Смеситель для эритроцитов, счетная камера и сетка Горяева

В силу капиллярности жидкость заполнит камеру. Затем камеру ставят на предметный столик микроскопа и, если форменные элементы расположены равномерно над сеткой Горяева, приступают к их подсчету. Подсчитывают число эритроцитов в пяти больших квадратах, что составляет 80 маленьких, расположенных по диагонали. При этом во время подсчета найденное число эритроцитов заносят последовательно в маленькие квадраты, изображенные в разделе «Полученные результаты». Во избежание двукратного подсчета клеток, лежащих на границе малых квадратов, руководствуются правилом Егорова: относящимися к данному квадратику считаются эритроциты, лежащие как внутри квадратика, так и на его левой и верхней границах. Эритроциты, лежащие на правой и нижней границах, в данном квадратике не считаются. Подсчитав общую сумму эритроцитов в пяти больших квадратах, вычисляют количество эритроцитов в 1 мм³ по следующей формуле:

Х = А × 4000 × 200

где Х – искомое количество эритроцитов в 1 мм³ крови, А – число эритроцитов в 5 больших (80 маленьких) квадратах, 200 – степень разведения крови, 4000 – фактор пересчета для определения количества эритроцитов в 1 мм³. На рисунках обозначают малый и большой квадраты, указывают размеры сторон и площади малого квадрата, обозначают слой крови в счетной камере и указывают уровень наполнения смесителя кровью. Сравнивают полученный результат с нормой и делают вывод.

Полученные результаты:

Сумма эритроцитов в 5 больших квадратах______________________ Х = А × 4000 × 200 =

В 1 мм³ крови у _________

(фамилия, пол, возраст)

содержится __ эритроцитов.

ВЫВОД:___________________________

___ ___

Преподаватель:

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ

1. Внутренняя среда организма (кровь, лимфа, тканевая жидкость) и ее значение. Понятие о гомеостазе.

2. Система крови. Количество крови в организме и ее состав. Гематокритный показатель.

3. Основные функции крови и их значение для организма.

4. Физико-химические свойства крови. Факторы, определяющие вязкость крови.

5. Состав плазмы. Характеристика белков, углеводов, липидов, минеральных веществ плазмы и их значение. Небелковые азотистые компоненты плазмы и их значение. Альбуминово-глобулиновый коэффициент.

6. Форменные элементы крови. Эритроциты, их форма, цитометрические показатели (диаметр, толщина, поверхность, объем) и строение. Содержание и концентрация гемоглобина в эритроцитах.

7. Функции эритроцитов, значение формы и строения.

8. Количество эритроцитов в зависимости от пола и возраста.

9. Физиологический эритроцитоз и его виды.

10. Понятие об эритроне. Понятие о гемопоэзе. Эритропоэз и факторы, его обеспечивающие. Роль цитокинов. Возрастные особенности кроветворения. Продолжительность жизни эритроцитов.

11. Гемолиз и его виды. Границы осмотической стойкости эритроцитов.

12. Мануальные и автоматические методы определения количества эритроцитов и их цитометрических показателей.

Работа 60. ПОДСЧЕТ ЛЕЙКОЦИТОВ.

Дата __

Цель работы:овладеть методикой подсчета лейкоцитов и определить их количество.

Методика. Описанным в работе № 59 методом набирают кровь в смеситель для лейкоцитов, объем ампулы в котором в 10 раз меньше, чем в смесителе для эритроцитов. Затем разбавляют ее в 20 раз 5% раствором уксусной кислоты, подкрашенной метиленовой синью. Притирают покровное стекло к счетной камере и заполняют ее разбавленной кровью из смесителя.

Подсчет лейкоцитов ведут при малом увеличении микроскопа в 100 больших квадратах, что составляет 1600 малых квадратиков. При этом найденное число лейкоцитов в каждом большом квадрате заносят в соответствующие квадраты специальной сетки, изображенной в разделе «Полученные результаты». Подсчитывают число лейкоцитов в 100 больших квадратах. Количество лейкоцитов в 1 мм³ рассчитывают по формуле:

Х = В × 4000 × 20 ,

где, Х – число лейкоцитов в 1 мм³ крови, В – число лейкоцитов в 100 больших (1600 малых) квадратах, 20 – степень разведения крови, 4000 – фактор пересчета для определения количества лейкоцитов в 1 мм³. Сравнивают полученные результаты с должными величинами и делают вывод.

Полученные результаты:

Количество лейкоцитов в 1 мм³ исследуемой крови:

Х = × 4000 × 20 =

В 1 мм³ крови у

______________________

(фамилия, пол, возраст)

содержится ________________ лейкоцитов.

