Перечень конкретных учебно-целевых вопросов

1. Плазмодии малярии. Морфология. Циклы развития. Патогенез малярии, иммунитет. Лабораторная диагностика. Профилактика. Препараты для лечения.

2. Токсоплазмы, бабезии, лямблии, лейшмании, трипаносомы, трихомонады, амебы, балантидии, микроспоридии. Морфология и культивирование. Патогенез. Лабораторная диагнос­тика. Препараты для лечения. Профилактика.

Основные методы лабораторной диагностики протозойных инфекций

Микроскопический метод направлен на выявление па­разитов в нативных и окрашенных препаратах. Материалом для исследования служат кровь, пунктаты грудины или лимфатических узлов, спинномозговая жидкость, соскоб с кожных элементов, фекалии, дуоденальное содержимое, отделяемое слизис­той оболочки наружных половых органов или мочеиспускательного канала. Простейшие можно обнару­жить как в мазках, так и в гистологических препаратах, изготовленных из поражен­ных тканей. Разработано значительное число методов окраски простейших, среди которых наиболее часто применяется метод Романовского-Гимза.

Культуральный метод заключается в посеве исследуемого материала на среды, содержащие кровь или нативную сыворотку, яичный белок, углево­ды, аминокислоты и другие вещества (рН сред 7,0-7,6). Культивирование большинства простейших осуществляют обычно при 37⁰ С, лейшманий и трипаносом при 20-26⁰ С. Результаты посевов учитывают визуально и микроскопическим методом ( препарат «раздавленная» капля) через 24, 48, 72, 120 часов. Дизентерийные амебы, балантидии, трихомонады, хиломастиксы проще выявить микроскопическими методами, однако при необходимости применяют культуральное исследование.

Серологический методпри протозойных инфекциях имеет вспомогательное значение. Применяется РА (американский трипаносомоз), РП (американский трипаносомоз, амебиаз), РСК (американский трипаносомоз, токсоплазмоз, висцеральный лейшманиоз, амебиаз), РИФ (американский трипаносомоз, малярия, токсоплазмоз, висцеральный лейшманиоз, амебиаз), РНГА (ток­соплазмоз), ИФА (токсоплазмоз, тропическая малярия, амебиаз, кожный и висцеральный лейшманиозы, американский трипано­сомоз).

Аллергический метод – кожные аллергические пробы применяются редко, обычно для под­тверждения диагноза кожного лейшманиоза (проба с лейшманином, реакция Монтенегро) и токсоплазмоза (проба с токсоплазмином).

Биологический метод (биопроба)применяется для подтверждения диагноза ряда протозоо­зов, а также в научных целях. Чувствительными животными для дизентерийных амеб и балантидий являются 2-3-недельные крысята, морские свинки, котята, щен­ки, золотистые хомячки; для лямблий — мыши; для лейшманий белые мыши и хомяки; для американских трипаносом - морские свинки; для африканских трипаносом – мартышки; для токсоплазм - белые мыши. Заражение животных осуществляют па­рентерально, в слепую кишку при лапаротомии, через длинный пластмассовый зонд или путем скармливания животным исследуемого материала.

В течение 30 дней после заражения микроскопическому исследованию подвергают кровь животных, мазки-отпечатки из органов или гистологические препараты из пора­женных тканей.

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРОТОЗОЙНЫХ ИНФЕКЦИЙ

Малярия

Возбудителями тропической малярии являетсяPlasmodium falciparum, трехдневной малярии - Plasmodium vivax, четырехдневной ма­лярии -Plasmodium malariaeи трехдневной или овале-малярии - Plasmodium ovale. Малярийные плазмодии претерпевают половой цикл развития в организме комара рода Anophelesи бесполый цикл (шизогония – рис.41) — в орга­низме человека, поражая сначала клетки печени (тканевая шизогония), а затем эритроциты (эритроцитарная шизогония).

Микроскопический метод.Кровь на наличие плазмодиев малярии исследу­ют на стадии эритроцитарной шизогонии путем микроскопии обычных мазков и толстой капли, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Плазмодии, ци­топлазма которых окрашена в голубой цвет, а ядро в вишнево-красный, находят в эритроцитах.

