Государственная фармакопея Российской Федерации XIII издания, т. 2

Министерство здравоохранения Российской Федерации

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение

Высшего образования

ПЕРВЫЙ МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ

УНИВЕРСИТЕТ имени И.М.СЕЧЕНОВА

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

КАФЕДРА ФАРМАКОГНОЗИИ

Руководство к практическим занятиям

По фармакогнозии

Тема: Освоение методик фармакогностического анализа

Москва 2016

ТЕМА 1

МЕТОДИКИ ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА

На практических занятиях студент получает умения и практические навыки для решения профессиональных задач по анализу цельного лекарственного растительного сырья в соответствии с государственными стандартами качества.

Для реализации компетенций по контролю качества студенты должны пользоваться Государственной фармакопеей РФ (http://www.femb.ru/feml), которая отражает современные требования к качеству всех лекарственных средств, включая лекарственное растительное сырье и лекарственные растительные препараты, методы определения качества и нормы. Федеральный закон № 61 «Об обращении лекарственных средств» включает главу 3 «Государственная фармакопея».

В Федеральный государственный образовательный стандарт по специальности «Фармация» включена профессиональная компетенция:

Ø способность и готовность проводить анализ и оценивать качество лекарственного растительного сырья (используемые органы растения, гистологическая структура, химический состав действующих и других групп биологически активны веществ);

дата_______ ЗАНЯТИЕ 1

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОДЛИННОСТИ ЦЕЛЬНЫХ ЛИСТЬЕВ

Самостоятельная работа (подготовка к занятию)

Задание 1.Проанализируйте ОФС. 1.5.1.0001.15 «Лекарственное растительное сырье. Фармацевтические субстанции растительного происхождения», ОФС.1.5.3.0004.15 «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах», ОФС. 1.5.1.0003.15 «Листья. Folia» Запишите определения понятий:

«Лекарственное растение» -___________________

_____________

_____________

«Лекарственное растительное сырье» - _________

_____________

_____________

_____________

«Фармацевтическая субстанция растительного происхождения» -

_____________

_____________

_____________

_____________

_____________

«Подлинность» - _____________________________

_____________

Лекарственное растительное сырье «Листья» - ____

_____________

_____________

Какой документ регламентирует проведение анализа лекарственного растительного сырья «листья»? ___

Задание 2. Зарисуйте форму листьев ландыша майского, крапивы двудомной, толокнянки обыкновенной, наперстянки шерстистой.

Лек. растение
Форма листа	Овальная	Яйцевидная	Обратно-яйцевидная	Ланцетовидная
Рисунок

Задание 3.Зарисуйте жилкование листьев подорожника большого и наперстянки крупноцветковой.

Лек. растение
Жилкование листа	Углонервное (перистонервное)	Дугонервное
Рисунок

Задание 4. Зарисуйте край листа наперстянки пурпуровой, мяты перечной, ландыша майского, мать-и-мачехи.

Лек. растение
Край листа	Городчатый	Пильчатый	Цельнокрайний	Выямчатый
Рисунок

Задание 5. Зарисуйте типы устьичных комплексов листьев брусники обыкновенной, мяты перечной, вахты трехлистной, красавки обыкновенной, ландыша майского и приведите их названия.

ЛРС	Рисунок	Название типа устьичного комплекса
Листья брусники обыкновенной
Листья мяты перечной
Листья вахты трехлистной
Листья красавки обыкновенной
Листья ландыша майского

Задание 6. Зарисуйте типы простых и головчатых волосков и приведите примеры ЛРС «листья», где они встречаются.

Простые волоски	Головчатые волоски
Строение	Рисунок	ЛРС	Строение	Рисунок	ЛРС
одноклеточные, гладкие			одноклеточная головка на одноклеточной ножке
Одноклеточные «ретортовидные»			двуклеточная головка на одноклеточной ножке
2–4-клеточные, с бородавчатой поверхностью			одноклеточная головка на многоклеточной ножке
3–4-клеточные, верхняя клетка длинная, сильно изогнутая			многоклеточная головка на одноклеточной ножке
			многоклеточная головка на многоклеточной ножке

Запишите, в какой ткани располагаются волоски:________________________________

Задание 7. Зарисуйте типы включений оксалата кальция в листьях крапивы двудомной, ландыша майского, кассии (сенны) остролистной, красавки обыкновенной.

