Изучение структурно-морфологических особенностей
Трофических включений
В зависимости от природы запасаемого вещества среди трофических включений выделяют жировые (липидные), желточные (желток), а также гранулы гликогена, представляющего собой полимер глюкозы. Включения жира и гликогена клетки используют в качестве энергетических субстратов. Включения желтка запасаются в яйцеклетке и расходуются в процессе развития эмбриона.
Задание
1. Изучите микроскопическую картину включений гликогена в клетках печени. Для этого используют демонстрационный микропрепарат – гистологический срез печени аксолотля, окрашенный по методу Беста. Метод включает предварительное депарафинирование срезов, заключение их в целлоидин, окрашивание ядер в гемалауне, а затем окрашивание включений гликогена аммиачным раствором кармина.
Рассмотрите микропрепарат под микроскопом с объективами 9× и 40×. При слабом увеличении найдите ярко окрашенный участок печени. Найдите при большом увеличении клетки печени. Они имеют прямоугольную и многоугольную форму и соединены в тяжи. В центре находится одно или два ядра, окрашенные в фиолетовый цвет и содержащие черные ядрышки. Вокруг ядер располагаются глыбки гликогена ярко-красного цвета.
Зарисуйте 3 - 4 печеночные клетки с включениями.
Подпись под рисунком: Включения гликогена в клетках печени. Демонстрационный микропрепарат. Окраска: по методу Беста. ×600.
На рисунке должны быть обозначены ядра клеток, цитоплазма и включения.
2. Изучите электронограмму включений гликогена. Они представляют собой скопления электроно-плотных гранул размером 20 - 30 нм, не имеющих ограничивающей мембраны. Скопления по внешнему виду напоминают розетки и нередко расположены вблизи от аЭПС.
Зарисуйте участок цитоплазмы клетки с 2 - 3 скоплениями гликогена.
Подпись под рисунком: Ультраструктура включений гликогена.
На рисунке должны быть обозначены включения гликогега, аЭПС, плазмолемма, часть ядра.
3. Изучите микроскопическую картину включений жира в клетках печени. Для этого используют демонстрационный микропрепарат – гистологический срез печени аксолотля, окрашенный сафранином и осмиевой кислотой.
Рассмотрите микропрепарат с объективами 9× и 40×. При слабом увеличении вы увидите объединенные в тяжи клетки с красными ядрами и черными включениями жира.
При большом увеличении найдите полигональные клетки с центрально или эксцентрично расположенным ядром, окрашенным сафранином в красный цвет. В розовой (осифильной) цитоплазме видны округлые различной величины включения жира, которые осмиевой кислотой окрашены в черно-коричневый цвет.
Зарисуйте 2 - 3 клетки.
Подпись под рисунком: Включения жира в печени. Демонстрационный микропрепарат.
На рисунке должны быть обозначены ядро, цитоплазма, жировые включения, плазмолемма.
Материалы, представляемые в отчет по лабораторной работе
1. Зарисовка микроскопической картины клеток с включениями гликогена и жира.
2. Зарисовка электронограммы включений гликогена.
Лабораторная работа 8.2
Изучение цитологических особенностей
Пигментных включений
Пигментные включения бывают эндогенными и экзогенными. К эндогенным относятся гемоглобин, гемоседерин, билирубин, меланин, липофусцин, к экзогенным – частички пыли, угля; каротин, красители (татуировка).
Задание
Изучите микроскопическую картину пигментных включений. Для этого используют демонстрационный микропрепарат – тотальный препарат кожи головастика, слабо подкрашенный гематоксилином. Рассмотрите микропрепарат с объективами 9× и 40×. При малом увеличении найдите крупную отросчатую клетку. При большом увеличение рассмотрите ее. В центре клетки располагается овальное ядро с одним или несколькими ядрышками фиолетового цвета. В цитоплазме и отростках расположены коричневые гранулы пигмента меланина, которые обуславливают естественный цвет клетки.
Зарисуйте отросчатую клетку.
Подпись под рисунком: Включения меланина в пигментной клетке кожи головастика. Демонстрационный микропрепарат. Окраска: слабая подкраска ядер гематоксилином. ×600.
На рисунке должны быть обозначены ядро клетки, ее отростки и включения пигмента.