Бесполые (эритроцитарные) формы па­разитов имеют некоторые морфологические особенности. В частности, мерозоит представляет собой круглую или овальную форму с небольшим участком цитоплазмы около ядра; кольцевидный трофозоит - одноядерную форма суз­ким ободком цитоплазмы, окружающим небольшую вакуоль; амебовидный трофозоит - одноядерную форму с различным количеством и величиной псевдоподий; шизонт содержитдва или несколько ядер; морула характеризуется полным разделением ядра и цитоплазмы на мерозоиты.

Половые формы плазмодиев (гаметоциты или гамонты) не содержат вакуолей и псевдоподий. Мужские (микрогаметоциты) и женские (макрогаметоциты) формыотличаются по величине и структуре ядра, интенсивности окраски цитоплазмы и размерам.

При микроскопии тонкого мазка при малярии находят обычно кольцевидные трофозоиты. У P. vivax, P. malariae, P. оvale ониимеютразмеры от 2 до 4 мкм, занимают около 1/3 диаметра эритроцита. Ядра у трофозоитов P. vivax и P. malariaeкруглые, у P. ovale — неправильной формы, крупные; ободок ци­топлазмы ровный, неширокий, суживается к ядру. Молодые кольцевидные трофозоиты P. falclparumмелкие (1,25-1,50 мкм), занимают примерно 1/6 часть диаметра эритроцита, имеют маленькое круглое ядро с тонким ободком цитоплазмы. Взрослые кольцевидные трофозоиты более крупные, занимают 1/3 диаметра эритроцита, ободок цитоплаз­мы толстый, резко суживающийся к ядру.

Амебовидные трофозоиты P. vivaxотличаются разнообразием форм, размеров, наличием одной или нескольких псевдоподий, вакуолей, круглого или овального ядра, пигмента в виде темно-коричневых цитоплазматических зерен различной величины и формы. Амебовидные трофозоиты P. malariaeокруглые и овальные (нередко ввиде ленты поперек эритроцита с продолговатым или вытянутым ядром), с короткими и широкими псевдоподиями, более темной цитоп­лазмой ипигментом, ядром непра­вильной формы.. Аме­бовидные трофозоиты P.falciparumв видекруглых или

Рис. 41. Основные стадии эритроцитарной шизогонии малярийных плазмодиев

овальных форм лишены вакуоли, имеют ядро круглой или неправильной формы, пигмент черного цвета, расположенный компактно, однако они, как правило, в периферической крови не обнаруживаются. Мо­лодые трофозоиты P. ovaleимеют кольцевидную форму, бо­лее взрослые сходны с P. malariae.

Размеры шизонтов у возбудителей малярии увеличиваются по нарастающей в ряду P.vivax, P. ovale, P.falciparum.

Морула P. vivaxсодержит обычно от 14 до 16 беспорядочно расположенных мерозоитов, между которыми лежат глыбки пигмента. В моруле P. malariaeоколо 8 крупных мерозоитов, расположенных в виде розетки; в моруле P.falciparum8-24 мелких мерозоитов, занимающих часть эритроцита; в моруле P. ovaleоколо 8 крупных мерозоитов с ядром неправильной формы. Гаметоциты Р. vivax(крупные), P. malariae (мелкие) и Р.ovaleокруглой или овальной формы;глыбки пигмента крупные, равномерно расположены в цитоплазме гаметоцитов. В женских гаметоцитах у края цитоплазмы обнаруживают компактное ядро темно-голубого цвета. Расположенное центрально ядро мужских гаметоцитов розовато-фиолетового цвета, крупное, рыхлое. Га­метоциты этих видов плазмодиев появляются и ис­чезают из периферической крови вместе с трофозоитами. Гаметоциты P.falciparumимеютхарактерную полулунную форму с ядром, расположенным в средней части цитоплазмы (у женских форм оно небольшое и компактное, у мужских - крупное и рыхлое). Пигмент окружает ядро в виде коротких палочек. Стадия развития гаметоцитов P.falciparumв эритроците существенно превышает длительность шизогонии. Эти гаметоциты выявляются в перифе­рической крови на 8-10 день после появления кольцевид­ных трофозоитов, продолжая поступать в кровь через несколько недель после их исчезновения на фоне отсутствия клинических симптомов малярии..

Эритроциты, пораженные P. vivax и P. ovale, увеличиваются в диаметре до 10-12 мкм, хуже окрашиваются по Романовскому —Гимзе; эритроциты, пораженные P. ovale, могут приобретать неправильную форму, иметь бахромчатый край. Морфология эритроцитов, содер­жащих P. malariaeи P. falciparum, не меняется.

