Современные методы мечения рыб
В рыбоводстве для идентификации рыб искусственного происхождения и определения эффективности работы рыбоводных предприятий традиционно применяют мечение выпускаемого в естественные водоёмы и водохранилища материала (личинок, мальков). Известно множество способов мечения рыб. Рассмотрим современные методы мечения.
Мечение молоди рыб магнитными метками с помощью аппарата НМТ МК 2А (фирма «Smith-Ruth», США). Для мечения используется проволочная метка с цветным кодированием, которая вводится индивидуально подкожно в ноздрю рыбы с помощью инжектора проволочной метки. При этом проволочная метка проходит через магнитное кольцо, что вызывает вечное намагничивание метки, позволяющее выполнить последующее обнаружение меченой рыбы с помощью детектора в полевых условиях. Применяется кусочек проволоки из нержавеющей стали диаметром 0,25 мм, на которую наокрашенном фоне наносится система продольных цветных полосок, обеспечивающих идентифицирующие коды. Аппарат разрезает проволоку на заданную длину в зависимости от размеров рыбы (0,63 и
1,0 мм). Метки с пятицветной раскраской для полосок на фоне, окрашенном в более чем десять цветов, создают тысячи комбинаций кодов. Это даёт возможность каждому РЗ использовать огромное количество кодов для мечения с целью оценки промыслового возврата рыбы и других исследований. Перед мечением рыбу погружают в транквилизаторный раствор, чтобы предохранить от смерти и исключить её движения.
В США разработана система мечения микрокодированными меткими с декодированием рентгеновскими лучами. Мечение проводится проволокой диаметром 0,4 мм и длиной 1,1 мм. С помощью специального устройства делаются выемки по определённой схеме, что позволяет изготовить более 16 тысяч вариантов меток. Считывать кодированную информацию можно без извлечения метки из рыбы. При этом микрофокусированным рентгеновским лучом облучают рыбу и находят метку. Увеличенное изображение передаётся в видимом свете при помощи увеличивающего фотопередатчика и может наблюдаться при помощи телекамеры и монитора.
Английская фирма «Fisheagle» разработала цифровые метки P.I.T. Supertags на жидких кристаллах с номерами. Метки вводятся в брюшную полость рыбы с помощью шприца-иньектора. Считывание метки возможно на большом расстоянии с помощью переносного детектора. При этом рыбу вынимать из воды необязательно. Другой тип меток, имеющих индивидуальный номер, вводится с помощью иньектора под кожу на голове рыбы в заглазничной области.
В последнее время появился очень перспективный метод, основанный на маркировании отолитов. Отолит – это кальций-протеиновое образование, которое формируется у эмбрионов рыб перед началом стадии пигментации глаз. Принцип метода заключается в том, что некоторые изменения окружающей среды фиксируются на отолитах рыб в виде меток, которые сохраняются в течение всей жизни и могут быть «прочитаны» в любой период онтогенеза. Метки на отолитах рыб появляются в результате изменения темпов образования слоёв кальция и белка под воздействием какого-либо фактора среды. Если действие фактора имеет периодический характер, то такая периодичность проявляется на отолите в чередовании тёмных и светлых полос. Исходя из этого, можно искусственно формировать метку, состоящую из набора тёмных и светлых полос, в которой может быть зафиксирована информация о РЗ, регионе, стране, отдельных партиях рыб, выращиваемых на одном заводе.
Основное преимущество метода маркирования отолитов молоди рыб – массовость. На некоторых американских заводах метят до 200 млн. экз. выпускаемой молоди. Другими способами пометить такое количество молоди практически невозможно.
Разработка и внедрение методик термического маркирования отолитов лососей принадлежит американским учёным. Первое мечение в промышленных масштабах проведено в США на РЗ штата Вашингтон в 1987 г.
Методы маркирования отолитов, альтернативные термическому, предложены в 1994 г. американскими учёными – способ с использованием хлорида стронция (Schroder et al., 1994), в 1998 г., русскими – метод сухого маркирования отолитов (Сафроненков и др., 1998), в 1994 г японскими – маркирование с помощью флуоресцентных включений (Kavamura et al, 2001).
Термическое маркирование отолитов – наиболее распространённый способ массового мечения лососей в США, Канаде. России и Японии. Только на Аляске за последние 10 лет помечено более 3 млрд. лососей. Метка на отолитах образуется за счёт периодических изменений температуры воды, при которой происходят инкубация икры или выдерживание предличинок на РЗ. Градиент изменения температуры должен быть не менее 3°С. Различают мечение с положительным и отрицательным градиентами, то есть с повышением и понижением фоновой температуры. Для изменения температуры на одних заводах используют системы подогрева или охлаждения воды, на других, где имеются две системы водоподачи (из реки и из скважин), — переменное водоснабжение.
Мечение можно проводить в эмбриональный период начиная со стадии глазка до вылупления (исключая вылупление), а также в период выдерживания предличинок до начала смешенного питания. В мальковый период мечение неэффективно.
Метод сухого маркирования отолитов основан на способности икры лососевых нормально развиваться во влажной атмосфере. Для мечения обычно с суточной периодичностью осушают икру в инкубаторах. В течение одного цикла мечения (когда формируется одна тёмная и одна светлая полоса) – икра 24 ч находится без воды (во влажной атмосфере) и столько же времени омывается водой (в нормально работающем инкубаторе). Такая метка принципиально не отличается от метки, полученной при термическом маркировании. Период мечения отолитов эмбрионов этим способом – от стадии пигментации глаз до начала вылупления. Этот метод прост, удобен и не требует специального оборудования. Его недостаток – невозможность метить личинок и молодь рыб.
Мечение с помощью хлорида стронции основано на замещении кальция в костных образованиях, в том числе и отолитах, родственными химическими элементами. Икру или молодь рыб выдерживают в 9%-ном растворе хлорида стронция SrCl, в течение нескольких часов. Обнаружить метку можно только с помощью электронного микроскопа или плазменного спектрометра. Метод одобрен органами здравоохранения Канады и США. Недостатком его являются большие расходы SrCl, при массовом мечении. а также необходимость применения дорогого оборудования дня обнаружения метки. Положительным является то, что он позволяет метить кормящуюся молодь.
Маркирование с помощью флуоресцентных включении используется в Японии с 1994 г. Метка на отолите формируется при выдерживании эмбрионов лососей в растворе алазарина в течение 24 ч и сохраняется в организме рыбы не менее пяти лет. Для обнаружения метки используется ультрафиолетовое излучение. Недостатком метода является его невысокая информативность (небольшое число разных типов меток), однако он хорош для альтернативного разделения меченых и немеченых рыб.