ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ЭШЕРИХИОЗОВ. Бактериологический методИсследуемый материал: при кишечных эшерихиозах испражнения, при парентеральных — материал из соответствующего инфекционного очага

Бактериологический методИсследуемый материал: при кишечных эшерихиозах испражнения, при парентеральных — материал из соответствующего инфекционного очага (моча, отделяемое раны, кровь, ликвор)

1 день посев испражнений на ДДС: 2 день Учет характера роста на средах

на среде Эндо (бледно-розовая) Лактоза +красные с металлическим блеском	на среде Левина (фиолетовая) Лактоза +фиолетовые с металлическим блеском	на среде Плоскирева (оранжевая) Лактоза +красные

Отбор колоний малиново-красного цвета цвета для реакции агглютинации с адсорбированной поливалентной ОК-сывороткой (смесью ОК-сывороток). Постановка РА с целью отбора колоний энтеропатогенных кишечных палочек

Название реакции Реакция агглютинации на стекле

ОКВ	Физ.р-р

Исследуемый материал 3-5 лак+ колоний со среды Эндо

Диагностический препаратполивалентная эшерихиозная сыворотка ОКВ( содержит антитела к антигенам E.coli О20:К84, О26:К60, О55:К59, О111ab:К58)

Результат реакции: положительная, предварительно выделена патогенная E.coli

Колония, культура из которой дает положительную реакцию агглютинации, откалывается на скошенный МПА и/или среду Клиглера.

День

Серотипирование выделенной культуры: Реакция агглютинации на стекле с моновалентными адсорбированными сыворотками, входящими в состав поливалентной сыворотки E.coli

Исследуемый материал чистая культура со среды Клиглера или косяка МПА

Диагностический препаратмоновалентные эшерихиозные сыворотки входящие в поливалентную ОКВ:О20:К84; О26:К60; О55:К59; О111ab:К58.

О20:К84	О26:К60	О55:К59	О111ab:К58	Физ.р-р

Результат реакции: положительная, предварительно выделена патогенная E.coli О20:К84

Постановка:1) биохимических тестовдля серотипованной культуры Е. соIi ("пестрый" ряд Гисса или планшеты); 2) теста определения чувствительности диско-диффузионым методом на среде Мюллера-Хинтона

День

	Учет биохимических свойств Е. соIi в "пестром" ряду Гисса или на планшетах результат должен соответствовать биохимическим свойствам E.coli О20:К84
	Определение спектра антибиотикорезистентности выделенной культуры диско-диффузионым методом на среде Мюллера-Хинтона

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ДИЗЕНТЕРИИ

Бактериологический метод

1 день Исследуемый материал испражнения, ректальный мазок со слизистой прямой кишки посев на среды Эндо и Плоскирева или Левина и Плоскирева

2 день

1) Учет характера роста на средах:	2) Приготовление мазков из лактозонегативных (бесцветных) колоний. Окраска по Граму и микроскопия.	3) Откол бесцветных колоний колоний на среду Клиглера
Эндо (бледно-розовая )	Плоскирева (оранжевая)

3день. Учет биохимических свойств на среде Клиглера

Результат: глюкоза ферментирована с образованием кислоты (К+), лактоза не фементирована, сероводород не образуется

Вывод по первичным биохимическим признакам выделенная культура предварительно является шигеллой

Серотипирование выделенной культуры вреакции агглютинации на стекле Исследуемый материал чистая культура со среды Клиглера Диагностический препаратПоливалентная шигеллезная и видовые шигеллезные кроличьи сыворотки

Поливалентная	Видовые сыворотки к возбудителям	Физ. р-р
шигеллезная сыворотка	S.dysenteriae	S.flexneri	S.boydii	S.sonnei

Результатположительная реакция агглютинации с поливалентной шигеллезной сывороткой и видовой шигеллезной сывороткой к шигелле Зоне; Вывод предварительно выделен возбудитель острой дизентерии S.sonnei (сообщение лечащему врачу)

Постановка тестов для определения антибиотикорезистентности, внутривидовое типирование по биохимическим свойствам и антигенной структуре

4 день. Учет результатов.

а) Определение антибиотикорезистентности диско-диффузионым методом на среде Мюллера-Хинтона

б) Биохимическая активность шигелл ("пестрый" ряд Гисса или планшеты)

Вид	лактоза	глюкоза	маннит	мальтоза	сахароза	пептонная вода
Н2S	индол
S.dysenteriae		К+	-	+ или-	-	-	- или +
S. flexneri		К+	К+	+ или-	-	-	- или +
S. boydii	-	К+	К+	-	-	-	- или +
S. sonnei	- или К+ 2сутки)	К+	К+	К+	- или К+( 2сут)	-	-

Заключение: выделенная культура по биохимическим свойствам идентифицирована, как шигелла Зонне

Выдача результатов.