Лек.растение
Форма включений оксалата кальция	Друзы	Рафиды	Клетки с кристаллическим песком	Призматические кристаллы
Рисунок

Запишите, в какой ткани располагаются включения оксалата кальция: ____________

Задание 8. Зарисуйте секреторные структуры, встречающиеся в листьях мяты перечной, полыни горькой, эвкалипта прутовидного и укажите место их нахождения.

ЛРС	Рисунок	Название структуры	Место нахождения
Листья мяты перечной
Листья полыни горькой
Листья эвкалипта прутовидного

«Входной контроль сдан» ___________________ «____»________20___г.

(подпись преподавателя)

РАБОТА НА ЗАНЯТИИ

Обратите внимание:

Ø Подлинность ЛРС «листья» во время занятия устанавливают в соответствии с разделами ФС «Внешние признаки» и «Микроскопия».

Ø При изучении внешних признаков листьев размеры и форму (кроме кожистых листьев) определяют визуально на размоченном сырье, остальные признаки – на сухом сырье. Запах устанавливают при растирании сырья. Вкус определяют только у неядовитых растений в водном извлечении или при разжевывании сырья (не глотая).

Ø При микроскопическом анализе образца необходимо установить локализацию диагностических признаков по тканям (эпидермис, мезофилл).

Ø Нормативной документацией пользуются только на заключительном этапе анализа сырья для сравнения полученных результатов и написания заключения о соответствии подлинности предложенного образца. При несоответствии образца сырья требованиям ФС необходимо указать, по каким разделам имеется несоответствие.

Задача 1.Проведите анализ предложенного образца сырья по разделам «Внешние признаки»» и «Микроскопия» НД. Оформите протокол анализа.

ПРОТОКОЛ АНАЛИЗА

На анализ поступило цельное лекарственное растительное сырье (русское, латинское названия)_____

Производящее(ие) растение (я) (русское, латинское названия)________________________

_____________

Семейство (русское, латинское названия)__________

Качество анализируемого ЛРС регламентирует (название, номер)_____________________

Сырье представляет собой_______________________

Задание 1. Проведите макроскопический анализ сырья и опишите его внешние признаки в виде таблицы:

Диагностический признак	Характеристика признака	Методика определения

Задание 2. Проведите микроскопический анализ сырья.

1. Запишите методику приготовления микропрепарата листа с поверхности: _________

2. Приготовьте микропрепарат листа _________________ с поверхности, изучите его, зарисуйте анатомическое строение и приведите обозначения признаков.

Эпидермис верхней стороны листа	Эпидермис нижней стороны листа
Обозначения:

3. Заполните таблицу распределения диагностических признаков по тканям:

Ткань	Диагностический признак
Эпидермис	Форма клеток
Тип устьичного комплекса
Наличие кутикулы
Трихомы
Мезофилл	Секреторные структуры
Кристаллические включения

4. Сделайте заключение о соответствии лекарственного растительного сырья разделам «Внешние признаки» и «Микроскопия» ФС.

Заключение. Поступившее на анализ сырье ________ ___соответствует (не соответствует) требованиям статьи_____ ГФ ХIII, разделы «Внешние признаки» и «Микроскопия».

Задача 2.Ознакомьтесь с образцами гербария лекарственного растительного сырья мать-и-мачехи обыкновенной, подорожника большого, видов эвкалипта, шалфея лекарственного, мяты перечной, брусники обыкновенной, толокнянки обыкновенной, крапивы двудомной.

«Протокол занятия зачтен» ___________________ «____»________20___г.

(подпись преподавателя)

Справочные материалы

Государственная фармакопея Российской Федерации XIII издания, т. 2

ОФС.1.5.1.0001.15 Лекарственное растительное сырье. Фармацевтические субстанции

растительного происхождения

Требования настоящей общей фармакопейной статьи распространяются на лекарственное растительное сырье и фармацевтические субстанции растительного происхождения.

Основные термины и определения

Лекарственное растительное сырье - свежие или высушенные растения, либо их части, используемые для производства лекарственных средств организациями-производителями лекарственных средств или изготовления лекарственных средства аптечными организациями, ветеринарными аптечными организациями, индивидуальными предпринимателями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность.

Фармацевтическая субстанция растительного происхождения - стандартизованное лекарственное растительное сырье, а также вещество/вещества растительного происхождения и/или их комбинации, продукты первичного и вторичного синтеза растений, в том числе, полученные из культуры растительных клеток, суммы биологически активных веществ растений, продукты, полученные путем экстракции, перегонки, ферментации или другим способом переработки лекарственного растительного сырья, и применяемые для профилактики и лечения заболеваний.

