Методы определения железа сыворотки
Колориметрические методы: батофенантролиновый и феррозиновый. Эти методы основаны на образовании комплексов, интенсивность окрашивания которых оценивается фотометрически.
Определение общей (ОЖСС) и ненасыщенной железосвязывающей способности сыворотки крови (НЖСС)
Содержащееся в сыворотке (плазме) крови железо связано с белком β1-глобулиновой фракции – трансферрином, который синтезируется в печени и препятствует накоплению в плазме свободных токсических ионов железа. В норме этот белок насыщен железом на 30%. Общая железосвязывающая способность сыворотки крови (ОЖСС) отражает наибольшее количество железа, которое может присоединить трансферрин. Она складывается из связанной, насыщенной железом части (сывороточное железо) и ненасыщенной (латентной) железосвязывающей способности сыворотки (НЖСС, ЛЖСС) крови.
Ненасыщенная (латентная) железосвязывающая способностьсыворотки крови (НЖСС, ЛЖСС)
НЖСС - это произвольный показатель, получаемый в результате математической разницы значений общей железосвязывающей способности сыворотки (ОЖСС) и сывороточного железа (ЖС):
НЖСС (ЛЖСС) = ОЖСС – ЖС. Косвенно отражает количество в сыворотке крови «свободного» («несвязанного с железом») трансферрина, т.е. апоферритина.
Коэффициент (процент) насыщения трансферрина железом (КНТ, НТЖ) - показатель, отражающий удельный вес «связанного с железом трансферрина» среди общего количества сывороточного трансферрина:
К (%) = (Сывороточное железо / ОЖСС) ∙ 100.
Нормы:
ОЖСС: 44,8-71,6 мкмоль/л, 3-4 мг/л (мкг/100 мл = 5,585 мкмоль/л)
НЖСС (ЛЖСС): 26,8-41,2 мкмоль/л, 1,5-2,5 мг/л
КНТ (НТЖ) - около 30% (20-55%).
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ
Определение железа и железосвязывающей способности сыворотки крови»
1. Приготовить рабочее место: наборы реактивов, согласно инструкциям к набору реактивовдля определения железа и железосвязывающей способности сыворотки крови, штатив, химические пробирки, механические пипетки, наконечники для пипеток, биологический материал.
2. Провести определение концентрации железа и ОЖСС сыворотки крови.
3. Сделать расчет ЖС, ОЖСС, ЛЖСС и КНТ.
Оформление протокола исследования.
1. Записать принципы метода.
2. Записать схему проведения анализа.
3. Оформить результаты.
4. Сделать расчеты.
5. Выписать нормальные значения.
6. Сделать вывод: сравнить полученный результат с нормой.
7. Выписать из инструкции особенности особенность преаналитического этапа и влияющие факторы.
Интерпретация результатов:
1. Транспортный фонд железа оценивают на основе показателей: сывороточное железо (СЖ), общая железосвязывающая способность сыворотки (ОЖСС), латентная (ненасыщенная) (ЛЖСС, НЖСС), коэффициент насыщения трансферрина (КНТ).
2. Запасы железа в организме оценивают, определяя уровень ферритина в сыворотке. Однако следует учитывать, что диагностическая значимость этого показателя снижается при воспалительных процессах в организме, т.к. ферритин относится к белкам острой фазы.
3. Эффективность эритропоэза оценивают по уровню трансферриновых рецепторов (TfR) в сыворотке крови. Наибольшее количество этих рецепторов находится на клетках-предшественниках эритроцитов. По мере созревания эти клетки теряют свои рецепторы, и концентрация TfRвозрастает в сыворотке при усилении эритропоэза.
