Ход исследования для выявления возбудителя газовой гангрены
День исследования
1. Взятие материала от больного:
экссудат;
отделяемое гнойных ран;
кусочки некротизированных тканей
2. Приготовление мазков из исследуемого материала
окраска по Граму;
выявление капсул методом Йоне
3. Посев на:
стерильное лакмусовое молоко;
среду Вильсон-Блера;
среду Врублевского
среду Китта-Тароцци
желточная среда;
5% кровяной МПА
культивирование в анаэростате.
4 Постановка реакции нейтрализации с экзотоксином:
Для постановки реакции берут ряд пробирок, в каждую вносят по 0,9 мл выращенной культуры и 0,6 мл известных поливалентных или моновалентных антитоксических сывороток (C.perfringens; C.novyi A и B; C. septicum; C.bifermentans). Смесь в количестве 0,5 мл вводят внутрибрюшинно лабораторным животным (белым мышам).
День исследование
1. Учет и описание результатов роста микроорганизмов на жидких и плотных питательных средах:
2. Приготовление мазков из колоний, окраска по Граму
3. Посев чистой культуры на среду Врублевського
День исследование
1. Изучение роста микроорганизмов на среде Врублевського
2. Окраска по методу Грама.
3. Учет реакции нейтрализации:
В случае нейтрализации токсина антитоксином животное выживает (позитивный результат); в случае несоответствия сыворотки и типа токсина - погибает.
Демонстрационные препараты для специфической профилактики, диагностики и терапии клостридиозов :
o АКДС;
o Столбнячный анатоксин;
o Противостолбнячная сыворотка;
o Противоботулинические сыворотки;
o Противогангренозные сыворотки.
Работа №1.Ознакомиться с морфологическими и тинкториальными свойствами клостридий (демонстрация; сделать рисунок).
Clostridium tetani Clostridium botulinum Clostridium perfringens
Окраска по Граму.
Сделать вывод.
Работа №2.Изучить ускоренную диагностику анаэробной раневой инфекции.
Материал для исследования :
посев на
среду Врублевского стерильное лакмусовое молоко среду Вильсон-Блера
Сделать вывод.
Вопросы для самоконтроля.
· История открытия возбудителей анаэробных инфекций.
· Классификация анаэробов.
· Морфологические и биологические свойства возбудителей столбняка, ботулизма, анаэробной инфекции ран.
· Патогенетические и иммунобиологические особенности столбняку, ботулизма и анаэробной раневой инфекции.
· Факторы патогенности возбудителей столбняку, ботулизма и анаэробной раневой инфекции.
· Методы микробиологической диагностики анаэробной инфекции.
· Препараты для профилактики и лечения столбняку, ботулизма, анаэробной инфекции ран.
Рекомендованная литература.
Основная:
1. Борисов Л. Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология; М.: ООО "Медицинское информационное агенство", 2005, 734 с.
2. Воробьев А. А., Кривошеин Ю. С., Широбоков В. П. Медицинская и санитарная микробиология: учеб. пособие.- М., 2008. - 462 с.
Дополнительная:
3. Красильников А. П. Микробиологичексий словарь-справочник.- Минск, 1986.
4. Medical microbiology / edited by Samuel Baron, MD. - 4th ed. The University of Texas Medical Branch and Galveston, 1996, 1273 p.
5. W.Levinson, E.Jawetz. Medical microbiology and immunology: examination and board review, 6th ed. The McGraw - Hill Companies, 2000, 582 p.
6. Биргер М. О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования; М., 1983.