед осеменением на узкий конец ампулы, заполненный спермой, надевают резиновый шланг, соединенный с баллоном. С другой стороны ампулы снимают резиновый колпачок. Ампулу захватывают рукой, вводят во влагалище, ее свободный конец закрывают пальцем и направляют в шейку матки. При сжимании баллона сперма выталкивается воздухом в полость матки.
Растяпин предложил вводить самкам сперму из ампулы через катетер И. И. Иванова (рис. 37). Ампула Растя- пина имеет расширенный конец, закрытый пробкой, и суженный, который соединяют с мягким резиновым катетером. К катетеру, введенному в матку, присоединяют ампулу, свободный ее
конец открывают, и сперма самотеком переходит в полость матки через катетер. В карантинированных хозяйствах следует пользоваться только шприцем и твердыми катетерами, их можно легко стерилизовать.
А. В. Квасницкий сконструировал для осеменения свиней зонд, на свободном конце которого имеется головка из мягкой резины; она плотно прилегает к стенкам канала шейки матки и закрывает ее просвет. Для осеменения свиней этот автор вначале предложил термос- прибор, а затем универсальный зонд УЗК-5 (рис. 38). Оба устройства используются для фракционного осеменения свиней, сущность которого заключается во введении вначале спермы (неразбавленной или разбавленной незначительно), затем заполнителя (вторая фракция), а потом в матку накачивают воздух — один-два шара Ричардсона (третья фракция). При таком способе осеменения разбавитель заполняет рога матки и проталкивает спермиев к яй- цепроводам.
В настоящее время для искусственного осеменения свиней разбавленной спермой также пользуются прибором ПОС-5, предложенным С. И. Сердюком и А. А. Беликовым.
Сперму свиней перед введением при любом способе осеменения подогревают до температуры тела.
Опыты А. Г. Блюзниченко показали, что около 40 % введенной в матку спермы выделяется из половых органов независимо от способа осеменения. Однако благодаря тому, что при способе А. В. Квасницкого сперма продвигается глубже, количество спермиев в выделившейся из матки жидкости при этом в 1,5—2 раза меньше, чем при осеменении самок предварительно разбавленной спермой. Поэтому при фракционном способе требуется меньше хряков-производителей.
Свиноматок осеменяют в специальной клетке или непосредственно в станках. Летом клетку помещают в раскол, над которым устраивают навес. После осеменения каждую свиноматку необходимо в течение 24—30 ч держать изолированно, в отдельных станках. При содержании осемененных свинок в общем станке животные прыгают друг на друга. Это ведет к обратному вытеканию из матки разбавителя и спермы, что вызывает искусственно приобретенное бесплодие.
Рис. 37. Ампула Растяпииа с катетером Иванова для осеменения кобыл |
Дозы спермы. Решающее значение при определении дозы спермы имеет динамика полового акта. При искусственном осеменении сперму вводят непосредственно в матку или шейку матки, минуя влагалище, поэтому следует вводить столько спермиев, сколько их туда обычно попадает при естественном осеменении. У овец, например, при естественном осеменении в шейку матки попадает около 100—150 млн спермиев, т. е. примерно У2о—'/зо объема
Рис. 38. Прибор УЗК-5 для искусственного осеменения свиней:
1 — футляр; 2— резиновые трубки; 3 — соединительная муфта; 4 — металлический катетер; 5— пластмассовые катетеры; 6— запасной катетер в полиэтиленовом чехле; 7— баллоны Ричардсона; 8— ручка; 9— резиновые трубки для нагнетания воздуха во флаконы; 10— зажимы; 11 — флаконы
эякулята (М. П. Кузнецов). Поэтому и было предложено вводить в шейку матки овцы 0,05 мл, а в шейку матки коровы 0,5 мл спермы. Большие дозы обычно не имеют преимуществ, а уменьшенные снижают оплодотворяемость.
Овцам при влагалищном осеменении вводят 0,1 мл неразбавленной спермы, разбавленной — 0,2—0,3 мл; при цервикальном — соответственно 0,05— ОД и 0,1—0,15 мл.
Коровам при влагалищном осеменении вводят 1—2 мл неразбавленной и 2—3 мл разбавленной спермы, при цервикальном — соответственно 0,3— 0,5 и 1 — 1,5 мл.
По материалам Н. И. Мунтаниолова, влагалищный способ осеменения телок в дозе 1 мл разбавленной спермы при ректальном массаже матки и выливании спермы над шейкой матки не уступает самому совершенному из всех существующих ныне способов — цервикальному с ректальной фиксацией шейки матки.
Успех осеменения зависит также от качества спермиев. Чем активнее их движение, тем меньшую дозу спермы можно применять. До недавнего времени при всех способах хранения спермы быков-производителей в одной дозе (1 мл) для осеменения коров и телок предусматривалось не менее 25 млн активных спермиев. Уменьшение концентрации спермиев до 12,5 млн спермиев обусловливает снижение оплодотворяе- мости телок на 11,9—20 % (А. В. Поздняков). Поэтому рекомендовано государственным станциям по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных использовать замороженную в жидком азоте сперму быков с содержанием в дозе после оттаивания не менее 10—15 млн спермиев с прямолинейным поступательным движением (подвижность не ниже 3—4 баллов). Такое количество спермиев в дозе допустимо только при использовании спермы с высокой оплодотворяющей способностью.
У животных с маточным типом естественного осеменения сперма продвигается по просвету рогов матки к яйце- проводам. Поэтому малые дозы спермы при искусственном осеменении не дают положительных результатов.
Кобылам вводят 20—40 мл спермы.
Дозу спермы для свиней при фракционном способе введения устанавливают в зависимости от концентрации и активности спермиев. При этом число подвижных спермиев в дозе должно быть 3 млрд для основных и 2 млрд для ремонтных маток. При нефракционном способе осеменения используют разбавленную сперму. По методу ВИЖ ее вводят из расчета 1 мл на 1 кг массы тела, однако общее количество спермы не должно превышать 150 мл. В дозе должно содержаться не менее 4—5 млрд активных спермиев.
Птицу осеменяют раз в 5—7 дней с помощью пипеток или приспособленных шприцев. Инструмент вводят в левый яйцепровод на глубину 4—5 см. Применяют сперму с активностью не ниже 7 баллов, курам и индейкам — по 0,025—0,03 мл (около 100 млн живых спермиев), гусыням — 0,05—0,2 мл (30—50 млн подвижных спермиев). Осеменение проводят во второй половине дня, когда заканчивается яйцекладка.
Об инструментах и проведении искусственного осеменения птиц сообщено в «Практикуме по акушерству, гинекологии и искусственному осеменению сельскохозяйственных животных» (1988).