Классификация и морфология спирохет.
В патологии человека имеют значение спирохеты 4 родов: род Treponema (возбудитель сифилиса – Т. pallidum, возбудитель фрамбезии – Т. pertenue, возбудитель пинты – Т. carateum); род Borrelia (возбудитель эпидемического возвратного тифа – В. recurrentis, возбудители клещевого возвратного тифа – В. persica, В. hispanisa и др.); род Leptospira (возбудитель лептоспироза – L. interrogans) и род Spirillum.
Морфология спирохет. Спирохеты имеют штопорообразную – извитую форму. Они отличаются друг от друга характером и числом завитков, длиной клеток, а также другими морфологическими и физиологическими признаками. Имеют тенденцию к образованию инволюционных форм.
Спирохеты – от латинского spirochaeta – бактерии в виде длинного винта отличаются от других Гр- бактерий своим строением. Тело спирохет состоит из многослойной наружной клеточной оболочки, которая покрывает протоплазматический цилиндр, переплетенный с одной или более осевыми фибриллами , отходящими от субтерминальных прикрепительных дисков, расположенных на обоих концах цилиндра (что сближает их с простейшими). Протоплазматический цилиндр представляет собой цитоплазму, окруженную цитоплазматической мембраной. Вокруг протоплазматического цилиндра, в толще клеточной оболочки, находится двигательный аппарат, представленный периплазматическими жгутиками (фибриллами).
Фибриллы расположены под наружной оболочкой, т.е. между оболочкой и протоплазматическим цилиндром. Один конец каждой фибриллы закреплен вблизи полюса цитоплазматического цилиндра, другой – остается свободным. Из обоих концов клетки выходит одинаковое количество фибрилл. Общее число периплазматических фибрилл на клетку варьирует от 2 до более 100 в зависимости от вида. Периплазматические фибриллы являются двигательным аппаратом спирохет, обеспечивая 3 типа движения в жидкой среде: перемещение, вращение вокруг продольной оси и изгибание.
При действии неблагоприятных факторов, в частности лечебных препаратов, трепонемы могут переходить в L-форму, а также образовывать цисты – свернутые в шар спирохеты, покрытые непроницаемой муциновой оболочкой. Цисты могут длительное время находиться в организме больного, не проявляя патогенности. При благоприятных для них условиях цисты спирохет реверсируют в спиралевидные формы, размножаются и восстанавливают свою патогенность. Цисты являются формами как устойчивого выживания, так и размножения. Помимо цист бледные трепонемы образуют атипичные формы в виде зёрен. Особенно быстро они образуются под влиянием иммунной сыворотки.
Окрашивание спирохет (и простейших) традиционно ведется с применением особых красителей, т.к. обычными методами спирохеты (особенно трепонемы) не окрашиваются – для трепонем время окраски по Р-Г удваивают.
Окраска по Романовскому-Гимзе – (например, боррелии клещевого возвратного тифа). Мазки из исследуемого материала (кровь, гной, тканевая жидкость и др.) высушивают на воздухе, фиксируют метиловым спиртом в течение 3 мин, снова высушивают на воздухе и окрашивают.
Под микроскопом при окраске по Романовскому-Гимзеборрелии имеют вид тонких нитей сине-фиолетового цвета с несколькими большими неравномерными завитками.
Обработку мазков удобно производить в чашках Петри, на дно которых положены две подставки (из предметного стекла, разрезанного вдоль пополам). Препарат кладут мазком вниз на подставки и сбоку подливают разведенный краситель так, чтобы мазок соприкасался с ним. Окраска длится от 30 мин до одного или нескольких часов, после чего мазки промывают водой и высушивают на воздухе.
Краситель Романовского-Гимзы состоит из метиленового синего, эозина и азура, благодаря чему он окрашивает в разные цвета элементы микроорганизма (и форменные элементы крови).
Для обнаружения боррелий в крови также применяют микроскопию тушевых препаратов по Бурри и метод темнопольной микроскопии (изучают препараты толстой капли).
Особенности строения спирохет, видимых при электронной и световой микроскопии.
****Выберете из предыдущего вопроса
Морфология актиномицетов.
Актиномицеты (от греч. octis – луч, mykes – гриб) – ветвящиеся, нитевидные или палочковидные Гр+ бактерии (по Гр окрашиваются плохо).
В пораженных тканях образуют друзы - образования в виде беловатых зерен, состоящие из густо переплетенных гиф. От них отходят радиально к периферии, наподобие лучей, свободные гифы с утолщениями на концах. Мицелий примитивен, в основном лишен поперечных перегородок. Все морфологические формы способны к истинному ветвлению, особенно на п/ж средах.
Размножение актиномицетов осуществляется двумя различными способами. Мицелий проактиномицетов не дифференцирован и, в конце концов, подвергается распаду на палочковидные или сферические фрагменты – деление фрагментацией мицелия. Культуру на этой стадии легко принять за культуру одноклеточных Гр+ бактерий. У истинных актиномицетов (Euactinomycetes) мицелий устойчив, и размножаются они путем образования на воздушном мицелии специализированных спор (экзо- или эндоспоры), служащих для размножения. По Гр споры окрашиваются в тёмно-фиолетовый цвет, мицелий – в фиолетовый цвет, а друзы – в розовый цвет.
Ультраструктура актиномицетов принципиально не отличается от бактерий. Они имеют клеточную стенку, цитоплазматическую мембрану, которая отграничивает цитоплазму, где содержится нуклеоид, рибосомы, внутриклеточные включения. Мезосомы актиномицетов также являются производными цитоплазматической мембраны. Однако в составе пептидогликана некоторых актиномицетов обнаружены арабиноза, галактоза и др., отсутствующие у бактерий сахара.
Подавляющее большинство актиномицетов являются свободноживущими сапрофитными микроорганизмами. Патогенные актиномицеты вызывают актиномикоз – хроническое заболевание, при котором в различных органах и тканях возникают инфильтраты, абсцессы, а при их вскрытии образуются свищи. При актиномикозе чаще всего поражается челюстно-лицевая область. Следует, однако, отметить, что многие высшие актиномицеты образуют разнообразные антибиотики, такие, как стрептомицин (стрептомицеты), тетрациклин, нистатин, левомицетин, олеандомицин, эритромицин, неомицин, мономицин и многие другие.