Коллоквиум по разделам: «экология и генетика бактерий».
Цель: усвоить основные принципы генетики микроорганизмов, ее практическое использование, получение и применение вакцинных штаммов микроорганизмов. Оценить степень усвоения теоретического и практического материала по пройденным разделам.
ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ:
1. Геном бактерий. Генотип и фенотип. Виды изменчивости.
2. Плазмиды бактерий, их функции и свойства. Использование плазмид в генной инженерии.
3. Передача наследственного материала у бактерий. Подвижные генетические элементы: транспозоны и IS- элементы, их роль в эволюции бактерий.
4. Молекулярно- биологические методы, используемые в диагностике инфекционных заболеваний: ПЦР, рестрикционный анализ и др.
5. Медицинская биотехнология, ее задачи и достижения.
6. Генетика вирусов.
7. Теоретические и практические вопросы, занятий №№ 9 -11.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:
1. Изучить влияние фенола на фенотип протея, зарисовать и дать заключение.
2. По готовой демонстрации описать свойства R и S –формы колоний.
3. Зарисовать схему постановки и результаты опытов по генетическим рекомбинациям: трансформации, трансдукции и конъюгации.
4. Оценить и зарисовать результат действия акридинового оранжевого на антибиотико-резистентность культуры..
5. Описать методы получения вакцин: БЦЖ, антирабической, сибиреязвенной, энджерикс В.
6. Изучить и записать принцип постановки и учета полимеразно-цепной реакции (ПЦР).
7. Ответить на 20 вопросов ЭВМ - тестирования, включающих теоретические и практические аспекты раздела.
8. Уборка рабочего места.
Работа №1: Влияние фенола на фенотип протея
(посев по Шукевичу)
МПА с фенолом МПА
Результат:
Заключение:
Работа №2: Cвойства S и R –форм колоний.
Свойства | S-колонии | R-колонии |
Форма | ||
Жгутики | ||
Капсула | ||
Биохимические | ||
Антигенные | ||
Вирулентные |
Работа №3: Генетические рекомбинации:
Схемы постановки опытов и учет результатов.
Трансформация –это
донор реципиент
смесь
Селективная среда
Заключение:
Трансдукция-это
донор реципиент
смесь
Селективная среда
Заключение
Конъюгация – это
донор реципиент
смесь
Селективная среда
.
Заключение:
Работа №4: Действие акридинового оранжевого
На резистентность культуры к антибиотикам
Исходная культура культура, обработанная
акридиновым оранжевым
Результат: по результатам антибиотикограммы исходная культура обладает .
После обработки культуры акридиновым оранжевым антибиотикограмма показала
что говорит о .
Заключение: Множественная лекарственная устойчивость культуры была связана с , потому, что
.
Работа 5:Генетические основы получения вакцин: противотуберкулезной, антирабической, против гепатита В.
1. Вакцина БЦЖ (BCG)
3. Антирабическая вакцина
3. Вакцина Энджерикс В
Работа 6:Полимеразно-цепная реакция (ПЦР)
И рестрикционный анализ.
ПЦР в основе имеет 3 этапа:
а)
б)
в)
Основной этап – проводится в аппарате , где имеются комплементарные праймеры, полимеразы и нуклеотиды, а также задается определенный температурный и временной режим. Цикл может задаваться раз, в результате чего образуются миллионы копий исходной ДНК.
Последний этап проводится с помощью
Рестрикционный анализ основан на
Сравнивая полученные нуклеотиды изучаемой ДНК с нуклеотидами контрольной ДНК (известного возбудителя), можно говорить об идентичности или различии возбудителей.