Определение креатинина в моче

Принцип метода. Креатинин при взаимодействии с пикриновой кислотой в щелочной среде образует окрашенные соединения, интенсивность окраски которых пропорциональна концентрации креатинина в моче.

Ход работы. В одну мерную колбу отмеривают 0,5 мл мочи, в другую – 0,5 мл дистиллированной воды (контрольная проба). В обе колбы добавляют по 3 мл насыщенного раствора пикриновой кислоты, смесь перемешивают, добавляют по 0,2 мл 10% раствора NaOH и доводят объем до 100 мл дистиллированной водой. Перемешивают содержимое колб, выдерживают в течение 10 минут при комнатной температуре и измеряют на ФЭКе оптическую плотность против контроля в кюветах с толщиной слоя 1 см с зеленым светофильтром (длина волны 540 нм).

Зная оптическую плотность опытного раствора, по калибровочному графику определяют содержание креатинина в пробе, взятой для анализа, и рассчитывают количество креатинина, выделенного с мочой за сутки, по формуле:

А ´ V_сут

К = ,

V

где А – содержание креатинина в пробе с мочой, найденное по калибровочному графику, ммоль; V – объем мочи, взятой для анализа, мл; V_сут – суточный объем мочи, мл.

Данные для построения калибровочного графика

Оптическая плотность, Е	Концентрация креатинина в моче, ммоль.
0,10 0,18 0,28 0,38

Клинико-диагностическое значение. Креатинин является постоянной составной частью мочи. За сутки в норме выделяется 8,8-17,6 ммоль или 1-2 г. Повышенное содержание креатинина в моче наблюдается при острых инфекциях, лихорадочных состояниях, у больных сахарным и несахарным диабетом.

Тема 5.4. ОБМЕН ФЕНИЛАЛАНИНА, ТИРОЗИНА,

АСПАРАГИНОВОЙ, ГЛУТАМИНОВОЙ КИСЛОТ,

ВАЛИНА, ЛЕЙЦИНА И ИЗОЛЕЙЦИНА.

Вопросы для самоподготовки

1. Напишите формулы фенилаланина и тирозина.

2. Напишите процесс превращения фенилаланина и тирозина в фумаровую и ацетоуксусную кислоты.

3. Напишите процесс синтеза адреналина.

4. Напишите процесс синтеза тироксина.

5. Нарисуйте схему превращения тирозина в меланин.

6. Нарисуйте схему обмена фенилаланина и тирозина.

7. Укажите на схеме места возможных генетически обусловленных блоков.

8. Назовите генетический дефект, приводящий к развитию фенилкетонурии.

9. Назовите основные клинические проявления фенилкетонурии.

10. Какой режим питания следует рекомендовать при фенилкетонурии и тирозинозе?

11. Назовите основные принципы лечения фенилкетонурии.

12. Назовите локализацию генетического дефекта, приводящего к развитию тирозиноза.

13. Назовите лабораторно-диагностические признаки тирозиноза.

14. Назовите локализацию генетического дефекта, приводящего к развитию алкаптонурии.

15. Назовите диагностические признаки алкаптонурии.

16. Назовите локализацию генетического дефекта, приводящего к развитию альбинизма.

17. Назовите диагностические признаки альбинизма.

18. Что такое скрининг?

19. Назовите условия, необходимые для проведения скрининг-программ по выявлению наследственных заболеваний обмена аминокислот.

20. Назовите аминокислоты, являющиеся медиаторами нервной системы.

21. Назовите аминокислоты, являющиеся предшественниками медиаторов нервной системы.

22. Перечислите биологически активные вещества, для синтеза которых необходима глутаминовая кислота.

23. Составьте схему обмена глутаминовой кислоты в организме.

24. Напишите процесс превращения глутаминовой кислоты в глутамин.

25. Укажите биологическое значение глутамина.

26. Составьте схему использования амидного азота глутамина для синтеза различных соединений.

27. Перечислите биологически активные вещества, для синтеза которых необходима аспарагиновая кислота.

28. Назовите аминокислоты, из которых в организме человека образуется α‑аланин.

29. Из какой аминокислоты в организме человека образуется β-аланин?

30. Составьте схему обмена аспарагиновой кислоты в организме.

31. Напишите процесс образования аспарагина.