Клинико-диагностическое значение определения железа и железосвязывающей способности сыворотки крови
Таблица 1. Причины дефицита железа
| Хроническая кровопотеря · Желудочно-кишечная (язвы и опухоли, грыжи пищевода и кишечника). · При менструациях и родах. · Легочная. · Через моче-половой тракт (заболевание почек, урологическое заболевание). · Рецидивирующие носовые кровотечения. |
| Нарушение всасывания. · Резекция желудка и 12-перстной кишки, атрофические изменения слизистой желудка. · Недостаточность поджелудочной железы. · Глютеновая энтеропатия (целиакия) и спру. |
| Повышение потребности · Быстрый рост (недоношенные новорожденные, дети, подростки). · Беременные и лактация. |
| Бедная железом диета. |
Таблица 2. Стадии железодефицитного состояния (ЖДС) и их основные характеристики
| Стадия ЖДС | Основные характеристики |
| Предлатентный дефицит железа | · Увеличение всасывания железа в ЖКТ. · Клинические симптомы отсутствуют. · Лабораторные показатели в пределах нормы. |
| Латентный (скрытый) дефицит железа Снижение запасов железа – первая стадия развития ЖДС | · Снижение тканевых запасов железа. · Уровень показателей транспортного фонда в норме. · Гемоглобин в норме. · Клинических проявлений нет. · Снижен уровень ферритина сыворотки, повышены трансферриновые рецепторы. |
| Латентный (скрытый) дефицит железа. Железо-дефицитный эритропоэз – вторая стадия развития ЖДС | · Истощение тканевых запасов железа. · Гемоглобин в норме; анемии нет. · Имеются клинические проявления (сухость кожи, ломкость ногтей, ангулярный стоматит, извращения вкуса и т.д.). · Снижен уровень ферритина сыворотки; повышение ОЖСС и растворимых рецепторов для трансферрина; СЖ снижен, но может быть в норме. |
| Железодефицитная анемия (ЖДА) Заключительная стадия дефицита железа в организме - клинически манифестное состояние | · Запасы железа в организме истощены; гемоглобин снижен. · Микроцитоз; анизоцитоз; пойкилоцитоз. · Уменьшен СОК (МCV), ССГ (MCH) и СКГ (MCHC). · Возникает гипохромия эритроцитов. · СЖ снижено до 5 мкмоль/л (может быть на нижней границе нормы); ОЖСС повышена (> 75 мкмоль/л); сывороточный ферритин значительно снижен (обычно не определяется, т.е. < 5 мкмоль/л); КНТ (НТЖ) ˂15%. · Анемические гипоксидистрофические изменения в органах и тканях. |
Таблица 3. Клинические проявления ЖДС у детей раннего, старшего возраста и взрослых.
| Признаки | Дети раннего возраста | Дети старшего возраста и взрослые |
| Пол | Чаще дефицит встречается у мальчиков | Чаще у девочек и женщин (менструальные потери) |
| Бледность кожи и видимых слизистых оболочек | Выражены у 90% детей с ЖДА и у 50% с ЛДЖ | Выражены у большинства больных, нередка пастозность лица, рук и голеней, у девушек с хлорозом - «алебастровая бледность», кожа с зеленоватым или бледно-голубоватым оттенком. |
| Эпителиальный синдром (сухость кожи, глоссит, стоматит, ломкость, слоистость ногтей, их поперечная исчерченность и ложкообразная форма (койлонихии). | Практически не встречается. | Выраженность зависит от длительности сидеропении. Трофические нарушения волос и ногтей наблюдается у 1/3 детей, ангулярный стоматит («заеды» в уголках губ) - у ¼ пациентов. Глоссит при тяжелом течении часто. |
| Извращение вкуса | Редко | Тяга к острой и соленой пище, и парарексия: выражено влечение к употреблению несъедобных веществ – мела, зубного порошка, глины, земли, песка, льда, угля, штукатурки и др. Больные часто едят сырые продукты – крупы, тесто, фарш. Чаще - у девочек. |
| Извращение обоняния | Возможны | Пристрастие к необычным запахам - керосина, бензина, ацетона, лака, гуталина, выхлопных газов автомашин, свежей типографской краски (газеты, книги), свежей побелки и т.д. |
| Снижение аппетита | Снижен | Чаще снижен. |
| Астено-вегетативные нарушения Сердечно-сосудистая система | Родители обращают внимание на вялость ребенка, быструю утомляемость | Выражена одышка при небольшой нагрузке. Характерно появление систолического шума над всей поверхностью сердца и над крупными сосудами, синусовая тахикардия, синусовая аритмия. При длительном малокровии наступает дистрофия миокарда. |
| Синдром мышечной гипотонии | Выражен | Выражен у большинства больных. |
| Нарушение мочеиспускания | Сложно определить | Императивные позывы на мочеиспускание; ночное неудержание мочи, чаще у девочек; неудержание мочи при смехе, кашле. |
| Синева склер | Редко | Выражена у 80% больных. |
Высокое содержание железа наблюдается при повышенном поступлении в организм, при недостаточном использовании его в кроветворных органах, недостаточном использовании для образования ферритина при заболеваниях печени; при пернициозной анемии, гемолитической анемии, талассемиях, дефиците витамина В12 (макроцитарная, гиперхромная анемия), гломерулонефрите, избыточной терапии препаратами железа. Наследственное нарушение механизма, ограничивающего всасывание железа в ЖКТ, приводит к повышенному поступлению железа в организм и развитию гемохроматоза – отложению железа в паренхиматозных органах в виде гемосидерина: отложение железа в печени приводит к ее циррозу, в поджелудочной железе – к сахарному диабету, в коже – к пигментации.