Микробиологическая диагностика поражений ЦНС при ви­русном паротите

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: спинномозговая жидкость (собирают в стерильный контейнер и сохраняют при +4 °С не более 48 ч). При необходимости более длительного хранения материал замораживают и хранят при —70 "С.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Вирусологическое исследование.Выделение чистой культуры вируса из спинномозговой жидкости является ведущим мето­дом диагностики поражений ЦНС при вирусном паротите (см. главу 21).

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические, биохими­ческие и молекулярно-биологические исследования.Иммунохи­мические исследования. Методы обнаружения антигенов возбудителя в исследуемом материале — см. главу 21.

Молекулярно-биологические исследования. Вирус­ные НК в исследуемом материале обнаруживают с помощью ПЦР или метода ДНК-зондов.

Микробиологическая диагностика поражений ЦНС, вызван­ных вирусом кори

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: спинномозговая жид­кость, биоптат тканей ЦНС.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Цитологическое исследование.Спинномозговую жидкость центрифугируют, из осадка, содержащего слущенные клетки, готовят мазки. Мазки или препараты тканей головного мозга окрашивают по методу Романовского—Гимзы. В положитель­ном случае удается обнаружить признаки ЦПД — гигантские многоядерные клетки, часто содержащие внутрицитоплазмати-ческие включения. В поздних стадиях заболевания, а также при хронических формах инфекции (в частности, подостром скле-розирующем панэнцефалите — ПСПЭ) типично появление внутриядерных включений. Метод обладает низкой чувстви­тельностью и специфичностью.

Вирусологическое исследование.Вирус кори с трудом удается культивировать in vitro, поэтому выделение чистой культуры возбудителя из исследуемого материала редко применяют с диагностической целью (см. главу 21). Другой причиной явля­ется низкое содержание вируса в спинномозговой жидкости. Необходимо помнить, что при ПСПЭ в организме персисти-рует дефектный вирус, который не удается культивировать с помощью стандартных методов. В этом случае применяют ме­тод совместного культивирования клеток ткани мозга или пе­риферической крови пациента с культурой клеток, чувстви­тельных к вирусу. Исследование занимает не менее 1 мес. Присутствие вируса определяют по ЦПД и путем выявления его антигенов методом ИФ.

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические и молеку­лярно-биологические исследования.Иммунохимические исследования. Присутствие антигенов вируса в клетках био-птата мозга и слущенных клетках спинномозговой жидкости выявляют методом ИФ (см. главу 21). Необходимо иметь в виду, что отрицательный результат исследования не исключает заболевания, что объясняется малым содержанием вируса в клетках спинномозговой жидкости и сравнительно низкой чув­ствительностью метода. Присутствие вирусных белков (анти-

генов) в исследуемом материале может быть выявлено с помо­щью чувствительных серологических реакций: ИФА, РИА и др.

Молекулярно-биологические исследования. Ви­русные НК в исследуемом материале обнаруживают с помо­щью ПЦР или метода ДНК-зондов.

Серодиагностика.Обнаружение специфических противови­русных антител в спинномозговой жидкости является ведущим методом диагностики поражений ЦНС, вызываемых вирусом кори. Повышенное содержание противокоревых антител в спинномозговой жидкости является характерным для всех форм патологии ЦНС, обусловленных этим вирусом. Наличие противокоревых антител в спинномозговой жидкости опреде­ляют с помощью различных серологических реакций (см. главу 21). Методы ИФА и непрямой ИФ являются наиболее чувст­вительными и дают положительный результат в большинстве случаев.