Посев и результаты эксперимента №2
С взятых проб делалось 6 разведений.
№1 – проба с кожи клариевого сома;
№2 – проба воды из аквариума клариевых сомов;
№3 – проба с кожи сома батракуса;
№4 – проба воды из аквариума батракусов.
Во втором эксперименте посев совершался на МПА, среду Кесслера и среду Сабуро. При посеве проб с сомов на МПА и Сабуро брались с первого по четвёртое разведения; при посеве проб воды – с третьего по шестое разведения. На среду Кесслера сеяли первые три разведения проб с сомов и первые воды. Со среды Кесслера (где был отмечен положительный результат) был пересев на среду Эндо.
Таблица 1. Результаты посева на среду Кесслера.
| Разведение и кол-во инокулята | Селективное обогащение. С. Кесслера | Потверждение С. Кесслера/Мак-Конки | Потверждение | Результат | ||
| 24 ч. | 48 ч. | 24 ч. | 48 ч. | С. Эндо | ||
| 1 мл 4-1 | Газ +, муть +/газ +, муть + | Газ +, муть +/газ +, муть + | - | - | К. с золотистым м.б., ореол - | |
| 1 мл 3-3 | Газ -, муть -/газ -, муть - | Газ -, муть -/газ -, муть - | - | - | - | |
| 1 мл 3-2 | Газ -, муть -/газ -, муть - | Газ -, муть +/ газ +, муть + | - | - | Ползучие мал. к., ореол + (мал.)/ роз. к., ореол + (мал.) | |
| 1 мл 3-1 | Газ +, муть + | Газ +, муть + | - | - | Ползучие мал. к., м.б. +, ореол -/ св. роз. к., м.б. +, ореол + (св. роз.) | |
| 1 мл 2-2 | Газ +, муть + | Газ +, муть + | - | - | Ползучие мал. к., м.б. +, ореол -/ мал. к. м.б. +, ореол - | |
| 1 мл 2-1 | Газ +, муть +/ газ +, муть + | Газ +, муть +/ газ +, муть + | - | - | Мал. к. м.б. +, ореол -/ мал. к. м.б. +, ореол - | |
| 1 мл 1-3 | Газ -, муть -/ газ -, муть - | Газ -, муть -/ газ -, муть - | - | - | - | |
| 1 мл 1-2 | Газ -, муть -/ газ -, муть - | Газ -, муть +/ газ - , муть + | - | - | Мал. к., м.б. -, ореол + (роз.)/ мал. к., м.б. -, ореол + (роз.) | |
| 1 мл 1-1 | Газ +, муть +/ газ -, муть + | Газ +, муть +/ газ +, муть + | - | - | Ползучие мал. к., м.б. +, ореол -/ ползучие мал. к., м.б. +, ореол - |
Таблица 2. Результаты посева на МПА
| Кол-во инокулята и номер пробы | Выявление МПА (72 часа) | Результат | |||||
| Разведение | КОЕ | Разведение | КОЕ | Разведение | КОЕ | ||
| 1 мл №1 | - | 131/175 | 40/37 | ||||
| 1 мл №2 | 103/118 | 73/62 | 19/4 | ||||
| 1 мл №3 | 160/174 | 78/64 | -/7 | ||||
| 1 мл №4 | 65/66 | 10/15 | -/- |
Остальные разведения не поддаются учёту (количество КОЕ > 300)
Посев на среду Сабуро не дал точных результатов из-за неправильных методик обработки инструментов и приготовления среды.
Посев и результаты эксперимента №3
В третьем эксперименте пробы отбирались тем же методом, как и в двух предыдущих. Посев совершался на среду Кесслера (пересев на Эндо), МПА, а так же пробы вносились в планшетку Food System (пересев на ряд селективных сред).
Таблица 3. Результаты посева на среду Кесслера
| Разведение и кол-во инокулята | Селективное обогащение. С. Кесслера/Мак-Конки | Потверждение С. Кесслера/Мак-Конки | Потверждение | Результат | ||
| 24 ч. | 48 ч. | 24 ч. | 48 ч. | С. Эндо | ||
| 1 мл 1-1 | Газ +, муть +/газ +, муть + | Газ +, муть +/газ +, муть + | - | - | Ползучие мал. к., м.б. -, ореол + (мал.)/ ползучие мал. к., м.б. -, ореол + (мал.) | |
| 1 мл 1-2 | Газ -, муть +/газ -, муть + | Газ -, муть -/газ -, муть - | - | - | Ползучие мал. к., м.б. -, ореол + (мал.)/ ползучие мал. к., м.б. -, ореол + (мал.) | |
| 1 мл 3-1 | БГКП + | БГКП + | - | - | ||
| 1 мл 3-2 | БГКП + | БГКП + | - | - | ||
| 1 мл 2-1 | Газ +, муть +/ газ +, муть + | Газ +, муть +/ газ +, муть + | - | - | Ползучие мал. к., м.б. -, ореол -/ ползучие мал. к., м.б. -, ореол - | |
| 1 мл 2-2 | Газ +, муть +/ газ +, муть + | Газ +, муть +/ газ +, муть + | - | - | Ползучие мал. к., м.б. -, ореол -/ ползучие мал. к., м.б. -, ореол - | |
| 1 мл 2-3 | Газ -, муть -/ газ -, муть - | Газ +, муть +/ газ -, муть + | - | - | Мал. к., м.б. +, ореол + (мал.)/ мал. к., м.б. -, ореол - | |
| 1 мл 2-4 | Газ -, муть -/ газ -, муть - | Газ -, муть -/ газ - , муть + | - | - | - | |
| 1 мл 2-5 | Газ -, муть -/ газ -, муть - | Газ -, муть -/ газ -, муть - | - | - | - | |
| 1 мл 4-1 | Газ +, муть +/ газ +, муть + | Газ +, муть +/ газ +, муть + | - | - | Ползучие мал. к., м.б. +, ореол + (мал.)/ ползучие мал. к., м.б. -, ореол + (мал.) | |
| 1 мл 4-2 | Газ +, муть +/ газ +, муть + | Газ +, муть +/ газ +, муть + | - | - | Ползучие мал. к., м.б. +, ореол + (мал.)/ ползучие мал. к., м.б. -, ореол + (мал.) | |
| 1 мл 4-3 | Газ -, муть -/ газ -, муть - | Газ -, муть -/ газ -, муть - | - | - | - | |
| 1 мл 4-4 | Газ -, муть -/ газ -, муть - | Газ -, муть -/ газ -, муть - | - | - | - |
Биохимические реакции для идентификации
1-LDС Декарбоксилирование лизина
2-H2 S продукция H2 S
3-UR гидролиз мочевины
Предварительная идентификация микроорганизмов
4-PRO Proteus/Providencia spp.
