Раздел: « общая вирусология »
Занятие 14. Дата _______. Тема: «Структура и биология вирусов. Методы микробиологической диагностики вирусных инфекций. Методы культивирования и индикации вирусов»
Схема 6. Виды культур тканей
ВИДЫ КУЛЬТУР ТКАНЕЙ
 |  |
А. Культуры переживающих Б. Культуры растущих тканей
кусочков (эксплантантов) тканей
1. культуры 2. однослойные 3. суспензионные
фиксированных культуры клеток культуры тканей клеток
а)первично-трипсинизированные в)перевиваемые культуры
б)полуперевиваемые культуры
Таблица 36. Реакция гемагглютинации (РГА) для индикации вируса в аллантоисной жидкости куриного эмбриона
| Ингредиенты | Разведения вируссодержащего материала | Контроль эритроцитов | ||||
| 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 | 1:32 | ||
| Изотонич. р-р хлорида натрия, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Аллантоисная жидкость (вируссодержащий материал), мл | 0,5 | à | à | à | à вылить в дез. р-р | -- |
| 1% суспензия эритроцитов, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Перемешать, инкубировать при комнатной температуре в течение 30- 60 мин. | ||||||
| Результаты: | ||||||
| ВЫВОДЫ: РГА положительная/отрицательная. В аллантоисной жидкости обнаружен/не обнаружен вирус, обладающий гемагглютинирующей способностью. Титр вируса ______. |
Культура клеток Культура клеток ЦПД полиовирусов
куриных фибробластов типа HeLa (гибель и деструкция монослоя)
 |  | |
_______ЦПД вирусов _ЦПД вирусов__ Реакция_____
цитоплазматические включения внутриядерные включения гемадсорбции
 |  |  |
Занятие 15. Дата _______. Тема: «Методы диагностики вирусных инфекций. Идентификация вирусов. Применение серологических реакций для диагностики вирусных инфекций»
Таблица 37. РСК с иммунной и нормальной сыворотками
| Результаты: | Разведения сыворотки | Контроли | |||||||
| 1:20 | 1:40 | 1:80 | 1:160 | 1:320 | 1:640 | эритр. | комплемента | гемолит. системы | |
| Иммунная сыворотка | |||||||||
| Нормальная сыворотка | |||||||||
| ВЫВОДЫ: РСК положительная с иммунной / нормальной сывороткой. Титр антител в _____________________ сыворотке _________. |
Условные обозначения: «+» - наличие гемолиза (РСК «-«),
«-» - отсутствие гемолиза (РСК «+«).
Таблица 38. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) с иммунной и нормальной сыворотками
| Номера пробирок | Контроли | ||||||||
| Разведения сыворотки | 1:20 | 1:40 | 1:80 | 1:160 | 1:320 | 1:640 | сыво-ротки | вируса | эритро-цитов |
| Ингредиенты: | |||||||||
| Изотонич. р-р хлорида натрия, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 1,0 |
| Исследуемая сыворотка 1:10, мл | 0,5à | 0,5 à | 0,5 à | 0,5 à | 0,5 à | 0,5 вылить | 0,5 | --- | --- |
| Вирусный диагностикум, 4 AЕ, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | --- | 0,5 | --- |
| 1% суспензия эритроцитов, мл | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Результаты: | |||||||||
| Иммунная сыворотка | |||||||||
| Нормальная сыворотка | |||||||||
| ВЫВОДЫ: РТГА положительная с иммунной / нормальной сывороткой. Титр антител в _____________________ сыворотке _________. |
Условные обозначения: «+» - наличие гемагглютинации (РТГА «-«),
«-» - отсутствие гемагглютинации (РТГА «+«).
Рисунок 12. Реакция биологической нейтрализации (РБН) в культуре клеток для идентификации вируса
 | | | | | |
| неизв. вирус + cыворотка X | неизв. вирус + cыворотка Y | Контроли: | |||
| культ. клеток | вируса | cыворотки X | cыворотки Y |
ВЫВОДЫ:
Рисунок 13. Реакция биологической нейтрализации (РБН) в культуре клеток с парными сыворотками
| Первая сыворотка | Вторая сыворотка | Контроли | |||||||||||
 | | | | | | | | | | | | | |
| 1:50 | 1:100 | 1:200 | 1:400 | 1:800 | 1:50 | 1:100 | 1:200 | 1:400 | 1:800 | культ. клеток | вируса | первой сыв. | второй сыв. |
ВЫВОДЫ:
ОГЛАВЛЕНИЕ
ПРЕДИСЛОВИЕ. 3
ПРАВИЛА РАБОТЫ В МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ.. 5
Курс "ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ"