Анатоксины, химические и ассоциированные вакцины.
Анатоксины- препараты, полученные из бактериальных экзотоксинов, лишенных ядовитых свойств, но сохранившие иммуногеные свойства. Метод получения анатоксинов предложил в 1923 г. французский ученый Г. Рамон. Для приготовления анатоксина к экзотоксину прибавляют 0,3-0,4% формалина и выдерживают при температуре 37-40°С в течение 3-4 недель до полного исчезновения токсических свойств.
Анатоксины выпускают в виде нагивных препаратов или в виде очищенных адсорбированных на адъювантах концентрированных препаратов.
Анатоксины применяют для создания искусственного активного антитоксического иммунитета. Применяются анатоксины, стафилококковый нативный и очищенный адсорбированный, холероген-анатоксин; адсорбированный дифтерийный (АД, АД-м), дйфтерийно-столбнячный (АДС, АДС-м), трианатоксин (ботулинический типов А, В, Е), тетра-анатоксин (ботулинический типов А, В, Е и столбнячный).
Химические вакцинысодержат извлеченные из микробных клеток и из вирусов антигены, обладающие протективным (защитным) действием. Таким образом, в отличие от живых и убитых вакцин, являющихся корпускулярными, химические вакцины не содержат микробных клеток или цельных вирионов. Их можно назвать молекулярнодисперсными.
Преимуществом химических вакцин является то, что они не содержат балластных веществ, они менее реактогенны, то есть вызывают меньше побочных реакций.
Примеры химических вакцин: брюшнотифозная - содержит О-антиген; холерная (О-антиген); менингококковая - содержит полисахаридный антиген; сыпнотифозная - содержит поверхностный растворимый антиген из риккетсий Провацека. Вирусные субъединичные (расщепленные) вакцины содержат наиболее иммуноленные антшены вирусов. Например, гриппозная вакцина (АГХ) содержит гемагглютинин и нейраминидазу.
Химические вакцины для повышения иммуногенности адсорбируют на адъюванте (гидроксиде алюминия). Адъювант укрупняет антп-генные частицы, замедляет резорбцию антигена, удлиняя ею действие. Кроме того, адъювант является неспецифическим стимулятором иммунного ответа.
Ассоциированные вакцинысодержат антигены, разные по своей природе. Адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина (АКДС) содержит инактивированную коклюшную вакцину, дифтерийный и столбнячный анатоксины, адсорбированные на гидроксиде алюминия.
Антитоксические сыворотки.
Антитоксические сывороткиполучают путем многократной иммунизации (гипериммунизации) лошадей, от которых можно получить достаточно большое количество крови. Иммунизацию проводят сначала анатоксином, затем токсином. Сыворотку крови подвергают очистке от балластных белков методом ферментирования и диализа ("Диаферм").
Силу антитоксических сывороток измеряют в международных единицах (ME) по способности нейтрализовать определенную дозу токсина. При практическом применении антитоксических сывороток их назначают не в весовых или объемных единицах, а в ME.
Сыворотки вводят внутримышечно, подкожно, иногда внутривенно. Поскольку антитоксические сыворотки являются гетерологичными, введение их производится по Безредка.
Наиболее эффективно раннее применение лечебных сывороток, когда токсин еще не связался с чувствительными клетками.
Антитоксические сыворотки применяются при токсинемических инфекциях. На практике используются сыворотки: противодифтерийная, противостолбнячная, противоботулиническая, противогангренозная.
Иммуноглобулины.
Для очистки и концентрации иммунных сывороток используют метод, основанный на разделении белковых фракций сывороток и выделении активных иммуноглобулинов-этиловым спиртом при низкой температуре (метод водно-спиртового осаждения на холоде). Препараты иммуноглобулинов для внутривенного введения получают путем ферментативного гидролиза с химической модификацией, с использованием более мягких, по сравнению с этанолом, осадителей, ионообменной хроматографией.
Исходным материалом для получения гетерологичных иммуноглобулинов служит сыворотка или плазма крови гипериммунизированных животных. Таким образом получены иммуногло-булины: противосибиреязвенный, лептоспирозный, антирабический (против бешенства), против клещевого энцефалита. Преимуществом гетерологичных иммуноглобулинов является возможность получения препарата с более высоким титром антител, недостатком - риск аллергических реакций, в связи с чем эти препараты вводят по Безредка.
