Реакция с реактивом Несслера.
1 мл хлороформного раствора кофеина помещают в фарфоровую чашку и растворитель испаряют на водяной бане. К сухому остатку прибавляют 0,5 мл дистиллированной воды и 5 капель реактива Несслера, нагревают на водяной бане 1-2 минуты. При наличии кофеина появляется красно-бурый осадок.
2. АТРОПИН.
2.1.Реакция Витали – Морена.
Несколько капель хлороформного раствора исследуемого вещества помещают в фарфоровую чашку и растворитель испаряют без нагревания. К сухому остатку прибавляют 1 мл концентрированной азотной кислоты и выпаривают на кипящей водяной бане досуха. Чашку охлаждают и к полученному остатку добавляют одновременно (с двух сторон) 1-2 капли 10% раствора гидроксида натрия и 3-5 капель ацетона, при соприкосновении реактивов наблюдают фиолетовое быстро исчезающее окрашивание.
2.2. Реакция с солью Рейнеке.
На предметное стекло наслаивают 2-3 капли исследуемого хлороформного раствора, хлороформ испаряют при комнатной температуре. К сухому остатку исследуемого вещества добавляют каплю 0,1н раствора HCI и 1 каплю свежеприготовленного 1% раствора соли Рейнеке. Выделяется аморфный сиреневатого цвета осадок, быстро кристаллизующийся при стоянии в виде сростков с ромбовидными концами.
Реакция с реактивом Драгендорфа.
На предметное стекло наслаивают 2-3 капли исследуемого хлороформного раствора, хлороформ испаряют при комнатной температуре, остаток растворяют в одной капле 0,1н раствора соляной кислоты и наносят каплю раствора реактива Драгендорфа. Через 10-15 минут под микроскопом наблюдают характерные для атропина кристаллы.
Реакция с пикриновой кислотой.
На предметное стекло наслаивают 2-3 капли исследуемого хлороформного раствора, хлороформ испаряют при комнатной температуре .К сухому остатку исследуемого вещества добавляют каплю 0,1н раствора HCI и 1 каплю 0,5 % раствора пикриновой кислоты. Через 15-20 минут образуются тонкие пластинки пикрата атропина светло-жёлтого цвета , отдельные и собранные в сростки.
Реакция с бромной водой.
На предметное стекло наслаивают 2-3 капли исследуемого хлороформного раствора, хлороформ испаряют при комнатной температуре. Сухой остаток исследуемого вещества растворяют в капле 0,1н раствора HCI и соединяют с каплей насыщенного раствора брома .В ту же минуту выделяется осадок, состоящий из жёлтых и красно-бурых кристаллов рисообразной игольчатой формы.
УИРС. ТСХ –анализ алкалоидов.
Условия проведения ТСХ-анализа :
хроматографическая пластинка « Сорбфил»
хроматографическая система: диэтиловый эфир: ацетон: 25% раствор аммиака ( 40:20:1)
исследуемые вещества: хлороформные растворы кофеина и атропина.
Обработка пластинки :
1) опрыскивание реактивом Драгендорфа по Мунье.
2) опрыскивание концентрированной серной кислотой в этаноле.
После проведения исследования зарисовать полученную хроматограмму и рассчитать значение Rf .
ЗАНЯТИЕ № 8
| ТЕМА: | Свойства и ХТА алкалоидов, производных изохинолина. Наркомания. Токсикомания. |
| ЦЕЛЬ: | Сформировать знания и практические навыки проведения ХТА наркотина, папаверина, морфина, кодеина, этилморфина, диацетилморфина, промедола и меконовой кислоты. Рассмотреть основные причины отравления и токсические свойства алкалоидов опийной группы. |
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА СТУДЕНТА К ЗАНЯТИЮ:
Основные термины, понятия и ключевые соединения:
Наркотическое средство и средство, вызывающее токсикоманию. Алкалоиды опия: наркотин, папаверин, кодеин, морфин, этилморфин, диацетилморфин, промедол. Меконовая кислота. Диагностическое значение меконовой кислоты.
