Самостійна позааудиторна робота. в зошитах для протоколів:
В зошитах для протоколів:
1. наведіть приклади з ензимотерапії, ензимодіагностики і ензимопатології.
2. підготуйте вихідні дані для оформлення протоколу лабораторної роботи “Визначення активності амілази (діастази) сечі методом Вольгемута”.
Контрольні питання
1. Основні аспекти сучасної ензимодіагностики.
2. Розподіл ферментів у організмі: клітинні, секреторні, екскреторні ферменти.
3. Ізоферменти, їх значення в ензимодіагностиці.
4. Ензимопатології, ензимопатії.
5. Ензимотерапія, застосування ферментів в клінічній практиці.
6. Інгібітори ферментів як лікарські середники.
Самостійна аудиторна робота
І. Дайте відповіді на поставлені запитання:
1. В сечі новонародженої дитини виявлена фенілпіровиноградна кислота. Назвіть патологію і вкажіть причину, з якою пов’язана поява цього компоненту в сечі
2. Підвищена активність ЛДГ є характерною для хвороб серця, печінки, нирок. Яке додаткове біохімічне дослідження потрібно провести для уточнення діагнозу?
3. У хворого в сечі підвищена амілазна активність і виявлено наявність трипсину, в крові підвищена амілазна активність. Про патологію якого органу це свідчить?
4. Назвіть специфічні ферменти для:
підшлункової залози, печінки, міокарду, шлунку.
ІІ. Виконати лабораторну роботу “Визначення активності амілази (діастази) сечі методом Вольгемута”
і захистити протокол.
Принцип методу. Метод грунтується на визначенні мінімальної кількості ферменту, яка здатна розщепити певну кількість субстрату. Умовно за одиницю активності амілази сечі приймають кількість мілілітрів 0,1% р-ну крохмалю, яку може розщепити 1 мл нерозведеної сечі при температурі 45оС за 15 хв. В нормі - 16-64 одиниць.
Хід роботи. У 8 пробірок наливають по 1 мл 0,85% хлориду натрію. У першу пробірку додають 1 мл сечі, перемішують і переносять 1 мл суміші в другу пробірку. Так само перемішують вміст другої пробірки і переносять 1 мл суміші в третю і т. д. Отримують ряд розведень, де концентрація ферменту в кожній наступній пробірці в два рази менша, ніж у попередній. З останньої пробірки 1 мл суміші виливають для вирівнювання об’ємів.
Далі у кожну пробірку наливають по 2 мл розчину крохмалю, добре перемішують і ставлять на 15 хв у водяну баню при температурі 45оС. Після цього пробірки охолоджують проточною водою і в кожній проробляють реакцію з йодом. Відмічають останню пробірку з жовтим забарвленням, де гідроліз крохмалю пройшов повністю і розраховують активність амілази сечі.
Наприклад: 1/8 мл сечі розщепила 2 мл 0,1% р-н
1 мл сечі ------------------------------”Х”.
1 х 2 х 8
Активність амілази Х= ----------- = 16 мл 0,1% розчину крохмалю.
Отже, Д (діастаза) 45оС/15 = 16 од.
Клініко-діагностичне значення
Визначення активності α-амілази сечі широко використовується в клінічній практиці з метою діагностики захворювань підшлункової залози. При гострих панкреатитах амілазна активність сечі і сироватки крові зростає в 10-30 разів, особливо в першу добу, потім поступово повертається до норми. При нирковій недостатності амілаза сечі відсутня.
Література
1. Гонський Я.І., Максимчук Т.П. Біохімія людини. Тернопіль: Укрмедкнига, 2001. – 736с.
2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – 508с.
3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини. Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – 744с.
Обговорено і затверджено на засіданні кафедри, протокол №1 від 28.08.2008р.
Зав. кафедрою проф. Ерстенюк А.М.
ЗАНЯТТЯ № 9
ТЕМА: ВСТУП ДО ОБМІНУ РЕЧОВИН ТА ЕНЕРГІЇ.
Актуальність теми: Обмін речовин та енергії є однією з основних характерних ознак живих організмів. Порушення обміну речовин та енергії лежать в основі розвитку любого патологічного процесу, а їх корекція є основою лікування.
Навчальні цілі:
Знати:характерні закономірності обміну речовин та енергії.
Вміти: визначати енергетичну цінність харчових продуктів.