Методы микроскопического исследования
Государственное образовательное учреждение высшего
Профессионального образования
«Северо-Осетинская Государственная медицинская академия
Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
Методические рекомендации
Для выполнения САМОСТОЯТЕЛЬНой
ВНЕАУДИТОРНой РАБОТы СТУДЕНТОВ 2 КУРСА
ЛЕЧЕБНОГО, ПЕДИАТРИЧЕСКОГО, МЕДИКО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО
ФАКУЛЬТЕТОВ ПО ЦИКЛУ МИКРОБИОЛОГИИ,
ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИИ
Владикавказ - 2010
Содержание:
1. ТЕМА: Микробиологическая лаборатория, режим работы и
НазначениЕ. Морфология бактерий. Методы микроскопического
изучения бактерий, простой метод окраски бактерий. ............................. 3
2. ТЕМА: Структура прокариотической клетки. Сложные методы
окраски микроорганизмов. ........................................................................................ 10
3. Тема: Структура прокариотической клетки................................................... 16
4. Тема: Морфология и ультраструктура спирохет,
микоплазм, актиномицетов и грибов................................................................... 21
5. Тема: Морфология и ультраструктура хламидий и
риккетсий. Морфология вирусов............................................................................. 26
6. Тема: Генетика микроорганизмов....................................................................... 31
7. темА: Бактериологический метод диагностики инфекционных
Заболеваний. Питание бактерий. Принципы культивирования
Микроорганизмов. Питательные среды. Методы
стерилизации. ..................................................................................................................... 36
8. темА: Сущность бактериологического метода исследования.
Особенности механизмов питания и метаболизма
бактерий.................................................................................................................................. 45
9. темА: Этапы культивирования аэробных бактерий................................ 50
10. ТемА: Этапы культивирования аэробных (продолжение)
и анаэробных бактерий. Дыхательный метаболизм.................................. 55
11. ТЕМА: Антибиотики и химиотерапевтические препараты.................. 61
12. ТЕМА: Культивирование вирусов, риккетсий и хламидий.................... 66
13. ТЕМА: Симбиоз и антагонизм в мире микробов......................................... 71
14. Тема: Инфекция и инфекционный процесс................................................... 79
15. Тема: Неспецифические факторы защиты организма человека.... 90
16. Тема: Физиологические механизмы иммунитета. Иммунная
Система человека. Антигены и антитела. Гуморальный
и клеточный иммунитет................................................................................................ 95
17. ТЕМА: Серологический метод лабораторной диагностики. Серологические реакции: реакция агглютинации, реакция непрямой гемагглютинации, реакция преципитации. Диагностикумы и диагностические сыворотки.......... 103
18. ТЕМА: Комплементзависимые серологические реакции. Реакции иммунного лизиса (бактериолиза, цитолиза, гемолиза). Реакция связывания комплемента. Современные серологические и несерологические методы диагностики. Иммуноферментный анализ (ИФА), радиоиммунный анализ (РИА), реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Полимеразная цепная реакция (ПЦР). 110
Занятие №1
ТЕМА: Микробиологическая лаборатория, режим работы и назначения. Морфология бактерий. Методы микроскопического изучения бактерий, простой метод окраски бактерий.
I. Вопросы для проверки исходного (базового) уровня знаний
1. Что такое прокариоты?
2. Отличительные признаки прокариот от эукариот?
3. Каково устройство микроскопа?
4. Чем отличается сухая система микроскопа от иммерсионной?
II. Целевые задачи
| Студент должен знать: 1. Основные принципы классификации форм бактерий. 2. Устройство и оборудование микробиологической лаборатории, режим работы и назначение. 3. Методы диагностики инфекционных заболеваний: микроскопический,микробиологический, биологический, серологический, кожно-аллергических проб. 4. Техника микроскопического исследования. Иммерсионная система, техника ее применения. 5. Техника и этапы приготовления мазка для микроскопии. 6. Современные методы микроскопического исследования (темнопольная микроскопия, фазово-контрастная микроскопия, электронная микроскопия). 7. Основные формы бактерий. | Литература 1. . Микробиология, вирусология и иммунология./Под. ред. В.Н. Царева. –М.,2009. 2.Медицинская и санитарная микробиология. / Под ред. А.А. Воробьева, Ю.С. Кривошеина, В.П. Широбокова. Основная литература: 1. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология./Под. ред. А.А. Воробьева. М. 2004. 2. Микробиология./Под ред. А.А. Воробьева, А.С. Быкова, Е.П. Пашкова, А.М. Рыбаковой.-М., Медицина, 2003. 3. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. / под. ред. А.И.Коротяева, С.А. Бабичева.Санкт-Петербург.2002. 4. Медицинская микробиология./Под Ред. Акад. РАМН В.И. Покровского.-М., 2001. 5.Микробиология и иммунология./ Под ред. А.А. Воробьева.-М., 1999. 6. Микробиология с вирусологией и иммунологией./Под ред. Л.Б. Борисова, А.М. Смирновой-М., 1994. Дополнительная литература: 1. Санитарная микробиология и вирусология./Под ред. З.Н. Кочемасовой, С.А. Ефремовой, А.М. Рыбаковой.-М., 1987. 2. Основы медицинской биотехнологии./Под ред. А.А. Воробьева.-М., 1990. 3. Внутрибольничные инфекции.Под ред. В.П. Венцела.-М., 1990. 4. Экологическая иммунология ./Под ред. Р.М. Хаитова, Б.В. Пинегина, Х.И. Истамова.-М.:Изд-во ВНИИРО, 1995. 5. Клиническая иммунология./Под ред. А.В. Караулова.-М., 1999. 6. Иммунология для врачей./Под ред. С.А. Кетлинской, Н.М.Калининой.-СПБ., 1998. 7. Краткий терминологический словарь микробиолога-биотехника./Под ред. Ю.А. Овчинникова.-М.: Ан СССР, 1989. 8. Основы биотехнологии.-сПБ.: Изд-во фирма « Наука».-1995. |
