Alabastra sophorae japonicae
Качественные реакции. 1г измельченных бутонов софоры японской заливают 10 мл 95% спирта, нагревают на водяной бане до кипения и настаивают 3-4 часа. Спиртовое извлечение фильтруют, упаривают до 2 мл, делят пополам и переносят в две пробирки. В каждую пробирку прибавляют по три капли концентрированной хлористоводородной кислоты, в одну из пробирок прибавляют 0,03-0,05г цинковой пыли и нагревают на водяной бане до кипения. При этом в пробирке с цинковой пылью жидкость окрашивается в вишнево-красный цвет (флавоноиды). Окрашивание отчетливо заметно при сравнении испытуемого раствора с контрольным, т.е. без цинковой пыли.
Количественное определение. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 0,5мм. Около 2г (точная навеска) измельченного сырья помещают в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 750-1000 мл, затем прибавляют 5г кварцевого песка, 15 стеклянных шариков размером 5-10мм, 150 мл метилового спирта и встряхивают 6 часов на вибрационном встряхивателе с последующим настаиванием в течение 18 часов. Метанольное извлечение отфильтровывают через складчатый фильтр.
На стартовую линию хроматографической бумаги (марки «С») размером 14x55 см наносят микропипеткой 0,2 мл метанольного извлечения. Хроматограмму высушивают на воздухе в течение 5 минут и проводят хроматографирование нисходящим способом в системе 15% уксусной кислоты до тех пор, пока слой растворителя на бумаге не пройдет 30см (3,5 часа). Хроматограмму подсушивают на воздухе до исчезновения запаха уксусной кислоты (3-4 часа) и просматривают в УФ-свете при 254 нм. Рутин проявляется в виде желтовато-коричневого пятна с Rf около 0,70. Бумагу с пятном рутина вырезают, разрезают на мелкие кусочки, помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, заливают 30 мл 60% спирта и встряхивают 4 часа на вибрационном встряхивателе. Элюат отфильтровывают и определяют его оптическую плотность на спектрофотометре при 358 нм в кювете с толщиной слоя 10мм. В качестве раствора сравнения используют элюат (60% метиловый спирт) с равной по площади бумаги, хроматографированной в тех же уловиях без вещества.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца рутина. Содержание рутина в пересчете на абсолютно-сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:
где Di - оптическая плотность испытуемого раствора; D0 - оптическая плотность стандартного раствора рутина; С - навеска стандартного образца рутина, в граммах; m - масса сырья, в граммах; W - потеря в массе при высушивании сырья в процентах.
Примечание.
Приготовление раствора стандартного образца рутина. 0,0500г (точная навеска) стандартного образца рутина растворяют в метиловом спирте в мерной колбе вместимостью 25 мл и доводят объем раствора метиловым спиртом до метки. 1мл этого раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора 60% метиловым спиртом до метки. 1 мл стандартного раствора содержит 0,00002г рутина.
Приготовление 60% метилового спирта. Смешивают 600 мл метилового спирта и 400 мл воды.
Числовые показатели. Рутина не менее 16%.