Количественное определение нитритного азота
Метод основан на способности нитритных ионов давать интенсивно окрашенные диазосоединения с первичными ароматическими аминами. При определении используется реакция с сульфаниловой кислотой и -нафтиламином (реактив Грисса).
Чувствительность метода – 0,5 мкг NO2- в 1 л. При большом содержании нитритов исследуемую воду необходимо разбавлять.
Определению мешают взвешенные вещества, мутность, окраска воды, а также сильные окислители и восстановители. Мутность и цветность удаляют фильтрованием и коагулированием. К 300 мл пробы прибавляют 0,5 г активированного угля или гидроксида аммония. Влияние окислителей и восстановителей в сильно загрязненных пробах устраняют соответствующим разбавлением пробы дистиллированной водой.
50 мл исследуемой осветленной или предварительно разбавленной воды (чтобы в ней содержалось до 0,015 мг азота) помещают в колбу или стакан, приливают 5 мл реактива Грисса и перемешивают. Окраска появляется через 40 мин и сохраняется неизменной в течение 3 часов. Через 40 мин растворы фотометрируют в кюветах толщиной 2 – 5 см с зеленым светофильтром ( 530 нм) по отношению к дистиллированной воде с добавлением реактива Грисса.
Содержание нитритов находят по калибровочному графику или визуальным сравнением интенсивности окраски пробы и шкалы стандартных растворов.
При очень малом содержании нитритов, когда окраска в исследуемой пробе не проявляется в течение 30 мин, пробу воды и стандарты подогревают 10 мин при ~ 70°С (в одинаковых условиях), охлаждают и фотометрируют с этими стандартами.
Построение калибровочного графика. В ряд мерных колб на 50 мл вносят рабочий стандартный раствор в количестве 0 – 0,1 – 0,2 – 0,5 – 1 – 2 – 5 – 10 – 15 мл, что соответствует содержанию 0; 0,1; 0,2; 0,5; 1; 2; 5; 10; 15 мкг азота нитритов. В колбы доливают дистиллированную воду до метки и прибавляют по 5 мл 10%-го раствора реактива Грисса, перемешивают и через 40 мин фотометрируют. Калибровочный график строят в координатах: оптическая плотность – содержание азота нитритов (мкг). Целесообразно строить два калибровочных графика, для содержания азота нитритов от 0 до 4 мкг и от 0 до 15 мкг.
Концентрацию нитритов (мг NO2-/л) рассчитывают по формуле:
,
где А – содержание нитритов, найденное по калибровочному графику, мг; V – объем пробы, взятой для анализа, мл.
Для выражения результатов в форме нитритного азота, мг N/л полученную величину (мг NO2-/л) умножают на коэффициент 0,3.
3.3. Обнаружение ионов Fe2+ и Fe3+
3.3.1. Качественное обнаружение Fe2+
Напредметное стекло наносят каплю исследуемой воды затем прибавляют каплю раствора гексацианоферрата (III) калия K3[Fe(CN)6]. В присутствии ионов железа (II) образуется темно-синий осадок.
Образование темно-синего осадка «турнбулевой сини», нерастворимого в кислотах, но растворимого в щелочах идет по уравнению:
Fe2+ + [Fe(CN)6]3- Fe3+ + [Fe(CN)6]4-,
4Fe3+ + 3[Fe(CN)6]4- Fe4[Fe(CN)6]3
Чувствительность реакции: m = 0,6 мкг Fe2+.
3.3.2. Качественное обнаружение Fe3+
К капле исследуемой воды, на предметном стекле, прибавляют каплю раствора сульфосалициловой кислоты. В присутствии ионов железа (III) появляется фиолетовая окраска образующейся комплексной соли.
Чувствительность реакции: m = 0,125 мкг Fe3+.