Лекарственный растительный препарат - лекарственный препарат, произведенный или изготовленный из одного вида лекарственного растительного сырья или нескольких видов такого сырья и реализуемый в расфасованном виде во вторичной (потребительской) упаковке.

Лекарственное растительное сырье может быть представлено различными морфологическими группами: трава, листья, цветки, плоды, семена, кора, почки, корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы и другие.

По измельченности лекарственное растительное сырье может быть:

- цельное;

- измельченное;

- порошок.

Различают лекарственное растительное сырье по наличию основных групп биологически активных веществ, используемых для стандартизации лекарственного растительного сырья, например, сырье, содержащее флавоноиды, сердечные гликозиды, алкалоиды, антрацен производные, дубильные вещества и др.

По назначению лекарственное растительное сырье разделяют на сырье:

- используемое для производства лекарственных растительных

препаратов (например, измельченные в пачках цветки, порошок в фильтр- пакетах);

- используемое для изготовления лекарственных растительных

препаратов (например, настоев, отваров).

ПРОИЗВОДСТВО

Лекарственное растительное сырье и фармацевтические субстанции растительного происхождения получают от культивируемых или дико растущих растений. Для обеспечения качества лекарственного растительного сырья и фармацевтических субстанций растительного происхождения необходимо соблюдать соответствующие правила культивирования, заготовки, сушки, измельчения и условий хранения. В лекарственном растительном сырье и фармацевтических субстанциях

растительного происхождения допускается содержание посторонних примесей, как органического (части других неядовитых растений), так и минерального (земля, песок, камешки) происхождения в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Лекарственное растительное сырье и фармацевтические субстанции растительного происхождения, используемые для производства и изготовления лекарственных средств, должны соответствовать требованиям соответствующих фармакопейных статей или нормативной документации.

Для проведения анализа с целью определения соответствия качества лекарственного растительного сырья и фармацевтических субстанций растительного происхождения и получаемых из них лекарственных растительных препаратов требованиям фармакопейной статьи или нормативной документации установлены единые требования к отбору проб (в соответствии с требованиями ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов»).

При изготовлении из лекарственного растительного сырья и фармацевтических субстанций растительного происхождения настоев и отваров определяется коэффициент водопоглощения и расходный коэффициент в соответствии с требованиями ОФС «Определение коэффициента водопоглощения и расходного коэффициента лекарственного растительного сырья».

ПОКАЗАТЕЛИ КАЧЕСТВА И МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ

Подлинность. Лекарственное растительное сырье идентифицируют по макроскопическим (внешним) и микроскопическим (анатомическим) признакам (в соответствии с требованиями ОФС на морфологическую группу сырья и ОФС «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов»), а также определяют наличие в анализируемом лекарственном растительном сырье основных групп биологически активных веществ, подтверждающих его подлинность (в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и растительных препаратах»). Для этого используют методы физико-химического, химического, гистохимического и микрохимического анализа.

Измельченность. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Влажность. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Зола общая. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Зола общая». Не распространяется на культуру растительных клеток.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте». Не распространяется на культуру растительных клеток.

Органическая и минеральная примесь. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах». Не распространяется на культуру растительных клеток.

Зараженность вредителями запасов. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов». Данный показатель оценивается в процессе хранения лекарственного растительного сырья и при его поступлении в переработку.

Тяжелые металлы. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» на стадии технологического процесса.

Микробиологическая чистота. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Содержание биологически активных веществ, обусловливающих фармакологическое действие лекарственного растительного сырья, определяют методом, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Методики, используемые для количественного определения основных групп биологически активных веществ должны быть валидированы.

В зависимости от назначения лекарственного растительного сырья для одного и того же вида лекарственного растительного сырья могут быть приведены нормы содержания одной, двух и более групп биологически активных веществ.

Содержание экстрактивных веществ нормируется фармакопейной статьей или нормативной документацией на лекарственное растительное сырье в случае получения экстракционного препарата из этого вида лекарственного растительного сырья.

В лекарственном растительном сырье проводят количественное определение:

- экстрактивных веществ - в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах»;

- эфирного масла - в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах»;

- жирного масла - в соответствии с требованиями ОФС «Масла жирные растительные»;

- дубильных веществ - в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

- других групп биологически активных веществ в соответствии с требованиями фармакопейных статей или нормативной документации.