ВЫВОД:__________________________

___

Преподаватель:

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ:

1. Лейкоциты, их количество. Лейкоцитарная формула.

2. Мануальные и автоматические методы исследования количества лейкоцитов.

3. Виды физиологического лейкоцитоза.

4. Виды зернистых лейкоцитов (нейтрофилы, базофилы, эозинофилы), их функции. Типы гранулоцитарного резерва и их значение.

5. Виды незернистых лейкоцитов (моноциты, лимфоциты), их функции. Т- и В-лимфоциты, их характеристика и значение.

6. Лейкопоэз и факторы, его обеспечивающие.

7. Неспецифическая резистентность организма и ее механизмы. Фагоцитоз, его стадии и механизмы. Система комплемента, ее состав и функции.

8. Понятие об иммунитете. Иммунный ответ (первичный, вторичный). Роль антигенов и антител.

9. Взаимодействие клеток иммунной системы в иммунном ответе.

10. Цитокины, их свойства и функциональное значение.

11. Иммуноглобулины, их классификация. Функциональное значение различных видов иммуноглобулинов в иммунитете.

12. Регуляция иммунного ответа. Роль иммунной системы в регуляции физиологических функций.

Работа 61. ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС - ФАКТОРА.

Дата______

Цель работы: овладеть методикой определения резус-фактора, уяснить принцип подразделения крови человека на резус-положительную и резус-отрицательную.

Методика. На дно центрифужной пробирки наносят специальной пипеткой одну каплю стандартного реагента антирезуса и одну каплю исследуемой крови. Содержимое пробирки перемешивают встряхиванием и затем, медленно поворачивая, наклоняют пробирку почти до горизонтали таким образом, чтобы содержимое растекалось по стенкам пробирки. Вращение пробирки следует производить до появления результата, но не менее трех минут. Оценка результатов производится визуально. Если на стенках пробирки видна равномерно окрашенная взвесью эритроцитов жидкость, кровь является резус-отрицательной. Появление четко различимых агрегатов эритроцитов на фоне просветленной жидкости указывает на резус-положительную принадлежность исследуемой крови. Для исключения неспецифической агглютинации эритроцитов в пробирку следует добавить 2 мл физиологического раствора и перемешать, не взбалтывая, путем 2 - 3-кратного перевертывания пробирки.

Полученные результаты:

После смешивания крови ________________________ со стандартным

(фамилия, пол)

реагентом реакция агглютинации _______________________________

(наступила, не наступила)

ВЫВОД:_____________________

______

Преподаватель:

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ

1. Понятие об антигенах системы резус и их обозначения по Винеру и Фишеру-Рейсу.

2. Понятие о резус-положительной и резус-отрицательной крови. Частота встречаемости резус-антигена Rh0 (D) среди населения Европы и Азии.

3. Значение резус-фактора при гемотрансфузиях. Механизмы резус-конфликта.

4. Роль резус-фактора в формировании иммунологически конфликтной беременности.

5. Сроки формирования резус-антигенов у плода.

6. Определение резус-принадлежности крови.

Работа 62. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СКОРОСТИ ОСЕДАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ (СОЭ).

Дата ________

Цель работы: изучить суспензионную устойчивость крови, разобрать механизм оседания эритроцитов и его значение для клиники, овладеть методикой определения скорости оседания эритроцитов.

Методика.Для определения скорости оседания эритроцитов применяется прибор Панченкова, состоящий из штатива, в котором зажимаются в вертикальном положении специальные капилляры. На капиллярах имеется шкала в мм, состоящая из 100 делений, и две метки: «К» (кровь) на уровне нуля и «Р» (реактив) на уровне 50 мм. Капилляр промывают 5% раствором цитрата натрия. Затем набирают раствор цитрата натрия до метки «Р» и выдувают его на часовое стекло. Вслед за этим делают прокол пальца и в тот же капилляр двукратно набирают кровь до метки «К». Обе порции крови выпускают на часовое стекло и смешивают с раствором цитрата. Полученную смесь крови с цитратом в отношении 4:1 набирают в капилляр до нулевой отметки и ставят его в штатив, отмечая время. По прошествии часа измеряют по шкале капилляра высоту образовавшегося столбика плазмы. Высота столба плазмы в мм, образовавшегося за 1 час в результате оседания эритроцитов, является мерой СОЭ. При работе следует иметь в виду, что для успешного взятия крови прокол пальца должен быть довольно глубоким, капилляр следует держать слегка наклонно, погрузив его кончик в каплю крови, при этих условиях кровь сама заполнит капилляр. Зарисовывают капилляр прибора Панченкова, показав величину скорости оседания эритроцитов в опыте. Сравнивают полученный результат с нормой и делают вывод.

Полученные результаты: