Опыт 4. Изучение влияния активаторов и ингибиторов на активность ферментов.

Приборы: 1. Штатив с пробирками.

2. Набор пипеток.

3. Водяная баня.

4. Маркер для пробирок.

Реактивы: 1. Крахмал, 1%-ный раствор.

2. Дистиллированная вода.

3. Реактив Люголя.

4. Хлорид натрия, 1%-ный раствор.

5. Сульфат меди, 1%-ный раствор.

1. Пронумеруйте три пробирки.

2. В 1-ю пробирку налейте 1 мл дист. воды, во 2-ю – 1 мл 1%-ного раствора хлористого натрия, в 3-ю – 1 мл 1%-ного раствора сульфата меди.

3. Во все пробирки налейте по 1 мл свежеприготовленного 1%-ного раствора крахмала и по 1 мл разбавленной слюны.

4. Содержимое пробирок инкубируйте 10 минут в водяной бане (37^оС).

5. Затем во все пробирки добавьте по 1 капле реактива Люголя или раствора йода. Наблюдения занесите в таблицу:

№ проб.	Субстрат	Фермент	Добавленное вещество	Условия инкубации	Окраска с йодом

Сделайте вывод о влиянии изученных веществ на активность амилазы.

Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________

Занятие № 5. «Роль витаминов в метаболизме»

Цель занятия:изучить химические свойства некоторых витаминов, лежащих в основе их биологического действия.

Вопросы к контрольной работе:

1. Витамины: классификация и номенклатура. Гипо-, апо- и гипервитаминозы. Причины недостаточности витаминов в организме.

2. Коферменты, образующиеся из витаминов В₁, Н. Механизм действия ферментов карбоксилирования и декарбоксилирования.

3. Коферменты, образующиеся из витаминов В₂, В₅, липоевая кислота и их биохимическая роль. Механизм действия окислительно-восстановительных ферментов (оксидоредуктаз).

4. Коферменты, образующиеся из витаминов В₃, В₁₂, В₆, Вс и их биохимическая роль. Механизм действия ферментов трансфераз.

5. Биохимические функции витаминов А и Е.

6. Биохимические функции витаминов Д и К.

Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________

Экспериментальная работа.

Опыт 1. Качественная реакция на витамин А.

Приборы. 1. Штатив с пробирками.

2. Набор пипеток.

Реактивы. 1. Масляный раствор витамина А.

2. Концентрированная серная кислота.

1. В пробирку налейте 3 капли масляного раствора витамина А.

2. Добавьте 1 каплю концентрированной серной кислоты.

Какими клиническими признаками выражается недостаток витамина А в организме? Как это связано с его биохимическими функциями?

Опыт 2. Обнаружение каротиноидов в моркови.

Приборы. 1. Штатив с пробирками.

2. Набор пипеток.

3. Стеклянная палочка.

Реактивы. 1. Морковь измельченная.

2. Серная кислота концентрированная.

3. Ацетон.

4. Перманганат калия, 2% раствор.

1. Небольшой кусочек моркови измельчите на мелкой терке и поместите полученную массу в пробирку.

2. Добавьте 2-3 мл любого неполярного растворителя (ацетон, гексан) и содержимое перемешайте стеклянной палочкой.

3. Отметьте изменение окраски растворителя.

4. Полученный экстракт желтого цвета перелейте в две пробирки.

5. В первую добавьте 1 каплю 2%-ного раствора перманганата калия, во вторую - 1 каплю концентрированной серной кислоты.

Объясните, почему экстракт моркови имеет желтую окраску? Чем вызвано постепенное обесцвечивание раствора перманганата калия? Получили ли Вы сине-фиолетовое окрашивание экстракта с серной кислотой? Обоснуйте свой ответ.

Опыт 3. Окислительно-востановительные свойства рибофлавина.

Приборы. 1. Штатив с пробирками.

2. Набор пипеток.

Реактивы. 1. Рибофлавин, 0,025% раствор.

2. Соляная кислота концентрированная.

3. Цинк металлический.

1. К 0,5 мл 0,025%-ного раствора рибофлавина добавьте 5 капель концентрированной соляной кислоты и кусочек металлического цинка. Под влиянием выделяющегося водорода окраска раствора постепенно розовеет, затем обесцвечивается.

2. Бесцветный раствор перелейте в другую пробирку и через некоторое время наблюдайте вновь появление желтого окрашивания.

Объясните наблюдаемые явления. Как данные процессы связаны с биохимическими функциями витамина В₂?

Опыт 4. Качественная реакция на пиридоксин.

Приборы. 1. Штатив с пробирками.

2. Набор пипеток.

Реактивы. 1. Пиридоксин, 0,5% раствор.

2. Хлорное железо, 1% раствор.

1. К 0,5 мл 0,5% раствора пиридоксина добавьте 5 капель 1% раствора хлорного железа и перемешайте. Развивается красная окраска.

2. В одну пробирку поместите 1 мл водной вытяжки из серого хлеба, во вторую – 1 мл водной вытяжки из белого хлеба.

3. В обе пробирки добавьте по 1-2 капли 5% раствора хлорного железа. Встряхните.

Запишите результаты эксперимента. В вытяжке какого хлеба содержится больше витамина В₆? Какие биохимические функции выполняет витамин В₆ в организме человека и животных?