Содержание биологически активных веществ, относящихся к ядовитым и сильнодействующим веществам (сердечных гликозидов, алкалоидов и др.), указывают с обозначением двух пределов «не менее» и «не более». В случае завышенного содержания этих групп биологически активных веществ в лекарственном растительном сырье допускается его дальнейшее использование для производства лекарственных препаратов, которое рассчитывается по формуле:

где т - количество лекарственного растительного сырья, необходимое для производства лекарственных растительных препаратов, г;

А - прописанное количество лекарственного растительного сырья, г:

Б - фактическое количество единиц действия в сырье или содержание биологически активных действующих веществ в 1 г сырья в %;

В - стандартное содержание единиц действия в сырье или содержание биологически активных действующих веществ в 1 г сырья в %.

Упаковка, маркировка и транспортирование. Осуществляется в соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных и препаратов ».

Хранение. Осуществляется в соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов». В случае использования дезинфицирующих, дезинсектирующих и других средств при хранении лекарственного растительного сырья, необходимо подтвердить, что они не оказывают влияния на сырье и практически полностью удаляются после обработки.

ОФС. 1.5.1.0003.15 Листья. Folia.

Листьями в фармацевтической практике называют лекарственное растительное сырье, представляющее собой высушенные или свежие листья или отдельные листочки сложного листа. Листья собирают обычно вполне развитые, с черешком или без черешка.

Внешние признаки. Цельное и измельченное сырье. Подготовка объектов к анализу:

- мелкие и кожистые листья исследуют сухими;

- крупные, тонкие листья (как правило, смятые) размягчают во влажной камере или путем погружения на несколько минут в горячую воду;

- свежие листья исследуют без предварительной обработки.

Подготовленные к анализу листья раскладывают на стеклянной пластинке, тщательно расправляя, рассматривают невооруженным глазом, с помощью лупы (10х) или стереомикроскопа (8*, 16*, 24* и др.). Обращают внимание на следующие анатомо-диагностические признаки:

1. Строение (простое, сложное - непарноперистосложное, парноперисгосложное, дваждыпарноперистосложное, дваждынепарно- перистосложное, пальчатосложное, тройчатосложное и др.) и размеры листовой пластинки.

2. Форму листовой пластинки( округлая, эллиптическая, широкоэллиптическая, узкоэллиптическая, продолговатая, яйцевидная, широкояйцевидная, узкояйцевидная, обратнояйцевидная, округлообратно­яйцевидная, широкообратнояйцевидная, ланцетная, сердцевидная, стреловидная, копьевидная, серповидная, игольчатая и др.).

3. Глубину рассечения листовой пластинки (пальчатолопастные, перистолопастные, тройчатолопастные, пальчатораздельные, перисто­раздельные, тройчатораздельные, пальчаторассеченные, перисто- рассеченные, тройчаторассеченные).

4. Характер основании (округлое, широкоокруглое, узкоокруглое, клиновидное, узкоклиновидное, ширококлиновидное, усеченное, выемчатое, сердцевидное и др.) и верхушки ( острая, округлая, туповатая, выемчатая, оттянутая и др.) листовой пластинки.

5. Характер края листа (цельный, пильчатый, двоякопильчатый, зубчатый, городчатый, выемчатый).

6. Наличие черешка, его размеры.

7. Характер поверхности черешка ( гладкая, ребристая, бороздчатая и др.).

8. Наличие влагалища, прилистников (свободные, сросшиеся), характеристика, размеры.

9. Опушение листа и черешка (обилие и расположение волосков).

10. Жилкование листа ( у однодольных - параллельное, дуговидное; у двудольных - перистое, пальчатое; у папоротников и примитивных семенных растений (гингко) - дихотомическое).

11. Наличие эфирномасличных железок и других образований на поверхности листа или наличие вместилищ в мезофилле.

Размеры определяют с помощью измерительной линейки или миллиметровой бумаги. Измеряют длину и ширину пластинки листа, длину и диаметр черешка.

Цвет определяют с обеих сторон листа на сухом материале при дневном свете.

Запах определяют при растирании.

Вкус определяют, пробуя сухое сырье или водное извлечение листьев (только у неядовитых объектов).

Для измельченных листьев определяют измельченность - размер отверстий сита, через которое проходит смесь частиц.

Порошок. Рассматривают невооруженным глазом, с помощью лупы (10х) или стереомикроскопа (8^*, 16*, 24* и др.). Отмечают цвет смеси частиц (общей массы и отдельных вкраплений), форму частиц, происхождение частиц и их характер (если определяется). При рассмотрении под лупой или стереомикроскопом обращают внимание на опушенность фрагментов, характер поверхности (гладкая, шероховатая, покрытая железками и др.). Определяют запах и вкус (аналогично цельным и измельченным листьям). Определяют измельченность (размер отверстий сита, через которое проходит смесь частиц).

