Лікувальні і профілактичні імунобіологічні препарати

Заняття

ТЕМА. ЗБУДНИКИ ЗООНОЗНИХ БАКТЕРІАЛЬНИХ ІНФЕКЦІЙ - СИБІРКИ, БРУЦЕЛЬОЗУ.

МЕТА (загальна): уміти провести та оцінити мікробіологічну діагностику зоонозних інфекцій.

Теоретичні питання:

1.Особливо небезпечні інфекції. Режим роботи зі збудниками цих захворювань.

2. Біологічні властивості збудників бруцельозу.

3.Мікробіологічна діагностика бруцельозу.

4.Біологічні властивості збудника сибірки – B.anthracis.

5.Мікробіологічна діагностика сибірки.

6.Специфічна профілактика особливо небезпечних інфекцій.

ПРАКТИЧНА РОБОТА СТУДЕНТІВ

1. Поставити реакцію термокольцеприципітації по Асколі з метою виявлення сибіркового антигену в досліджуваному екстракті.

2. Вивчити демонстраційні препарати та оформити протокол.

1. Прибрати робоче місце та підписати протокол у викладача.

Алгоритм практичної роботи:

Робота 1.Виконайте реакцію у відповідності з наданою схемою. Зверніть увагу на послідовність внесення компонентів реакції в пробірку та особливості внесення екстракту.

Таблиця 1 – СХЕМА ПРОВЕДЕННЯ РЕАКЦІЇ ТЕРМОКОЛЬЦЕПРИЦИПІТАЦІЇ ПО АСКОЛІ

	Дослід	КА	КС
Досліджуваний екстракт	0,5	--	--
Стандартна сибіркова імунна сироватка	0,5	--	0,5
Екстракт	--	0,5	--
Фізіологічний розчин	--	--	0,5
Облік результатів	?	+	--

КА – контроль антигену (досліджуваного екстракту),

КС – контроль стандартної сироватки.

Реакція відбувається при кімнатній температурі в перші хвилини після проведення.

Якщо в контрольних пробірках результат співпадає з даними таблиці, врахуйте результат реакції у першій пробірці і зробіть висновок про відсутність або присутність антигенів B.antracis у досліджуваному екстракті.

Робота 2 . Переглянути демонстрацію та оформити протокол.

ДЕМОНСТРАЦІЯ

МІКРОПРЕПАРАТИ

Bacillus anthracis,фарбування за Грамом.

Грам позитивні паличкоподібні бактерії наче з обрубаними кінцями

розташовуютьсяу вигляді ланцюжків (в матеріалі від хворого ланцюжки короткі, в

чистій культурі довгі). В препаратах, приготованих з матеріалу, взятого від хворого

або з поживного середовища, в складі котрого були білкові добавки, видно капсулу,

котра може оточувати не тільки окрему клітину, але й цілий ланцюжок. Спора,

котра формується при несприятливому впливі на клітину навколишнього

середовища, розміщується центрально. Діаметр спори не перевищує поперечного

розміру бактерії, на цій основі збудник віднесений до роду Bacillus – цей рід

включає в себе спороутворюючі бактерії з дрібними спорами. Спора не дозволяє

фарбам проникати в середину клітини при більшості методів фарбування, тому ви

спостерігаєте її як просвіт вцентрі клітини. При використанні метода фарбування

Циля-Нільсена спора фарбується фуксином Циля в червоний колір; цитоплазма

бактерій як структура, не стійка до дії кислот, набуває синього кольору.

ДІАГНОСТИКУМИ

Бруцельозний

Бруцельозний єдиний (для реакції Райта і Хеддельсона) діагностикум, який складається з завису вбитих бруцел в 12% розчині натрію хлориду, зафарбований аніліновим барвником у синій колір.

АЛЕРГЕНИ

Антраксинсибірковий алерген.

Алергодіагностики сибірки базується на здатності організму хворого відповідати місцевою алергічною реакцією шкіри на введення антраксину. Шкірну пробу ставлять на внутрішній поверхні передпліччя. Результат оцініють через 24-48 годин. Реакція вважається позитивною при наявності через 24 години гіперемії і інфільтрата на шкірі діаметром не менше 8 мм. Результати шкірної проби з антраксином необхідно оцінювати тільки в комплексі з клініко-епідеміологічними даними.

Бруцелін

Використовується для проведення шкірно-алергічної проби Бюрне. Представляє собою 0,1%-й розчин поліцукрово-білкового комплексу, отриманого із вакциного штаму шляхом оцтового гідролізу. Сутністю алергічної проби є здатність сенсибілізованого організму специфічно відповідати місцевою реакцією на внутрішньошкірне введення бруцеліну. Реакцію оцінюють через 24 години. Наявність вираженого набряку шкіри вважається позитивною алергічною реакцією. Відсутність болючості і почервоніння, звичайно супроводжуючих набряк, не виключає позитивної оцінки проби.

ЛІКУВАЛЬНІ І ПРОФІЛАКТИЧНІ ІМУНОБІОЛОГІЧНІ ПРЕПАРАТИ

ВАКЦИНИ

Сибіркова жива (СТІ)

Представляє собою спори авірулентного безкапсульного вакцинного штаму бактерій сибірки.Використовується для планової вакцинопрофілактики у осіб із підвищеним ризиком зараження збудником сибірки в промислових або побутових умовах, а також по епідеміологічним показанням.

Бруцельозна жива

Містить авірулентні бруцели коров’ячого типу. Використовується для профілактики бруцельозу по епідемологічним і епізоотичним показанням. Однак вакцинація розглядається, як тимчасовий профілактичний засіб в боротьбі з бруцельозом. Головне – це суворе дотримання санітарно гігієнічних і ветеринарних правил і проведення комплексу неспецифічних заходів.

Бруцельозна вбита

Містить вбиті нагріванням бруцели коровячого та овечого видів.Використовується для імунотерапії при хронічному бруцельозі. Її застосування обмежене через високу сенсибілізуючу і алергізуючу здатність. Призначають її тільки хворим з нормергічною реакцією організму, що встановлюється по внутрішньошкірній алергічній пробі Бюрне. Хворим з гіперергічною і алергічною реакцією, а також особам, що мають ознаки генералізованої інфекції, вакцинація шкідлива. Частіше проводять внутрішньошкірну вакцинотерапію, рідше – внутрішньовенну; у частини хворих ефективним являється введення бруцеліну.

СИРОВАТКИ

Імуноглобулін протисибірковий

Гамма-глобулінова фракція сироватки крові коней, гіперімунізованих вакциною СТІ та вірулентним штамом Bacillus anthracis. Використовують для лікування та профілактики сибірки. У залежності від тяжкості захворювання доза на курс коливається від 20 (легкий перебіг) до 400 мл (при лікуванні септичної форми).

Сибіркова преципітуюча

Отримують шлюхом гіперімунізації тварин зависом вбитих бактерій. Використовується для постановки реакції термокольцепреципітації по Асколі, яка дозволяє виявляти термостабільні антигени бацил сибірки в дуже малих концентраціях. Екстрагують такі антигени при кип’ятінні досліджуваного матеріалу (шерсті, шкіри, хутра та ін.).

Пояснення до самостійної роботи з теми: ” ЗБУДНИКИ ЗООНОЗНИХ БАКТЕРІАЛЬНИХ ІНФЕКЦІЙ - БРУЦЕЛЬОЗУ, СИБІРКИ.”

Морфологія бруцел	дрібні грамнегативні кокобактерії, які не мають спор, джгутиків.
Особливості культивування бруцел	1.Аероби 2.На штучних поживних середовищах ростуть повільно ( 2-3 тижня) 3.Вимогливі до поживних середовищ
Антигени бруцел	Поверхневий соматичний О та капсульний антигени, видоспецифічний А(абортус) та М(мелітензіс) антигени.
Основні фактори патогенності бруцел	1. Ендотоксин, гіалуронідаза низькомолекулярні речовини, що пригнічують фагоцитоз 2. Здатні розмножуватися та персистувати в макофагах. 3.Довготривала бактеріємія 4.Розвиток ГСТ
Специфічний алерген	Бруцелін
Специфічна профілактика бруцельозу	Жива вакцина
Специфічна терапія бруцельозу	Вбита бруцельозна вакцина
Морфологія збудника сибірки	Грампозитивна, велика, нерухлива паличка, розташовується ланцюгом. Має спору, яка розташовується центрально, утворює капсулу
Фактор, що забезпечує високу стійкість збудника сибірки у зовнішньому середовищі	Спора
Антигени збудника сибірки	1.Капсульний білковий антиген термостабільний 2.Соматичний полісахаридний
Фактори вірулентності збудника сибірки	1.екзотоксин 2.капсула 3.протеолітичні ферменти
Реакція для визначення антигену сибірки	РІФ та реакція преципітації Асколі
Активна специфічна профілактика сибірки	жива протисибіркова вакцина
Пасивна специфічна профілактика	протисибірковий імуноглобулін