Материалом для приготовления гомологичных иммуноглобулинов служит плазма крови человека. Нормальный иммуноглобулин, называемый также противокоревым, получают из крови доноров или плацентарной крови. Поскольку исходным сырьем при промышленном изготовлении иммуноглобулина является плазма большого числа доноров (не менее 5000 человек), препараты содержат широкий набор антибактериальных, антитоксических и противовирусных антител. Нормальный иммуноглобулин используется для экстренной профилактики и лечения кори, коклюша, менингококковой инфекции, полиомиелита, скарлатины, гепатита, а также во всех случаях иммунодефицитных состояний, связанных с недостаточностью антител.
Нормальные иммуноглобулины обладают способностью связывать гистамин (гистаминопексия). Эта способность снижена у больных бронхиальной астмой. На практике применяются препараты -аллерглобулин и гистоглобулин для лечения больных бронхиальной астмой, экземой, нейродермитами.
Нормальный иммуноглобулин для внутримышечного введения представляет собой 10-16% белковый раствор, для внутривенного введения - 5% раствор.
Донорские иммуноглобулины направленного действия получают или путем отбора образцов донорской крови с высоким титром соответствующих антител, или путем предварительной иммунизации доноров. Применяются иммуноглобулины направленного действия для экстренной профилактики и лечения столбняка, клещевого энцефалита, гриппа, стафилококковой инфекции.
В качестве средств для создания пассивного иммунитета возможно применение препарата, полученного из сыворотки молока иммунизированных коров. Например, лактоглобулин, полученный из сыворотки молока коров, иммунизированных дизентерийными палочками, применяется путем, приема внутрь для лечения детей, больных дизентерией.
В будущем возможно применение для создания пассивного иммунитета моноклональных антител, полученных с помощью гибридом из клеток человека. Такие препараты будут максимально специфичны при минимальном риске осложнений.
Интерфероны.
Интерферон - белок, вырабатываемый клетками в организме, а также культурами клеток. Интерферон подавляет развитие вируса в клетке. Явление интерференции заключается в том, что в клетке, зараженной одним вирусом, вырабатывается белок, подавляющий развитие других вирусов. Отсюда название - интерференция (лат. inter - между + ferens - переносящий). Интерферон открыли А. Айзеке и Дж. Линденман в 1957 г.
Защитное действие интерферона оказалось неспецифическим в отношении вируса, так как один и тот же интерферон защищает клетки от разных вирусов. Но он обладает видовой специфичностью. Поэтому в организме человека действует тот интерферон, который образован клетками человека.
В дальнейшем было обнаружено, что синтез интерферона в клетках может быть индуцирован не только живыми вирусами, но и убитыми вирусами, бактериями. Индукторами интерферона могут быть некоторые лекарственные средства.
В настоящее время известно несколько интерферонов. Они не только препятствуют размножению вируса в клетке, но и задерживают рост опухолей и оказывают иммуномодулирующее действие, то есть нормализуют иммунитет.
Интерфероны разделяют на три класса: альфа-интерферон (лейкоцитарный), бета-интерферон (фибробластный), гамма-интерферон (иммунный).
Лейкоцитарный а-интерферон продуцируют в организме в основном макрофаги и В-лимфоциты. Донорский препарат альфа-интерферона получают в культурах донорских лейкоцитов, подвергнутых действию индуктора интерферона. Применяется как противовирусное средство.
Фибробластный бета-интерферон в организме продуцируют фибробласты и эпителиальные клетки. Препарат бета-интерферона получают в культурах диплоидных клеток человека. Обладает противовирусным и противоопухолевым действием.
Иммунный гамма-интерферон в организме продуцируют, в основном, Т-лимфоциты, стимулированные митогенами. Препарат гамма-интерферо-на получают в культуре лимфобластов. Обладает иммуностимулирующим действием: усиливает фагоцитоз и активность естественных киллеров (NK-клеток).
Продукция интерферона в организме играет роль в процессе выздоровления больного инфекционным заболеванием. При гриппе, например, продукция интерферона возрастает в первые дни заболевания, в то время как титр специфических антител достигает максимума только к 3-й неделе.
Способность людей продуцировать интерферон выражена в разной степени. "Интерфероновый статус" (ИФН-статус) характеризует состояние системы интерферона:
1) содержание интерферонов в крови определяется по их действию на определенные виды вирусов;
2) способность лейкоцитов, полученных от пациента, вырабатывать интерферон в ответ на действие индукторов.
В лечебной практике применяют альфа-, бета-, гамма-интерфероны естественного происхождения. Получены также рекомбинантные (генноинженерные) интерфероны: реаферон и другие.
Эффективным в лечении многих заболеваний является применение индукторов, способствующих выработке в организме эндогенного интерферона.