Микроскопия. Цельные и измельченные листья. Готовят микропрепараты в соответствии с ОФС «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов» из цельных листьев или кусочков пластинки листа с краем и жилкой, кусочков листа от основания и верхушки, кусочков черешка (если лист имеет черешок), рассматривая их с поверхности. При анализе толстых и кожистых листьев (эвкалипт, толокнянка, брусника) готовят поперечные срезы и «давленые» микропрепараты. При необходимости также готовят поперечные срезы черешков.

Обращают внимание на следующие анатомо-диагностические признаки:

1. Характер кутикулы верхнего и нижнего эпидермиса (ровная; морщинистая, в том числе продольно-морщинистая, поперечно­-морщинистая, лучисто-морщинистая; штриховатая; гребневидная и др.).

2. Форма клеток верхнего и нижнего эпидермиса (изодиаметрическая - округлая, квадратная, многоугольная; полигональная - прямоугольная, овальная, ромбовидная, веретено видная, комбинированная и др.); извилистость стенок клеток верхнего и нижнего эпидермиса (прямые, извилистые, волнистые, зигзагообразные, зубчатые и др.), степень извилистости; утолщенность стенок клеток верхнего и нижнего эпидермиса (равномерная, четковидная).

3. Наличие устьиц, их форма (круглая, овальная), размеры, частота встречаемости на верхнем и нижнем эпидермисе.

4. Тип устьичного аппарата:

- аномоцитный тип (беспорядочноклеточный) — аномоцитный (или ранункулоидный) — устьица окружены неопределенным числом клеток, не отличающихся по форме и размерам от остальных клеток эпидермиса;

- диацитный тип (двуклеточный) - устьица окружены двумя околоустьичными клетками, смежные стенки которых перпендикулярны устьичной щели;

- парацитный тип (параллельноклеточный) — с каждой стороны устьица, вдоль его продольной оси расположены по одной или более околоустьичных клеток;

- анизоцитный тип (неравноклеточный) - устьица окружены тремя околоустьичными клетками, из которых одна значительно меньше двух других;

- тетрацитный тип - устьице окружено 4 симметрично расположенными околоустьичными клетками: две клетки параллельны устьичной щели, а две другие примыкают к полюсам замыкающих клеток;

- гексацитный тип - устьице окружено 6 околоустьичными клетками: две пары расположены симметрично вдоль замыкающих клеток, а две клетки занимают полярные положения;

- энциклоцитный тип - побочные клетки образуют узкое кольцо вокруг замыкающих клеток;

- актиноцитный тип - характеризуется несколькими побочными клетками, радиально расходящимися от замыкающих клеток.

5. Наличие водяных устьиц (отличаются крупным размером и расположены обычно на верхушке листа или зубчика, над гидатодой).

6. Погруженность устьиц в эпидермис (выступающие над эпидермисом, погруженные в эпидермис).

7. Наличие и строение волосков на верхнем и нижнем эпидермисе (простые и головчатые, одно- и многоклеточные, одно-, дву- и многорядные, пучковые, разветвленные и неразветвленные), их размеры, особенности мест их присоединения (наличие розетки), утолщенность стенок (толстые, тонкие стенки), характер кутикулы (ровная, бородавчатая, ш гриховатая).

8. Наличие железок на верхнем и нижнем эпидермисе, их строение, размеры.

9. Наличие секреторных каналов, млечников, вместилищ (в паренхиме под эпидермисом).

10. Наличие и строение кристаллических включений (одиночные кристаллы различной формы, друзы, рафиды, стилоиды, цистолиты, кристаллический песок и др.), их локализация (в паренхиме под эпидермисом, в паренхиме в виде кристаллоносной обкладки вокруг проводящих пучков и групп волокон, редко в клетках эпидермиса),

11. Наличие включений запасных питательных веществ: слизи, инулина и др. (в паренхиме под эпидермисом, реже в клетках эпидермиса).

12. Структура мезофилла (форма клеток, однородность, расположение, наличие аэренхимы).

13. Строение листа (дорсовентральный, изолатеральный).

14. Строение проводящей системы листа (форма главной жилки; количество, форма, расположение проводящих пучков в жилке; структура проводящих пучков - расположение флоэмы и ксилемы, наличие механических тканей).