32. Укажите биологическое значение аспарагина.

33. Напишите структурные формулы валина, лейцина и изолейцина.

34. Назовите места катаболизма аминокислот с разветвленной углеродной цепью.

35. Напишите уравнение реакции трансаминирования валина.

36. Назовите фермент и кофермент, катализирующий реакцию трансаминирования валина.

37. Напишите уравнение реакции окислительного декарбоксилирования α‑кетоизовалериановой кислоты.

38. Напишите фермент и кофермент, участвующий в реакции окислительного декарбоксилирования α-кетоизовалериановой кислоты.

39. Напишите уравнение реакции трансаминирования лейцина.

40. Назовите фермент и кофермент, катализирующий реакцию трансаминирования лейцина.

41. Напишите уравнение реакции окислительного декарбоксилирования α‑кетоизокапроновой кислоты.

42. Назовите фермент и кофермент, катализирующий реакцию окислительного декарбоксилирования α-кетоизокапроновой кислоты.

43. Напишите уравнение реакции трансаминирования изолейцина.

44. Назовите фермент и кофермент, катализирующий реакцию трансаминирования изолейцина.

45. Напишите реакцию окислительного декарбоксилирования α-кето-β-метилвалериановой кислоты.

46. Назовите фермент и кофермент, катализирующий реакцию окислительного декарбоксилирования α-кето-β -метилвалериановой кислоты.

47. Назовите биохимические признаки заболевания «болезнь с запахом кленового сиропа».

48. Назовите клинические проявления заболевания «болезнь с запахом кленового сиропа».

Вопросы, задачи и упражнения для самоконтроля

1. В каких процессах используются безазотистые остатки аминокислот:

1. фенилаланин; 2. глутаминовая кислота; 3. лейцин; 4. изолейцин.

а) глюконеогенез; б) кетогенез; в) оба процесса.

2. Через какие метаболиты включаются в окисление пировиноградной кислоты безазотистые остатки аминокислот:

1. пируват; 2. α-кетоглутарат; 3. сукцинил-КоА; 4. оксалоацетат.

а) валин; б) аспарагиновая кислота; в) глутамин; г) глутаминовая кислота; д) лейцин.

3. Укажите соответствие:

1. фенилаланин; 2. тирозин; 3. пролин; 4. аспарагиновая кислота; 5. валин.

а) заменимая; б) незаменимая; в) условно заменимая.

4. Напишите схему синтеза глутамата из глюкозы.

5. Укажите, где синтезируется:

1. печень; 2. почки; 3. надпочечники; 4. меланоциты; 5. щитовидная железа.

а) меланины; б) йодтиронины; в) адреналин; г) гомогентизиновая кислота.

6. В синтезе тирозина участвует:

1) пиридоксальфосфат;

2) тетрагидрофолевая кислота;

3) НАДФН+Н⁺;

4) НАДН+Н⁺.

7. Катаболизм фенилаланина начинается с реакции:

1) декарбоксилирования;

2) трансаминирования;

3) дегидрирования;

4) гидроксилирования;

5) трансметилирования.

8. Дополните схему недостающими компонентами:

Фен 1_____ 2_____ 3_____ 4_____ адреналин

9. Сравните ферменты:

1. фенилаланинтрансаминаза; 2. фенилаланингидроксилаза; 3. тирозингидроксилаза; 4. дофамингидроксилаза; 5. ДОФА-декарбоксилаза

а) необходим для синтеза тирозина; б) участвует в образовании ДОФА; в) катализирует синтез дофамина.

10. Вспомните процесс глюконеогенеза, дополните схему:

Пируват … ЩУК … Глюкоза

Литература

1. Николаев А.Я. Биологическая химия. – М.: Высшая школа, 1989. –
С. 331-339.

2. Николаев А.Я. Биологическая химия. – М.: Высшая школа, 2001. –
С. 331-339.

3. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1990. – С. 358-364.

4. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – С. 456-464.

5. Северин Е.С., Николаев А.Я. Биохимия. Краткий курс с упражнениями и задачами. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2001. – С. 243-246, 250-255.

6. Задания для самостоятельной работы студентов лечебного и медико-профилактического факультетов.

7. Тестовые задания по биохимии.

8. Лекционный материал.

9. Лабораторная работа: