Базофил в мазке крови, X1325

М

Мазок крови человека.

Х1325.

М - моноцит

(лейкоцит).

Функции крови

функции крови многочисленны и сложны и задействуют не только форменные элементы, но также очень много веществ, растворенных в плазме, что отражает метаболическую активность тканей, связанных с циркуляцией крови.

Некоторые основные функции включают:

• распределение кислорода по всем тканям и выведение углекислого газа и азотистых продуктов распада, соответственно, в легких и почках; транспортировка питательных веществ из кишечника и печени, а также доставка других метаболитов (гормонов, сигнальных молекул) тканям и органам-мишеням;

• регулировка температуры тела, рН, электролитов, уровня глюкозы, холестерина и проч.

• поддержание объема циркулирующей жидкости;

• защита от инфекции и предотвращение потери крови при повреждении;

•гемокоагуляция.

СВОЙСТВА ФОРМЕННЫХ ЭЛЕМЕНТОВ
	эритроцит	тром­боцит	нейт-рофил	эози-но-фил	базо- фил	моно­цит	лимфо цит
размер, мкм	7.1-7.9	2-4	10-12	12-14	10-14	15-20	7-16
нахож­дение в крово­токе	4 месяца	дней	1-2 дней	1-2 дней	часы-дни	3 дня	3 дня-20 лет
доля	99% всех элементов	-	40-75%	1-5%	0-1%	3-9%	20-35%
коли­чество в 1 л	муж 3.9-5.5x1012 жен 3.7-4.9x10"	250-300 х10'	3.9-9 xlQS всего лейко­цитов

/^ 4

Мазок крови человека, Азур-2 - эозин, X 1325.

С

Р1

Эритроциты - оранжево-розовые двояковогнутые диски 1.8 мкм толщиной (2.0 мкм в самой широкой части и 1.0 мкм в центре) и диаметром 6.5-8.5 мкм, размер которых постепенно уменьшается с возрастом. Эти клетки имеют центральную светлую часть (стрелки), представляющую самую тонкую область двояковогнутого диска. Эритроциты не имеют ядра, так как оно утрачено в ходе дифференцировки клетки. Двояковогнутая форма максимально увеличивает соотношение площадь/объем, что способствует увеличению объема переносимого кислорода.

«^

Мазок периферической крови, азур-2 - эозин.

А-

Основной цитоплазменный компонент эритроцита (Э) гемоглобин, который определяет ацидофильную окраску: именно гемоглобин, несущий 02, обладает эозинофилией.

Гемоглобин представляет
собой крупную тетрамерную
белковую молекулу, состоящую из
4-х полипептидных цепей, каждая
из которых ковалентно связана с
гемом - железосодержащей частью
молекулы. Глобин высвобождает
С02, а железо связывает 02 в
областях с высоким парциальным
давлением 02 (в легких). В
областях, бедных 02, гемоглобин
высвобождает кислород и

связывает углекислый газ. Эта способность делает гемоглобин идеальным соединением для газообмена.

Н - нейтрофил

Эритроциты покрыты плазмалеммой, окружающей

электроноплотную цитоплазму, не содержащую органелл - все они дегенерировали в ходе дифференцировки. Эритроциты содержат растворенные в цитозоле ферменты, такие как карбоангидраза, которая способствует превращению С02 в угольную кислоту. Эта кислота диссоциирует с образованием бикарбонат аниона НСОЗ- и катиона водорода Н+. Бикарбонат проникает через плазмалемму эритроцита под действием интегрального мембранного белка полосы 3. Этот белок представляет собой сопряженный анионный транспортер, который обменивает внутриклеточный карбонат на внеклеточный хлор CI-. Несмотря на отсутствие органелл, эритроциты все же метаболически активны и производят энергию через aнaэpoбиьiй метаболизм глюкозы и через синтез АТФ в гексозо-монофосфатный шунте, который продуцирует макроэргичесие молекулы NADPH. Ферменты гликолиза также растворены в цитоплазме эритроци i

ЭРИТРОЦИТЫ, СЭМ

специфические гранулы азурофи- льные гранулы

Нейтрофил.ТЭМ

Цитоплазма
нейтрофила
содержит и

другие органеллы помимо гранул: ГЭС, рибосомы и даже остатки комплекса Гольджи, который был хорошо развит, когда во время дифференциров ки участвовал в упаковке гранул.