5-PSE Pseudomonas spp.
6-STA Staphylococcus aureus
7-ESC Escherichia coli
8-IND Индольный тест для подтверждения Escherichia coli
9-BCE Bacillus cereus
10-LIS Listeria spp.
11-CAT Каталазный тест для подтверждения Listeria spp.
12- Y/M Дрожжи и плесени
Таблица 4. Результаты проверки на тест-системе Food System, проба 1-2
| Реагент | Результат |
| LDC | - |
| H2S | + |
| UR | + |
| PRO | - |
| PSE | + |
| STA | - |
| ESC | - |
| Индол | + |
| BCE | + |
| Lis. | - |
| CAT | + |
| Y/M | + |
Таблица 5. Результаты проверки на тест-системе Food System, проба 3-2
| Реагент | Результат |
| 1. LDC | + |
| 2. H2S | + |
| 3. UR | - |
| 4. PRO | - |
| 5. PSE | + |
| 6. STA | + |
| 7. ESC | - |
| 8. Индол | - |
| 9. BCE | + |
| 10. Lis. | - |
| 11. CAT | + |
| 12. Y/M | - |
Далее содержимое лунок пересевалось на селективные среды:
1 – на среду Рамбаха (выявление бактерий рода Salmonella);
4 – CLED (выявление бактерий рода Proteus);
5 – цетримидный агар (выявление бактерий рода Pseudomonas);
9 – MYP (выявление бактерий рода Bacillus);
6 – №10, BP (выявление бактерий рода Staphylococcus aureus);
12 – Сабуро (обнаружение грибов и плесеней);
7 – Эндо (выявление БГКП);
6 – ЭКА (выявление бактерий рода Staphylococcus aureus).
Таблица 6. Результаты посева на МПА
| Кол-во инокулята и номер пробы | Выявление МПА (72 часа) | Результат | |||||
| Разведение | КОЕ | Разведение | КОЕ | Разведение | КОЕ | ||
| 1 мл №1 | 97/90 | 17/15 | - | - | |||
| 1 мл №2 | 18/- | 51/55 | - | - | |||
| 1 мл №3 | 204/103 | 40/41 | - | - | |||
| 1 мл №4 | 118/102 | - | - | - | - |
Остальные разведения не поддаются учёту.
Результаты роста на различных селективных средах
Среда Рамбаха: рост 1-2, 3-2 (глянцевые зелёные и пурпурно-зелёные колонии);
CLED: рост 1-2, 3-2, 4-2 (жёлтые глянцевые колонии);
MYP: рост 1-2, 3-2, 4-2 (светло-жёлтые глянцевые колонии);
BP: рост 1-2, 3-2 (глянцевые коричневые колонии с ореолом и без);
№10: рост 1-2, 3-2 (жёлтые глянцевые колонии с ореолом);
Цетримидный агар: рост 3-2 (белые глянцевые колонии);
ЭКА: рост 1-2, 3-2, 2-2 (мелкие белые колонии с чёрным ореолом);
Эндо: рост 1-2.
Заключение
Исследования были проведены в микробиологической лаборатории; принципы работы были изучены на практике. Были изучены антибиотические свойства кожной слизи рыб, и по результатам вышеприведённых исследований можно с некоторой вероятностью утверждать, что на коже сомов обоих видов не обитают бактерии рода Salmonella. Также можно сказать, что в слизи встречаются бактерии рода Citrobacter. Кроме того, в воде из аквариумов встречаются плесени (идентифицировать не удалось), которых при нормальных условиях содержания не бывает на коже рыб. По наблюдениям, при охлаждении воды до почти критических для сомов температуры, плесени так же могут быть и на их коже.
Список литературы
«Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований» под редакцией А.С. Лабинской;
М.С.Поляк, В.И.Сухаревич, М.Э.Сухаревич. «ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ ДЛЯ МЕДИЦИНСКОЙ МИКРОБИОЛОГИИ» Санкт-Петербург, 2002 г.
РЕЦЕНЗИЯ