Исследование процесса агрегации форменных элементов крови

Агрегация форменных элементов крови (преимущественно эритроцитов) — один из важнейших патологических феноменов, возникающих в системе микроциркуляции. Это и обусловливает важность его количественного описания. Существует несколько способов оценки агрегации эритроцитов.

1. Метод, основанный на прижизненной биомикроскопии. Недостатками метода явля­
ются: субъективность в оценке степени агрегации, трудоемкость, необходимость микроско-
пирования. Достоинством оценки агрегации эритроцитов путем прижизненной биомикро­
скопии является возможность с абсолютной достоверностью установить фактическое нали­
чие агрегации или дезагрегации.

2. Реоскопия — по существу является ротационной или капиллярной (капилляр с
внутренним сечением в виде щели) реометрией с той лишь особенностью, что рабочие
части прибора прозрачны. Это позволяет исследовать процесс агрегации и дезагрегации в

Рис. 10.20. Внешний вид агрегатограммы и определение индекса агрегации методом силлектометрии (объяснение в тексте).

зависимости от скорости деформации [Goldstone J. et al., 1970]. Использование реоскопии позволяет охарактеризовать агрегацию эритроцитов в отношении размеров и формы агре­гатов. Реоскопические исследования осуществляются со взвесями эритроцитов и с цельной кровью.

3. Метод оценки агрегации эритроцитов по скорости их оседания наиболее прост, но и
наименее надежен. Между тем увеличенная СОЭ в подавляющем большинстве случаев сви­
детельствует о наличии феномена агрегации [Левтов В.А. и др., 1982].

4. Расчетный метод определения степени агрегации по L. Dintenfass (1962): его суть со­
стоит в вычислении отношения объема свободно осевших форменных элементов (при пол­
ном их осаждении) к объему форменных элементов, осажденных принудительно (центрифу­
гированием). К расчетным методам можно отнести также оценку феномена агрегации фор­
менных элементов крови по кривым течения или вязкости.

5. Фильтрационные методы оценки агрегации по существу аналогичны фильтрацион­
ным методикам определения деформируемости эритроцитов.

6. Фотометрический метод количественного определения агрегации эритроцитов. Суще­
ствует по меньшей мере два варианта его. Первый заключается в регистрации изменения оп­
тической плотности взвеси отмытых эритроцитов (100 000 ± 20 000 эритроцитов в 1 мкл) под
влиянием вещества, вызывающего агрегацию, — индуктора агрегации. В качестве индуктора
используется, например, краситель алциановый голубой, который, по мнению O'Brien
(1971), уменьшает заряд эритроцитов и тем самым облегчает образование конгломератов
клеток. Изменения оптической плотности исследуемой суспензии эритроцитов регистриру­
ют по времени графически. Критерием оценки степени агрегации служит скорость измене­
ния оптического сигнала. Недостатком метода является длительная подготовка проб, в про­
цессе которой нарушаются существующие в цельной крови межэритроцитарные взаимодей­
ствия. По-видимому, используя этот метод, можно достоверно судить лишь о способности
суспензии эритроцитов в буферном растворе с рН 7,4 изменять оптическую плотность под
влиянием конкретного индуктора агрегации.

Вторым вариантом фотометрического метода является так называемая силлектометрия. В основу метода положена графическая регистрация уменьшения интенсивности света, рас­сеиваемого кровью после прекращения перемешивания исследуемого образца. Заслуга теоретической разработки этого метода принадлежит отечественным исследователям, разра­ботки которых в этом направлении обобщены в монографии «Реология крови» [Левтов В.А. и др., 1982].

В качестве основного критерия для оценки агрегации эритроцитов используется индекс агрегации, рассчитываемый как единица, деленная на время, в течение которого амплитуда агрегатограммы уменьшается вдвое (рис. 10.20). При усилении процесса агрегации эритро­цитов скорость изменения оптического сигнала возрастает и коэффициент агрегации увели­чивается. Соответственно уменьшается площадь под агрегатограммой. При нанесении дан­ных агрегатометрии на логарифмическую бумагу получается прямая линия. Тангенс угла на-

клона этой прямой к оси времени также может быть использован в качестве показателя агре­гации эритроцитов.

Сопоставление данных, полученных силлектометрическим методом и методом витальной микроскопии, показывает качественное совпадение результатов.