После активации нейтрофилы часто оказываются в условиях нехватки кислорода и глюкозы. Поэтому они накапливают большое количество гликогена (gl) для анаэробного гликолиза. Энергия образуется в гексозо-монофосфатном шунте, но она используется в основном для продукции антимикробных оксидантов, нежели для внутренних потребностей клетки. Lys- лизосомы, ад - азурофильные гранулы.

нейтрофилы адаптированы к у л аэробному

ОБМЕНУ

актииовые псевдоподии

ФАГО­ЦИТОЗ У НЕЙТРО-ФИЛОВ

a) Нейтрофилы имеют мембранные рецепторы, в основном к Fc фрагменту иммуноглобулинов, фракциям комплемента, связывающимся с чужеродными белками и бактериальным полисахаридам. Нейтрофилы не фагоцитируют материал, с которым у них нет связывания.

b) Первый шаг на пути фагоцитоза - связывание чужеродной частицы со специфическим рецептором. Клетки образуют псевдоподии, чтобы окружить частицу - для этого производится сборка и диссимиляция актиновых филаментов.______________

слияние мембраны с образование фагосомы

фагоцитоз у неитрофилов

c) Псевдоподии сливаются, полностью окражая частицу и образуя эндоцитозный пузырек. В окончательном «склеивании» мембран принимают участия специфические белки.

d) Поглощенная частица оказывается внутри фагосомы.

люосома сливает­ся с фагосомой

остаточное тельце

со

©

[^фаголизосома [ ФАГОЦИТОЗ НЕЙТРОФИЛОМ

e) Фагосома сливается с гранулами нейтрофила, особенно
азурофильными, которые выделяют мощные гидролитические
ферменты. Если частица бактериального происхождения, то это
будет сопровождаться образованием перекиси водорода и других
активных форм кислорода (супероксид-аниона) посредством
ферментативных реакций восстановления кислорода.

f) Чужеродная частица разрушается с образованием остаточного
тельца.

КЛИНИЧЕСКИЕ КОРРЕЛЯЦИИ
Во время фагоцитоза отмечается

респираторный взрыв - резкое увеличение потребления 02, что ведет к образованию супероксиданиона ~ короткоживущего радикала, который убивает микроорганизмы, поглощенные нейтрофилом.

Дети с наследственным дефицитом NADPH-оксидазы страдают от постоянных бактериальных инфекций, так как их нейтрофилы не способны осуществить респираторный взрыв в ответ на проникновение микроорганизмов. Их нейтрофилы не способны производить супероксиданион, перекись водорода и другие активные вещества во время фагоцитоза бактерий.

Эозинофил в мазке крови. Х1325.

Эозинофилы имеют
диаметр 10-14 мкм и
содержат многочисленные
крупные красно-

оранжевые,
светопреломляющие
специфические гранулы.
Присутствуют и

азурофильные гранулы.
Ядро коричнево-черное,
двудолевое, напоминает
сардельки, соединенные
тонкой перетяжкой

(стрелка).

Гранулы эозинофилов
(до 200 на клетку)
эозинофильны. Под ЭМ в
них обнаруживается насечка '
- параллельная длиннику
гранулы. В гранулах
содержится главный

основной белок с большим *
количеством аргинина. На его
долю приходится 50% всех
протеинов гранул, именно он
определяет эозинофилию гранул.
Белок способствует уничтожению
глистной инфекции, например
шистосом. Азурофильные

гранулы, как и в других клетках,
содержат кислые гидролазы. Они
вызывают деструкцию паразитов,
а также гидролиз иммунных
комплексов, поглощенных

эозинофилами.

'-ci" I, V -'■ • '.-■

1'"; 1: . '""..■ ~j^

ЭОЗИНОФИЛ, ТЭМ

наружные ямочки [ канальцев!

' вая I кора

На электронной
микрофотогра­
фии видно, что
»а»-- У тромбоцита

;4^|1| есть 10-15

•* J»/ й| СПЛОШН1 '■^?^Sm| кольцо

Ш 3s?"^ микротрубочек, <ia. организован­ных параллель-Щ но друг другу и Щ поверхности 'Щ тромбоцита и образующих сплошное

гиаломере.

Микротрубочки

'5 тромбоцитам

помогают

поддерживать их дисковидную форму.

