Дифференциация холерных вибрионов

Название вибрионов

Ферментация

Тест на аце-тилме-тилкар-бинол

Агглю-тина-ция ку-риных эритро- цитов

Чувст-витель-ность к 30ЕД поли-микси-на

Гемо-лиз эрит-роци-тов бара-на

Агглютинация

саха-розы

ман-нозы

араби-но-зы

О1 холер-ной сыво-рот-кой

О139 холер-ной сыво-рот-кой

Огава АВ

Ина-ба АС

Гико- шима АВС

V.cholerae O1 биовар cholerae

+

+

-

-

-

S

-

+

-

+

+

+

--«--eltor

+

+

-

+

+

R

± *

+

-

+

+

+

V.cholerae O139

+

+

-

+

+

R

±

-

+

-

-

-

* - V.cholerae O1 Hly^-tox+ -эпидемический, содержит Vct –ген,

Hly⁺tox- неэпидемический, не содержит Vct-ген

6) Учесть, записать и зарисовать результаты пробы для обнаружения ацетилметилкарбинола (ацетоина) в глюкозо-фосфатном бульоне.

биовар cholerae

биовар eltor

7) Изучить и зарисовать результат определения чувствительности выделенной культуры к диагностическим холерным фагам «С» и «Еltor».

8) Выявить и зарисовать результат определения чувствительности выделенной культуры к полимиксину.

______________________________	______________________________

9) Произвести учет развернутой реакции агглютинации выделенной культуры с сыворотками Огава и Инаба для определения серовара.

								РА с сывороткой Огава (АВ)
								РА с сывороткой Инаба (АС)

Сопоставить свойства исследуемой культуры вибрионов с данными таблицы и определить вид, биовар, серовар (см. таблицу).

Заключение: из исследуемого материала (испражнения, рвотные массы больного) выделен Vibrio __________, О_______, биовар _________, серовар ___________.

10. Перечислить факторы патогенности холерного вибриона:_______________ ____________

11. Описать молекулярный механизм действия экзотоксина-холерогена: __________________

12. Дополнить схему исследования материала от больного холерой.

Исследуемый материал:

Экспресс-методы

РИФ

Реакция иммобилизации вибрионов

Генетические методы ПЦР

Бактериологический метод:

I

II   III

Гемолиз эритроцитов

Развернутая РА с сыворотками

Огава Инаба

13. Изучить препараты, используемые для диагностики, лечения и профилактики холеры (диагностические сыворотки, холерные фаги, антибиотики, холерные вакцины.

14. Дать характеристику холерным вакцинам:

Анатоксин –холероген ______________

____

Комбинированная вакцина: О-Аг холерного вибриона + холероген-анатоксин ____

________

*Таблетированная форма холерной химической бивалентной вакцины: протективные О-антигены V.cholerae сероваров Инаба и Огава +различные ферменты разработана в России, включена в национальный календарь прививок по эпидемическим показаниям.

15. Промикроскопировать фиксированный препарат из чистой культуры вакцинного штамма Bacillus anthracis, окрашенный по Граму («бамбуковая трость»), и зарисовать.

Рис. 1. Препарат-мазок из чистой культуры вакцинного штамма Bacillus anthracis. Окраска по Граму.

16. Изучить и зарисовать культуральные свойства B. anthracis на МПА и в МПБ.

17. Промикроскопировать демонстрационный препарат, приготовленный из культуры B. anthracis на МПА, с добавлением пенициллина, и выявить образование протопластов (тест «жемчужное ожерелье»). Препарат зарисовать.

Рис. 4. Протопласты B. аnthracis, сформированные в результате действия пенициллина (тест «жемчужное ожерелье»)

18. Поставить реакцию термопреципитации по Асколи, учесть результаты реакции и зарисовать, дать заключение.

а б в

Рис. 3. Реакция термопреципитации по Асколи:

а – опыт (преципитирующая сибереязвенная сыворотка + исследуемый экстракт);

б – контроль АТ (преципитирующая сибереязвенная сыворотка + 0,85% раствор NaCl);

с – контроль АГ (нормальная сыворотка + исследуемый экстракт).

Заключение: в исследуемом экстракте сибиреязвенный АГ ________________

19. Изучить по таблице ключевые признаки, используемые при идентификации B. anthracis.

Таблица