| Студент должен уметь: 1. Приготовить мазок из чистой культуры, окрасить простым способом. 2. Микроскопировать иммерсионной системой. 3. приготовить мазок и окрасить простым методом. | 1. Практикум лабораторных работ с иллюстрированными ситуационными заданиями по микробиологии, иммунологии и вирусологии./ Под. ред. А.А. Воробьева, В.Н. Царева. М.,2008. 2.Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии./Под ред. В.В. Теца, 2002. 3. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии./Под ред. Л.Б. Борисова.-М., 1984. |
Восполнить недостающие знания поможет изучение специальной литературы указанной выше
III. Задания для самостоятельной работы по изучаемой теме:
Методы диагностики инфекционных заболеваний:
1. Микроскопический метод- заключается в ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
2. Культуральный метод - заключается в --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
3. Биологический метод – заключается в ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
4. Серологический метод - заключается в --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------5. Кожно-аллергический метод- заключается в ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Морфология основных форм бактерий:
Кокки:- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Микрококки----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Диплококки----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Тетракокки----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Сарцина--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Стрептококки-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Стафилококки------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Палочковидные микроорганизмы--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Извитые формы----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Методы микроскопического исследования
Световая микроскопия- -----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Микроскопия в темном поле зрения------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Фазово-контрасная микроскопия --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Люминесцентная микроскопия-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Электронная микроскопия-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Этапы приготовления мазка:
--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Окраска препарата – мазка.
Препараты окрашивают анилиновыми красителями. С химической точки зрения различают красители:
1.----------------------------------------------
2.----------------------------------------------
3. ---------------------------------------------
Заполнить таблицу:
Наиболее широко применяются следующие красители:
| красные | синие | фиолетовые | Желто-коричневые |
Простые методы окраски позволяют определить--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
САМОКОНТРОЛЬ
( выберите один или несколько правильных ответов)
1. Для микробиологической диагностики бактериальных инфекций используют следующие методы диагностики:
А. Микроскопические;
Б. Бактериологические;
В. Серологические;
Г. Биохимические.
2. Какие специальные методы микроскопии применяются в микробиологических лабораториях:
А. В темном поле зрения;
Б. Фазово-контрастный;
В. Люминесцентный;
Г. Электронный.
3. Для приготовления мазка используют:
А. Предметные стекла;
Б. Изотонический раствор хлорида натрия;
В. Пробирки или чашки с культурой микроорганизмов;
Г. Куриный эмбрион.
4. Высушенные мазки фиксируют в пламени горелки для того, чтобы:
А. Убить бактерии;
Б. Закрепить бактерии на стекле;
В. Предотвратить их смывание в процессе окраски;
Г. Определить подвижность.
5. Простые методы окраски:
А. Позволяют определить наличие и форму бактерий;
Б. Позволяют определить размеры и взаимоположение клеток.
В. Используют один краситель;
Г. Используют несколько красителей.
6. К кокковидной форме относятся следующие бактерии:
А. Сарцина;
Б. Стрептококки;
В. Бруцеллы;
Г. Клостридии.
7. К извитым формам относят следующие микроорганизмы:
А. Вибрионы;
Б. Спириллы;
В.Спирохеты;
Г. Коринебактерии.
8. В отличие от эукариотических клеток бактерии имеют:
А. Гаплоидный набор хромосом;
Б. Диплоидный набор хромосом;
В. Клеточный центр;
Г. Гистоновые белки.
9. Три обязательных компонента бактериальной клетки – это:
А. Ядро, цитоплазма, оболочка.
Б. Нуклеоид, цитоплазматическая мембрана, включения.
В. Клеточная стенка, цитоплазматическая мембрана, ядро.
Г. Оболочка, цитоплазма, ДНК.
10. Риккетсии отличаются от большинства бактерий:
А. Отсутствие клеточной стенки;
Б. Отсутствием ядра;
В. Наличие мезосом;
Г. Способностью размножаться только в живых клетках.
11. Хламидии отличаются от большинства бактерий:
А. Отсутствием клеточной стенки;
Б. Отсутствием мемраны, окружающей нуклеоид;
В. Наличие мезосом;
Г. Способностью размножаться только в живых клетках.
12. Структурно цитоплазматическая мембрана бактерий отличается от мембран других живых существ тем, что:
А. Является трехслойной.
Б. Способна формировать эндоплазматическую сеть.
В. Способна формировать мезосому;
Г. Способна формировать веретено деления.
13. Бактерия -это:
А. Одноклеточное существо определенного вида, относящееся к прокариотам;
Б. Одноклеточное существо определенного вида, относящееся к эукариотам;
В. Вирус;
Г. Организм определенного вида.
14. Жескость структуры бактериальной клетки обеспечивается:
А. Капсулой;
Б. Клеточной стенкой;
В. Цитоплазматической мембраной;
Г. Жгутиками.
15. Форма бактерий определяется строением ее:
А. Пилей;
Б. Цитоплазматической мембраной;
В. Клеточной стенкой;
Г. Всех выше перечисленных компонентов.
Занятие №2
ТЕМА: Структура прокариотической клетки. Сложные