Раздел 2 Частная вирусология
Тема: Лабораторная диагностика оспенных инфекций
Цель занятия:
1. Изучить порядок вирусологического исследования при диагностике оспы овец и кур;
2. Провести вирусоскопическое исследование оспенного материала.
Задание: Поставить биопробу и произвести вирусоскопию.
Оборудование и материалы: Световые микроскопы, предметные стекла, спиртовая горелка, вирусосодержащий материал, реактивы для окрашивания по методу Морозова, банки с дез. раствором, дистиллированная вода, таблицы.
Рис. 19 Макет вириона оспы.
Содержание занятия. Вирионы оспы относятся к крупным вирусам, кирпичевидной или овоидной формы. Их размеры находятся в пределах 170 – 250 x 300 - 325 нм. Они содержат двухцепочную ДНК, представляющую гантелеобразный нуклеоид, покрытый трехслойной оболочкой. На его противоположных сторонах находятся боковые тела. На наружной оболочке располагаются отростки, придающие поверхности вириона характерный рисунок. Вирусы оспы содержат фермент РНК-полимеразу и обший нуклепротеидный антиген.
Оспа овец и коз — острая контагиозная болезнь, протекающая с признаками папулезно-пустулезных поражений кожи. Вирус, вызывающий оспу у овец, непатогенен для коз и наоборот.
Оспа птиц. Данную болезнь вызывают несколько самостоятельных вирусов оспы кур, оспы голубей, оспы индеек, оспы канареек и оспы скворцов. Оспа у кур проявляется в двух клинических формах: кожной и дифтеритической. В последнем случае преимущественно поражаются слизистые оболочки ротовой полости, носа и коньюктива.
Взятие материала для диагностических исследований.Содержимое везикул. Пораженную поверхность кожи протирают ватным тампоном, смоченным спиртом. Везикулу прокалывают тонко оттянутым капилляром пастеровской пипетки, которую наклоняют для обеспечения сбора жидкости.Папулы и корочки. Их соскабливают скальпелем и собирают пинцетом.Мазки из свежих везикул. Везикулы осторожно срезают лезвием безопасной бритвы и поверхностью среза на предметном стекле делают отпечатки, затем высушивают па воздухе.При диагностике оспы кур направляют голову, имеющую характерные признаки поражения.
Порядок исследования при оспе овец:
1. Вирусоскопия.
2. Обнаружение специфического антигена вирусов оспы методом РИФ и РДП.
3. Биопроба на неиммунной молодой овце. В этом случае вируссодержащую суспензию готовят общепринятым способом, которую в дозе 0.1—0.15 мл вводят внутрикожно в бесшерстную поверхносгь хвоста и ведут наблюдение в течение 10 дней. В положительном случае на месте инъекции развивается характерный оспенный процесс (розеола, папула, везикула, пустула, некроз). Специфичность биопробы подтверждают путем обнаружения элементарных телец Борреля.
Порядок исследования при оспе кур:
1. Вирусоскопия.
2. Выделение вирусов оспы путем заражения КЭ на ХАО и идентификация в РДП.
3. Биопроба на цыплятах. Заражение цыплят производят на скарифицированную кожу гребня, сережек и в перьевые фолликулы голени. В положительном случае на 5—7 день появляются характерные оспенные поражения. Методом вирусоскопии удается обнаружить элементарные тельца.