15. Наличие механической ткани (колленхима, склеренхимные волокна, каменистые клетки, лубяные волокна и др.).

16. Строение черешка: на поперечном срезе черешка листа указывают его форму в средней, базальной и апикальной части (округлая, треугольная, желобчатая, серповидная, слегка крыловидная, широко­крылатая), число и расположение проводящих лучков, наличие механической ткани (колленхимы, склеренхимы).

Порошок. Готовят микропрепараты порошка листьев в соответствии с ОФС «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов». В микропрепаратах порошка рассматривают фрагменты листьев с главной и второстепенными жилками, фрагменты листьев с краем листовой пластинки, фрагменты верхушки листа, фрагменты в поперечном сечении, фрагменты черешка. В изучаемых частицах порошка отмечают все проявляющиеся анатомо-диагностические признаки, перечисленные для цельных и измельченных листьев. Обращают внимание на то, что ряд элементов (волоски, железки, кристаллы, друзы и пр.) может быть отделен от частиц листа; в порошке наблюдается много фрагментов тканей и отдельных элементов: волоски и их фрагменты, железки, отдельные кристаллы оксалата кальция и фрагменты кристаллоносной обкладки, механические клетки - волокна, склереиды, фрагменты секреторных каналов, вместилищ, млечников и др.

В порошке с размером частиц свыше 0,5 мм в рассматриваемых фрагментах можно различить практически все признаки, характерные для цельного и измельченного сырья. Некоторые элементы эпидермиса могут быть в виде обломков волосков, железок и др.; из-за разрушения клеток могут встречаться отдельные кристаллы, друзы и др.

Еще более затруднено выделение анатомо-диагностических признаков в порошке лекарственного растительного сырья с размером частиц менее 0,5 мм. Здесь также могут быть фрагменты различных участков эпидермиса листа, однако по возможности больше внимания следует уделить единичным элементам: отдельным волоскам, железкам, кристаллам, особенностям клеток и пр.

В порошке лекарственного растительного сырья с размером частиц менее 0,5 мм обращают внимание на особенности строения клеток и наличие единичных элементов эпидермиса и мезофилла листа - отдельных волосков, железок, их фрагментов, кристаллов и др.

Описание основных диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом.

Люминесцентная микроскопия. Рассматривают сухой порошок, реже поперечный срез листа, приготовленный из цельного или измельченного сырья после предварительного размягчения во влажной камере. Наблюдается собственная (первичная) флуоресценция сырья в ультрафиолетовом свете. Наиболее яркое свечение имеют кутикула, клеточные оболочки механических тканей, элементов ксилемы, волосков, содержимое отдельных клеток или тканей мезофилла, эпидермиса листа в зависимости от их химического состава. Листья некоторых растений характеризуются ярким и специфическим свечением содержимого железок, секреторных каналов и вместилищ в зависимости от химического состава содержимого.

Качественные микрохимические и гистохимические реакции

проводят в микропрепаратах листьев (на поперечных срезах, препаратах с поверхности, в порошке), чаще всего с целью обнаружения толстой кутикулы, эфирного масла (может быть представлено в виде капель или заключено во вместилища и/или канальцы), а также слизей в соответствии с требованиями ОФС «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Качественные реакции проводят с извлечением из листьев но методикам, приведенным в фармакопейных статьях или нормативной документации.

Хроматографии. Проводят анализ извлечений с помощью различных хроматографических методик с использованием стандартных образцов. Чаще всего хроматографически в извлечениях из листьев определяют компоненты эфирных масел, флавоноиды и др.

Спектр (УФ-спектр). Анализ проводят в извлечении из листьев при наличии соответствующих указаний в фармакопейной статье или нормативной документации. Допускается ссылка на раздел «Количественное определение». Приводится описание условий регистрации спектра с указанием длин волн, при которых должны наблюдаться максимум(ы) и минимум(ы) поглощения.

В цельном, измельченном сырье и порошке определяют:

- содержание действующих веществ, биологическую активность, методы определения которых указаны в соответствующих фармакопейных статьях или нормативной документации;

- возможно определение экстрактивных веществ в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах»;

- влажность в соответствии с требованиями ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов»;

-содержание золы общей и золы, нерастворимой в

хлористоводородной кислоте, в соответствии с требованиями ОФС «Зола общая» и ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»;

- измельченность и содержание примесей в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельченности и

содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах ».

Масса содержимого упаковки должна соответствовать требованиям ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Зараженность вредителями запасов. Определение проводят в соответствии с ОФС

«Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».