Актиновые и миозиновые
нити ассоциированы с
пучком маргинальных

микро-трубочек и могут
осущес-твлять быструю плазма

сборку, формируя лемма

сократительный аппарат.
Кроме того, в гиаломере есть
две системы трубочек:
поверхностная открытая v.
плотная (глубокая). Нв
плазмалемме есть

многочисленные ямочки, в
которые открываются

канальцы поверхностной
открытой системы. Эта
система канальцев выводит
содержимое альфа-гранул, в
то время как сократите­
льные белки актиновой коры
(ранее они назывались
тромбостенин) участвуют в
ретракции сгустка и и
экструзии содержимого

ГПЯНУП__________________________

ТРОМБОЦИТ

^ система канальцев

альфа-гранулы

митохондрии

Микротрубоч­
ки маргинального
пучка полиме-

ризуются при

аггрегации тромб­
оцитов. В глубине
имеется еще одна
система трубочек -
плотная трубчатая
система узких

трубочек с

гомогенным прозра­чным содержимым.

ТРОМБОЦИТ

пучок маргина льных I гамма трубочек гранулы

плотная^лизосомы]

трубчатая

система

ГРАНУЛЫ ТРОМБОЦИТОВ

- альфа-гранулы - варьируют по форме и размерам, содержат важные белки (тромбопластин, фибриноген, тромбоцитарный фактор IV);

- очень плотные гранулы (гамма-гранулы), содержат серотонин, но не синтезированный, а поглощенные из плазмы;

- лямбда-гранулы - лизосомы (с кислой гидролазой)

- пероксисомы (с каталазой).

ФУНКЦИИ ТРОМБОЦИТОВ \

Если эндотелиальная выстилка кровеносного
сосуда повреждена, тромбоциты приходят в
соприкосновение с субэндотелиальными

коллагеновыми волокнами, активируются при этом, высвобождают содержимое своих гранул, прилипают к области повреждления (адгезия тромбоцитов) и друг к другу (агрегация тромбоцитов. Взаимодействие тканевых факторов, плазменных факторов и тромбоцитарных факторов приводит к образованию сгустка.

Тромбоциты. ЭМ.

a) СЭМ. Тромбоциты на
ранней ' стадии
агрегации. У них резко
изменена форма - они
стали сферичными и у
них появились
многочисленные
отростки (СР).

b) ТЭМ агрегированных
тромбоцитов. В
тромбоцитах умень­
шилось количество
гранул, некоторые
отростки связаны друг
с другом.

ТРУБОЧКИ И ГРАНУЛЫ ТРОМБОЦИТОВ
струкпура (размер)	локалп зация	содержимое	функции
открытая по­верхностная капальцевая система	гиало- мер		обеспечивает быстрый захват и высвобождение молекул из активированного тромбоцита
плотная каиальиевая система	гиало- мер		секвестрация кальция для предотвращения склеивания тромбоцитов
а-гранулы (300-500 им)	грану­лем ер	фибриноген, тромбоци-тариый фактор роста, тромбоцитарный тромбо-пластин, тромбоспондин, фактор коагуляции	содержат факторы, облегчающие восстанов­ление целостности сосудов, агрегацию тромбоцитов и свертывание крови.
б-гранулы (плотные тельца) (250-300 нм)	грану- ломер	кальций, АДФ, АТФ, серотонин, гистамин, ппрофосфатаза	содержат факторы, облегчающие агрегацию тромбоцитов, их адгезию, а также вазоконстрикцию
).-гранулы (лизосомы) (200-250 нм)	грану-ломср	гидролитические ферменты	содержат ферменты, облегчающие резорбцию сгустка

Клинические корреляции Тяжелая тромбоцитопения может быть изолированным симптомом (например, при идиопатической тромбоцитопенической пурпуре), а может быть одним из симптомов обширного поражения красного костного мозга с угнетением эритроцитарного (анемия) и лейкоцитарного (нейтропения) листков. Это состояние может развиться, если гемопоэтическая ткань костного мозга подавляется опухолевой инвазией, как например при остром лейкозе, или вызвана побочным действием лекарств, например химиопрепаратов, используемых для лечения рака. Особенно серьезным является состояние, когда число тромбоцитов падает ниже 50,000/ммЗ (в норме нижняя граница - 200,000/ммЗ.

лейкоциты у нейтрофилов гранулярная цитоплазма и лопастное ядро. Уэозинофилов крупные розовые гранулы и двулопастное ядро (тип «сосиски»). Между двумя лопастями ядра тонкая перетяжка (стрелка).

У базофилов крупные базофильные гранулы.

Мазок крови человека,
окраска по Райту.
Нейтрофилы - самая

многочисленная клеточная популяция в периферической крои после эритроцитов.

У моноцитов большие размеры, , эксцентричное почковидное ядро, отсутствие специфических гранул.

Лимфоциты - мелкие клетки с большим, эксцентричным ядром и узким ободком слабо Ш базофильной цитоплазмы вокруг него.

Мазкн крови

М-моноцнт

нейтрофйДь

По характеру гранул и морфологии ядра лейкоциты делятся на 2 группы: гранулоциты (полиморфиоядерные клетки) и агранулоциты (мононуклеарные клетки). Все лейкоциты, циркулирующие в крови, имеют округлую форму, однако покинув кровоток и попав в ткани приобретают амебовидную форму. Базофилы, эозинофилы и нейтрофилы являются гранулоцитами, так как в их цитоплазме выражены специфические гранулы, они являются также клетками миелоидного кроветворения в красном костном мозге, в то время как моноциты (миелоидное кроветворение) и лимфоциты (лимфоидный листок) являются агранулоцитами, не имеющими специфических гранул, хотя азурофильные гранулы у них имеются. Агранулоциты содержатся в основном в лимфатических узлах и селезенке. В тканях моноциты

1-таипаатг-а чакптЬягакЧл______________________________________________________________

Нейтрофилы. X 1325.

Нейтрофилы - самая
многочисленная группа

лейкоцитов, они имеют 9-12
мкм в диаметре, содержат
слабо оксифильную

цитоплазму с

многочисленными
азурофильными (более

крупными) и специфическими
(более мелкими) гранулами.
Спейифиеские гранулы не
очень хорошо воспринимают
красители - отсюда название
клеток. Ядро клетки тмное,
многолопастное, с 2-3-4-5
лопастями, соединенными

перетяжками (стрелка).

**%к

Незрелые

нейтрофилы, которые
недавно попали в
кровоток имеют ядро в
виде подковы

(палочкоядерные
клетки). Увеличение их
доли является

показателем омоложения нейтрофилов, вызванное чаще всего бактериальной инфекцией. Если у нейтрофила 5 и более долей ядра. Он называется гиперсегментированн ым и чаще всего является старым.

СОЗРЕВАНИЕ нейтрофилов

Нейтрофильный метамиелоцит 0-0.5%

Палочкоядерный нейтрофил 3-5%

Сегментоядерный нейтрофил 40-70%

нейтрофил, тэм

Нейтрофилы циркулируют в крови в основном в неактивном
состоянии, но после определенной активации они покидают
кровоток и в тканях становятся подвижными
фагоцитирующими клетками. Их главная функция -
захватывать и разрушать микроорганизмы, проникающие в
ткани организма. Они играют важную роль иа ранних
стадиях воспалительной реакции на тканевое повреждение и
составляют основную массу образующегося гноя._________

ГРАНУЛЫ НЕЙТРОФИЛОВ.

Их всего 3 типа. Первичные (азурофильные, Ад) аналогичны лизосомам. Это первые гранулы, которые появляются в клетке во время дифференцировки, по ходу которой их число сокращается. В то время как число специфических гранул нарастает. На электронной микрофотографии они выглядят крупнее и плотнее, чем специфичесгие (s) гранулы. Как в любых лизосомах, в азурофильных гранулах есть кислые гидролазы, но помимо этого есть много других антибактериальных агентов, таких как миелопероксидаза, эластаза и др.

Вторичные гранулы -это специфические гранулы, они в 2 раза многочисленнее, чем азурофильные. Они мельче азурофиль­ных гранул, содержат коллагеназу IV типа, лизоцим, фагоцитин.

Нейтрофил, ТЭМ, х10,000

Ультраструктурные исследования показали, что вторичные гранулы варьируют по размерам, плотности и форме и что они содержат вещества, способствующие иммобилизации медиаторов воспаления и активации комплемента. Эти вещества секретируются во внеклеточное пространство. Третичные гранулы описаны недавно, они содержат ферменты (желатиназу, катепсин Д), способны вставлять некоторые гликопротеины в клеточные мембраны, что может способствовать клеточной адгезии и в конечном счете - фагоцитозу.

I специфические I гранулы азурофи- льные гранулы Г

Нейтрофил.ТЭМ

Цитоплазма
нейтрофила
содержит и

другие органеллы помимо гранул: ГЭС, рибосомы и даже остатки комплекса Гольджи, который был хорошо развит, когда во время дифференциров ки участвовал в упаковке гранул.

-^m\>

м-- А.

После активации нейтрофилы часто оказываются в условиях нехватки кислорода и глюкозы. Поэтому они накапливают большое количество гликогена (gl) для анаэробного гликолиза. Энергия образуется в гексозо-монофосфатном шунте, но она используется в основном для продукции антимикробных оксидантов, нежели для внутренних потребностей клетки. Lys- лизосомы, ад - азурофильные гранулы

нейтрофилы адаптированы к анаэробному

ОБМЕНУ

ТЕГ

актиновые псевдоподии

связывание рецепторов

ФАГО­ЦИТОЗ у НЕЙТРО-ФИЛОВ

поверх­ностные лиганды	/
актино-вая кора

Нейтрофилы имеют мембранные рецепторы, в основном к Fc фрагменту
иммуноглобулинов, фракциям комплемента, связывающимся с
чужеродными белками и бактериальным полисахаридам. Нейтрофилы
не фагоцитируют материал, с которым у них нет связывания.
Первый шаг на пути фагоцитоза - связывание чужеродной частицы со
специфическим рецептором. Клетки образуют псевдоподии, чтобы
окружить частицу - для этого производится сборка и диссимиляция
актиновых филаментов.______________________________________

, поглощение частицы

слияние мембраны с . образование фагосомы

ФАГОЦИТОЗ У НЕИТРОФИЛОВ

c) Псевдоподии сливаются, полностью окражая частицу и образуя эндоцитозный пузырек. В окончательном «склеивании» мембран принимают участия специфические белки.

d) Поглощенная частица оказывается внутри фагосомы.

лизосома сливает­ся с фагосомой

остаточное тельце

ФАГОЦИТОЗ НЕЙТРОФИЛОМ

e) Фагосома сливается с гранулами нейтрофила, особенно
азурофильными, которые выделяют мощные гидролитические
ферменты. Если частица бактериального происхождения, то это
будет сопровождаться образованием перекиси водорода и других
активных форм кислорода (супероксид-аниона) посредством
ферментативных реакций восстановления кислорода.

f) Чужеродная частица разрушается с образованием остаточного
тельца.

КЛИНИЧЕСКИЕ КОРРЕЛЯЦИИ
Во время фагоцитоза отмечается

респираторный взрыв - резкое увеличение потребления 02, что ведет к образованию супероксиданиона - короткоживущего радикала, который убивает микроорганизмы, поглощеннью нейтрофилом.

Дети с наследственным дефицитом NADPH-оксидазы страдают от постоянных бактериальных инфекций, так как их нейтрофилы не способны осуществить респираторный взрыв в ответ на проникновение микроорганизмов. Их нейтрофилы не способны производить супероксиданион, перекись водорода и другие активные вещества во время фагоцитоза бактерий.

' /< ■ ЭОЗИНОФИЛ, ТЭМ

Эозинофил в мазке крови. X1325.

Эозинофилы имеют
диаметр 10-14 мкм и
содержат многочисленные
крупные красно-

оранжевые,
светопреломляющие
специфические гранулы.
Присутствуют и

азурофильнью гранулы.
Ядро коричнево-черное,
двудолевое, напоминает
сардельки, соединенные
тонкой перетяжкой

(стрелка).

Шш

Гранулы эозинофилов
(до 200 на клетку)
эозинофильны. Под ЭМ в
них обнаруживается насечка
- параллельная длиннику
гранулы. В гранулах
содержится главный

основной белок с большим

количеством аргинина. На его
долю приходится 50% всех (,> «>, ■.- г\;
протеинов гранул, именно он , *;*^,jy'''*>^
определяет эозинофилию гранул. ■ц'.-'^^'Г'•■'
Белок способствует уничтожению ff^.N^»,
глистной инфекции, например v'...**
шистосом. Азурофильные *

гранулы, как и в других клетках, *
содержат кислые гидролазы. Они
вызывают деструкцию паразитов,
а также гидролиз иммунных
комплексов, поглощенных

зозинофилами.

ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ КОРРЕЛЯЦИИ

На своей поверхности эозинофилы содержат IgE. Они продуцируют вещества, которые модулируют воспалительные реакции через инактивацию лейкотриенов и гистамина, вырабатываемого другими клетками. Они фагоцитируют комплексы антиген-антитело. Они инактивируют и накапливают гистамин. Увеличение эозинофилов в крови связано с аллергическими реакциями и гельминтными инвазиями. Они участвуют в противоаллергических реакциях. У пациентов, леченных кортикостероидами, отмечается снижение эозинофилов в крови.

Базофил в мазке крови, X1325.

Базофилы самью

Малочисленные из