Агглютинирующие сыворотки шигелл Флекснера, Зонне и др., состав, назначение
Содержание: агглютинирующие антитела к антигенам шигелл.
Получение: путем иммунизации кроликов определенными видами и сероварами шигелл дизентерии Флекснера, Зонне, Бойда.
Применение: для диагностики в бактериологическом методе: постановке реакции агглютинации.
Семейство энтеробактерий. Таксономия. Общая характеристика. Морфология, культуральные, биохимические свойства. Антигенная структура.
Семейство – Еnterobacteriaceae
Роды – Proteus Providencia Klebsiella Enterobacter Escherichia Shigella Salmonella
Морфология: грамотрицательные палочки, спор не образуют ( искл. Shigella и Klebsiella), подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиков, некоторые образуют капсулу.
Культуральные: растут на простых питательных средах, при 37 С, факультативные анаэробы
Биохимические: оксидазоотрицательные, обладают нитратредуктазой, ферментируют глюкозу с образование кислоты, некоторые с образованием газа, роды различаются по способности ферментировать лактозу, продуцировать сероводород, индол, расщеплять мочевину и т.д.
Антигенные: обладают соматическим О-антигеном, могут иметь жгутиковый Н-антиген, поверхностный К-антиген.
Микробиологическая диагностика сальмонеллезов.
Проводится бактериологическим и серологическим методом.
Бактериологический метод:
Материал для исследования: испражнения, рвотные массы, промывные воды, желчь, костные мозг, кровь, продукт питания
1. Посев в чашки с висмут-сульфитным агаром и в среды накопления (магниевая, селенитовая), из которых через 6-10 часов делают пересев на висмут-сульфитный агар. Инкубация 37С 24 ч
2. Макро- и микроскопическое изучение. Отбирают колонии черного цвета и пересевают на полиуглеводную среду Олькеницкого. Инкубация 37С 24 ч
3. Макро- и микроскопическое исследование. Пересев на «пестрый» ряд и проведение РА.
4. Учет изменений на «пестром» ряде. Не ферментируют лактозу и сахарозу, расщепляют глюкозу, манит и мальтозу с образованием кислоты и газа, не образуют индол и сероводород
Серологический метод: РНГА с сальмонеллезными поливалентными и групповыми диагностикумами
Брюшнотифозный ОН-диагностикум, получение, назначение.
Брюшнотифозный ОН – диагностикум взвесь бактерий S. Typhi, убитых обработкой формалином. Применяется для серодиагностики брюшного тифа в развернутой реакции агглютинации (РА) Видаля. Реакция основана на обнаружении в сыворотке крови больных людей антител-агглютининов, которые появляются в конце 1-й – начале 2-й недели заболевания. Позволяет оценивать динамику нарастания и длительность сохранения антител. Диагностическим титром реакции Видаля считается разведение сыворотки больного не ниже 1:200.
Сальмонеллы. Особенности антигенной структуры по Кауфману-Уайту. Патогенность для человека и животных.
Сальмонеллы обладают соматическим О-антигеном, жгутиковым Н-антигеном, некоторые К-антигеном. Дифференциация внутри рода проводится по антигенной структуре.
В основе классификации Кауфмана-Уайта лежит подразделение сальмонелл на серологические группы по общности строения О-антигена и внутри серогруппы – на серовары в соответствии со строением Н-антигена.
О-антиген состоит из R-ядра и боковой S-цепи. К s-цепи присоединяются сахара, которые называются рецепторами и обозначаются цифрами.
H-антиген является двухфазным. Его синтез кодируется двумя независимыми генами, работа одного из которых исключает работу другого. Поэтому в каждой клетке может быть синтезирована только одна фаза. Первая фаза обозначается буквами и считается специфической, вторая – цифрами, неспецифическая.
в таблице Кауфмана-Уайта серогруппы обозначаются цифрами согласно номеру группового рецепторов. А-2, В-4, С1-С4 – 6,7, D1 – 9. Внутри серогруппы серовары расположены в алфавитном порядке.
Сальмонеллы являются возбудителями брюшного тифа и паратифа, а также вызывают сальмонеллез
Микробиологическая диагностика дизентерии. Серодиагностика.
РНГА с эритроцитарными шигеллезными диагностикумами
Материал: сыворотка крови
Компоненты: ИХН, сыворотка больного, эритроцитарный диагностикум
Реакцию ставят в планшетах. Вносят в лунки по 1 капле ИХН, разводят сыворотку, добавляют одинаковое количество эритроцитарного диагностикума. В контроль сыворотки добавляют только ИХН и сыворотку, в контроль диагностикума – ИХН и диагностикум. Помещают в термостат на 18-24 ч при 37С. Проводят макроскопический учет – положительный результат – зонтик – рыхлый садок их склеившихся эритроцитов на дне и боковых поверхностях лунок. Отрицательный – пуговка – плотный осадок их эритроцитов на дне.
Агглютинирующие ОВ коли-сыворотки поливалентные. Получение. Назначение.
Содержание: агглютинирующие антитела к О- и В-антигенам кишечной палочки.
Получение: гипериммунизация кролика О- и В-антигенами кишечной палочки.
Применение: для диагностики в бактериологическом методе, постановка реакции агглютинации- для идентификации энтеропатогенных эшерихий.