Проведение эксперимента и оценка результатов.

Наливают в химические стаканы сточную воду до прохождения через очист­ные сооружения и после (по 200 мл в трехкратной повторности). Контроль-очищенная или аквариумная вода. В каждый стакан помещают по 10 рачков в возрасте 2-4 суток. Для этого пипеткой с широким концом дафний отлавливают из сосуда, где они выращивались, и помещают на часовое стекло. Тонкой пи­петкой отсасывают воду со стекла и дафний смывают в приготовленный стакан, используя жидкость из этого же стакана. Дафний сначала помещают в кон­трольные, а затем в опытные стаканы, начиная с наименьшей концентрации. При проведении опыта их не кормят.

По истечении 1,2,4,8,24,48 часов снимают результаты опытов, учитывая при этом число живых особей, их поведение, степень наполнения кишечника пищей, количество сброшенных эфипиумов. Те животные, которые в течение нескольких секунд после легкого встряхивания стакана не начинают двигаться вновь, считаются погибшими, несмотря на то, что у них могут двигаться антен­ны.

При осмотре стаканов погибших дафний удаляют пипеткой, начиная с наи­менее концентрированного раствора, после чего пипетку тщательно моют. Для контроля должна быть отдельная пипетка.

Если гибель дафний в контроле превышает 10%, то опыт повторяют.

При отмирании 50% особей концентрация считаются сильно токсичной и обо­значается ЛК₅₀. При гибели 100% особей концентрация считается летальной (ЛК₁₀₀). Минимальная концентрация, при которой организмы не гибнут, обозна­чается ЛК₀.

Если за период наблюдений гибель дафний не наблюдается даже в неразбав­ленной воде, значит острой токсичностью она обладает. При гибели 20% особей концентрация уже считается вредной.

В результате опытов можно получить ответы на следующие вопросы:

1. Является ли испытуемое вещество или сточная вода остротоксичнцыми?

2. Каким должно быть разбавление сточной воды или какой должна быть кон­центрация вещества, чтобы исчезла острая токсичность

Б) исследование воды с ряской и элодеей.

Оборудование, материалы

1) сосуды для сбора ряски; 2) стаканы на 500 мл; 3) линейки; 4) весы торсионные; 5) бритвы.

Одинаковые растения ряски отбирают из естественных популяций условно чистых водоемов в начале июня, когда много молодых растений, в сосуды, на дне которых налито немного чистой воды. В жаркую погоду, чтобы избежать подсыхания ряски, очень хорошо пользоваться широкогорлым термосом с ку­сочками льда на дне. Лед следует прикрыть несколькими слоями влажной фильтровальной бумаги, чтобы он не касался ряски.

Затем отбирают одинаковые особи ряски и рассаживают их по пять штук в стаканы с водой, качество которой хотят определить. Повторность опытов трех­кратная. Контроль- вода из чистого водоема или водопроводная вода, выстоян­ная и прошедшая очистку фильтрацией через активированный уголь.

Опытные сосуды выставляют на рассеянный свет. Ежедневно учитывают следующие параметры: изменение окраски, потеря тургора, повреждение точек роста, повреждение точек роста, выживаемость (в течение 5-10 суток), прирост и число боковых отростков, число корней и их длина. В случае малой токсичности воды и относительно хорошей сохранности растений в конце опыта их вынимают из воды, обсушивают фильтрованной бумагой, отделяют бритвой надводную и подводную части и взвешивают на торсионных весах. Полученные измерения выражают по отношению к контролю, взятому за 100%, обрабатывают статически.

В качестве тест – растения можно использовать элодею, опыты с которой проводятся аналогично вышеописанным. Элодея- растение стоячих и медленно текущих вод. Интенсивно размножается обрывками побегов. Завезенный из Америки в XIX веке быстро расселилась по водоемам Европы Азии и Австралии. Она интересна тем, что ее выращивание для биотестов возможно в условиях аквариумов.

Вопросы к экзамену