Логическая структура темы:
| Алкалоиды – производные ИЗОХИНОЛИНА | |||||
| Опиаты | Опиоиды | Сопутствующие вещества | |||
| Природ-ные | Синтети-ческие | Промедол | Меконовая кислота Меконин | ||
| Морфин Кодеин Папаве-рин Наркотин | Героин Этилмор-фин (дионин) | ||||
| МОРФИН | |||||
| Действие на организм. Токсичность. Токсикокинетика. Метаболизм. | Наркотик. Психотропное и нейротоксическое действие. Уменьшение возбудимости болевых центров. Противошоковое действие. Угнетение дыхательного центра. Возбуждение центра блуждающих нервов. Гипертонус мышц, падение АД, сужение зрачков. Токсическая доза подкожно-0,1 г .Смертельная при приёме внутрь- 0,3-1,4г. | ||||
| Изолирование | Экстракция | ||||
| Химико-токсикологический анализ. | |||||
| Качественный | Реакция Пеллагри Общеалкалоидные осадительные реактивы HNO3 конц. FeCl3 HJO3 Реактив Марки, Фреде, Манделина, Эрдмана. K3[Fe(CN)6] и FeCl3. ТСХ,УФС, ИКС,ИХА ГЖХ, ВЭЖХ, ГХ/МС | ||||
| Количественный | ФЭК,СФМ,ГЖХ, ВЭЖХ,ГХ/МС | ||||
| КОДЕИН | |||||
| Действие на организм. Токсичность. Токсикокинетика. Метаболизм. | Наркотик Психотропное и нейротоксическое действие. Угнетение дыхательного и кашлевого центра. Возбуждение центра блуждающих нервов. Сужение зрачков, заторможенность, головная боль, судороги, кома. Токсическая доза-0,2-0,3г.Смертельная доза-0,5г. | ||||
| Изолирование | Экстракция | ||||
| Химико-токсикологический анализ. | |||||
| Качественный | Реакция Пеллагри HNO3 конц. Реактив Марки, Фреде, Манделина, Эрдмана. Общеалкалоидные осадительные реактивы ТСХ,УФС, ИКС,ИХА ГЖХ, ВЭЖХ, ГХ/МС | ||||
| Количественный | СФМ, ФЭК,ГЖХ,ВЭЖХ,ГХ/МС | ||||
| ПАПАВЕРИН | |||||
| Действие на организм. Токсичность. Токсикокинетика. Метаболизм | Сосудорасширяющее, спазмолитическое, седативное Действие. | ||||
| Изолирование | Экстракция | ||||
| Химико-токсикологический анализ | |||||
| Качественный | Общеалкалоидные реактивы Реактив Фреде, Манделина, Эрдмана, J2 CdCl2 ТСХ ИКС, УФС | ||||
| Количественный | СФМ, ФЭК,ГЖХ,ВЭЖХ | ||||
| НАРКОТИН | |||||
| Действие на организм. Токсичность. Токсикокинетика. Метаболизм | Диагностическое значение | ||||
| Изолирование | Экстракция | ||||
| Химико-токсикологический анализ | |||||
| Качественный | Общеалкалоидные реактивы Реактив Марки Реактив Эрдмана Реактив Фреде H2SO4 конц. ТСХ,УФС, ИКС,ИХА ГЖХ, ВЭЖХ, ГХ/МС | ||||
| МЕКОНОВАЯ КИСЛОТА | |||||
| Действие на организм. Токсичность. Токсикокинетика. Метаболизм | Диагностическое значение | ||||
| Изолирование | Экстракция | ||||
| Химико-токсикологический анализ | |||||
| Качественный | Железа хлорид СФМ | ||||
| ЭТИЛМОРФИН ( ДИОНИН) | |||||
| Действие на организм. Токсичность. Токсикокинетика. Метаболизм | Наркотик. Болеутоляющий и противокашлевой эффект. Сужение зрачков. Действие сходное с кодеином. | ||||
| Изолирование | Экстракция | ||||
| Химико-токсикологический анализ | |||||
| Качественный | Общеалкалоидные осадительные реактивы Реактив Марки, Фреде, Манделина, Эрдмана, HgCl2 ТСХ,УФС, ИКС,ИХА ГЖХ, ВЭЖХ, ГХ/МС | ||||
| Количественный | ГЖХ,ВЭЖХ, ГХ/МС | ||||
| ГЕРОИН | |||||
| Действие на организм. Токсичность. Токсикокинетика. Метаболизм | Наркотик. Психотропное и нейротоксическое действие, угнетение дыхательного центра, сужение зрачков. | ||||
| Изолирование | Экстракция | ||||
| Химико-токсикологический анализ | |||||
| Качественный | Общеалкалоидные реактивы Реактив Марки HNO3 конц. ТСХ ИК и УФ спектроскопия ИХА | ||||
| Количественный | ГЖХ,ВЭЖХ,ГХ/МС | ||||
| ПРОМЕДОЛ | |||||
| Действие на организм. Токсичность. Токсикокинетика. Метаболизм | Наркотик. Болеутоляющее, противошоковое действие. Угнетение дыхательного центра. | ||||
| Изолирование | Экстракция | ||||
| Химико-токсикологический анализ | |||||
| Качественный | Общеалкалоидные реактивы Реактив Марки Ализарин красный ТСХ,УФС, ИКС,ИХА ГЖХ, ВЭЖХ, ГХ/МС | ||||
| Количественный | СФМ,ИХА ГЖХ,ВЭЖХ, ГХ/МС | ||||
Литература для самоподготовки:
1.Лужников Е.А. Клиническая токсикология[Текст] / Е.А.Лужников.- Изд. 3-е, перераб.и доп.- М.: Медицина, 1999.-С. 268-269.
2.Крамаренко,В. Ф. Токсикологическая химия[Текст]/ В.Ф.Крамаренко. – Киев: Выща школа, 1989.-С. 219-222, 238-248, 292-295.
3.Швайкова, М.Д. Токсикологическая химия [Текст] / М.Д.Швайкова. – М.: Медицина, 1975.-С. 203-215.
4.Белова, А.В. Руководство к практическим занятиям по токсикологической химии [Текст] / А.В.Белова. - Изд. 2-е, исправ.-М.:-Медицина,1976.-С. 101-108.
5.Якушева Н.Ю., Минаева Н.Н. Сборник вопросов и задач по токсикологической химии. [Текст] Учебное пособие / Н.Ю.Якушева, Н.Н.Минаева – Х : ДВГМУ , 2007 .-С.118-126.
6. Токсикологическая химия [Текст] / Под ред. Т.В.Плетенёвой.- М.:ГОЭТАР-МЕД, 2005.-С.263-275.
7.Токсикологическая химия. Метаболизм и анализ токсикантов в биосредах человека [Текст] / Под ред. Н.И.Калетиной.-М.: ГОЭТАР-МЕД,2007 –C.556-571.
8.Материалы лекций.
Вопросы для самоподготовки:
1. По каким критериям различают наркотическое средство и средство, вызывающее токсикоманию?
2. Какие из производных изохинолина относятся к наркотическим средствам?
3. С помощью каких реакций можно обнаружить морфин и кодеин и отличить их друг от друга?
4. В каких случаях проводят анализ на наличие меконовой кислоты и наркотина? Как отличить опий от омнопона?
5. Какими методами определяют количественное содержание морфина и кодеина в биоматериале?
6. С помощью каких реакций можно обнаружить этилморфин, диацетилморфин и промедол?
7. Назовите маркёр отравления героином.
8. Решите расчётную задачу:
8.1.При экстракции 10 мл крови хлороформом при рН 10-11 получено извлечение объемом 10 мл. Качественный анализ показал наличие папаверина. 5 мл хлороформного извлечения упарили, сухой остаток растворили в 25 мл 0,1 М кислоты хлористоводородной. Оптическая плотность полученного раствора при аналитической длине волны 250 нм составила 0,106. Оптическая плотность стандартного раствора вещества с концентрацией 0,0005% составила 0,312. Рассчитайте концентрацию папаверина в крови (мкг/мл).
9.Решите ситуационную задачу ( по заданию преподавателя)
Тестовый контроль по теме:
ТЗ 1-2Установите соответствие:
Вещество: Группа алкалоидов:
1. Наркотин. А.Группа пиридина
2. Кодеин. Б.Группа индола
В.Группа фенантренизохинолина
Г. Группа бензилизохинолина
Д.Группа пурина
ТЗ 3. Значение рН водных вытяжек, при котором кодеин экстрагируется органическими растворителями -... .
ТЗ 4. Реактив, используемый для обнаружения наркотина в хлороформных вытяжках:
1. Н2SO4 конц.
2. Паули
3. Дюкенау – Левина
4. Форреста
5. FPN-реактив
ТЗ 5. Соединение, наличие которого позволяет отличить опий от омнопона
1. Морфин
2. Наркотин
3. Папаверин
4. Кодеин
5. Меконовая кислота
ТЗ 6. Значение рН водных вытяжек, при котором меконовая кислота экстрагируется органическими растворителями -... .
ТЗ 7.Вещество, обладающее сосудорасширяющим и спазмолитическим действием
1.Кодеин
2.Апоморфин
3.Этилморфин
4.Папаверин
5.Морфин
ТЗ 8. Реактив, позволяющий отличить морфин от кодеина
1. Хлорид железа (III)
2. Драгендорфа
3. Фреде
4. Манделина
5. Марки
ТЗ 9. Реактив, используемый для обнаружения этилморфина в хлороформных вытяжках
1. Хлорид железа(III)
2. Хлорид ртути (II)
3. Нингидрин
4. Серная кислота
5. Форреста
ТЗ 10. Название метаболита кодеина, образующегося в результате реакции о-деметилирования ……………… .
ТЗ 11. Вещество, определяемое с помощью реактива Марки и ализаринового красного
1. Апоморфин.
2. Папаверин.
3. Этилморфин.
4. Промедол.
5. Кодеин.
ТЗ 12. Реактив, используемый для обнаружения меконовой кислоты в вытяжках из биологического материала:
1. Драгендорфа.
2. Манделина.
3. Хлорид железа (III).
4. Фреде.
5. Марки.
Т3 13. Алкалоид, определяемый реакцией Пеллагри и хлоридом железа
1. Кофеин.
2. Морфин.
3. Папаверин.
4. Наркотин.
5. Меконин.
ТЗ 14. Реактив, используемый для экстракционно – фотометрического определения кодеина:
1. Марки.
2. Манделина.
3. Тропеолин 00.
4. Кремнемолибденовая кислота.
5. Кремневольфрамовая кислота.
ТЗ 15. Реактив, используемый для фотоколориметрического определения морфина:
1. Хлорид железа (III).
2. Гексацианоферрат (III) калия.
3. Йодноватая кислота.
4. Кремневольфрамовая кислота.
5. Кремнемолибденовая кислота.
СОДЕРЖАНИЕ АУДИТОРНОГО ЗАНЯТИЯ:
1. Семинар по теме занятия.
2. Практикум.
3. Оформление протокола практического занятия.
4. Тестовый контроль усвоения темы.
ПРАКТИКУМ
Папаверин