З. Реакция окислительного декарбоксилирования изоцитрата

В этой реакции одновременно осуществляется и окисление изоцитрата и его декарбоксилирование с высвобождением первой молекулы СО₂и образованием восстановленного кофермента НАДН+Н⁺.Реакция сопряжена с окислительным фосфорилированием, т.е. НАДН+Н⁺ снабжает дыхательную цепь 2Н⁺ и 2ē.

Изоцитрат α-кетоглутарат

НАД⁺ НАДН СО₂

Реакция катализируется регулируемым ферментом НАД⁺-зависимой изоцитратдегидрогеназой.

4. Реакция окислительного декарбоксилирования α-кетоглутарата (α-КГ)

α-КГявляется аналогом пирувата.Реакция катализируется α–кетоглутаратным

мультиэнзимным комплексом.

α-KГ + KoA-SH Сукцинил-S-КоА

НАД⁺ НАДН + Н⁺СО₂

В результате реакции высвобождается вторая молекула СО₂и образуется восстановлен­ный кофермент НАДН+Н⁺,который снабжает дыхательную цепь 2Н⁺ и 2ē. Продуктом реакции является сукцинил-S-КоА,имеющий богатую энергией тиоэфирную связь, так как ΔG= - 32,2 кДж/моль

1. Реакция субстратного фосфорилирования.

Фермент—сукцинил-S-КоА – синтетаза (фермент назван по обратной реакции сукцинаттиокиназа).

Сукцинил-S-KoA + ГДФ + Фн сукцинат + ГТФ+ KoA-SH

За счет энергии гидролиза макроэргического соединения происходит синтез ГТФ. Это единственная реакция ЦТК, в которой непосредственно синтезируется макроэргический трифосфат.

Реакция окисления.

Сукцинат фумарат

ФАД ФАДН₂

Реакция катализируется ФАД-зависимой сукцинатдегидрогеназой.Фермент обладает абсолютной стереоспецифичностью. Продуктом реакции является фумарат (транс-изомер). Восстановленный кофермент ФАДН₂ снабжающий дыхательную цепь 2Н⁺ и 2ē для генерации АТФ

Реакция гидратации

Фумарат +Н₂О → малат

Присоединение воды к фумарату катализируется фумаразой(традиционное название фермента). Продукт реакции – гидроксикислота - малат(яблочная кислота).

Реакция окисления.

Малат ОАА

НАД⁺ НАДН+Н⁺

Реакция катализируется малатдегидрогеназой НАД⁺ -- зависимой.

ОАА включается в реакцию конденсации с новой молекулой ацетил-КоА, т.е. ЦТК за­мыкается. Восстановленный кофермент НАДН+Н⁺снабжает дыхательную цепь 2Н⁺ и 2ē и участвует в процессе окислительного фосфорилирования.

Стехиометрия ЦТК.

СН₃-СО-S-KoA + 2Н₂О +ЗНАД⁺ + ФАД + ГДФ + Н₃РО₄→2СО₂ + 3НАДН+ЗН⁺ +ФАДН₂, +ГТФ + KoA-SH, ΔG=-40,0 кДж/моль

Таким образом, в результате одного оборота цикла от ацетил-КоА отщепляется KoA-SH, а ацетильный остаток расщепляется до 2-х молекул СО₂. Этот метаболический процесс сопровождается:

• образованием 4-х восстановленных коферментов: 3-х молекул НАДН +Н⁺ и 1 молекулы ФАДН ₂;

• синтезом одной молекулы ГТФ, который далее фосфорилирует АДФ с образованием АТФ.

ГТФ + АДФ→ГДФ +АТФ

Энергетический эффект ЦТК.

За счет окислительного фосфорилировапия:

3НАДН + Н⁺ → (6Н⁺и 6ē ) ЦПЭ → 3 х ЗАТФ = 9 АТФ

ФАДН₂ → 2Н⁺и 2ē → ЦПЭ → 2АТФ.

АТФ

За счет субстратного фосфорилирования – 1 АТФ

Итого:при окислении 1 молекулы Ацетил-КоА, при условии сопряжения реакций окис­ления с окислительным фосфорилированием генерируется 12 молекул АТФ.