В эритроцитах, содержащих P. vivaxна различных стадиях раз­вития, выявляются множественные мелкие азурофильные зерна (зер­нистость Шюффнера), при наличии в эритроцитах P. ovaleзерна редкие и крупные (зернистость Джеймса), при обнаружении в эритроцитах кольцевидных трофозоитов P.falciparumможно выявить не­большое количество крупных азурофильных зерен (зернистость Маурера), а в тех случаях, когда возбудителем является P. malariae, в эритроцитах выявляют мелкую зернистость Циманна.

Морфология возбудителей малярии в толстой капле.Кольцевид­ные трофозоиты P. vivax, P. ovale, P. malariae обычно имеют оди­наковую величину, однако в толстой капле они часто дефор-

мируются, превращаясь в форму запятой или восклицательного знака; цитоплазма при этом концентрируется около ядра в виде округлого или треугольного комочка. Наряду с кольцевидными трофозоитами можно найти другие формы плазмодиев и определить вид воз­будителя.

Аналогичные превращения происходят и с кольцевидными трофо­зоитами P. falciparum, часть из которых сохраняет свою форму. Цитоплазма может разрываться, располага­ясь с двух сторон от ядра в виде «крыльев ласточки», нередко находят раздвоенные ядра. На других стадиях развития плазмодии малярии в периферической крови обычно не выявляются.

Для амебовидных трофозоитов P. vivaxв толстой капле характерна деформация их цитоплазмы в виде двух или нескольких комочков, располагающихся около ядра.

Трофозоиты P. malariaeв мазке выглядят как компакт­ные овальные или округлые образования с большим количеством пигмента.

На стадии морулы различные виды плазмодиев имеют разное количество мерозоитов и форму морулы. У P. malariaeв толстой капле морула сохраняет форму розетки, шизонты и морулы P. ovaleнапоминаютаналогичные формы P. malariae, однако ядро более крупное, пигмента меньше, встреча­ются неразрушенные пораженные эритроциты. При малярии, выз­ванной P. vivax, пораженные эритроциты так же не всегда раз­рушаются, сохраняется зернистость Шюффнера. У P. ovale, в отличие от P. vivax,ядра крупные, неправильной формы, отсутствуют крупные «разорванные» амебовидные трофозоиты, мерозоиты круп­ные и их меньше в моруле.

Женские гаметоциты (гамонты) P. vivax и P. malariaeв толстой капле не удается отличить от взрослых трофозоитов. Мужские га­метоциты имеют крупное ядро, окруженное узким обод­ком бледно-голубой цитоплазмы с рассеянными по ней зернами пигмента. Гаметоциты P. falciparumимеют характерную полулун­ную форму.

Серологический метод -определение антител к плазмодиям малярии с помощью РИА или ИФА с диагностическими целями проводится редко.

Генодиагностика - ПЦР.

Криптоспоридиоз

Криптоспоридии (Cryptosporidium parvum, Cryptosporidium muris) вызывают холероподобное заболевание или воспаление легких, преимущественно у лиц, страдающих иммунодефицитами, в частности, ВИЧ-инфекцией.

Материалом для исследования являются испражнения, биоптаты слизистой оболочки кишечника, желчных протоков, желч­ного пузыря, мокрота и биоптаты легочной ткани. Основной метод диагностики - мик­роскопия исследуемого материала.

Микроскопический методнаправлен на обнаружение ооцист в мазках из материала от больного, окрашенных по Цилю-Ниль­сену.Ооцисты криптоспоридий представляют собой округ­лые образования диаметром около 5 мкм, они кислотоустойчивы и поэтому окра­шиваются в красный цвет, тогда как другие микроорганизмы - в голубой.

Ооцисты криптоспоридий или их антигены в исследуемом материале можно также выявить с помощью РИФ и ИФА.

Токсоплазмоз

Возбудитель токсоплазмоза (Toxoplasma gondii)является внутрикле­точным паразитом, поражающим практически все органы и ткани теплокровных животных, птиц и человека.

Исследованию на токсопламоз подвергают пунктат лим­фатических узлов, спинномозговую жидкость, кровь, гистологи­ческие срезы лимфатических узлов, миндалин, кусочки органов трупа, головной мозг, печень, селезенку, легкие, плаценту и околоплодную жидкость.

Микроскопический метод– обнаружение токсоплазм в мазках из материала от больного, окрашенных по Романовскому-Гимзе.Токсоплазмы имеют полулунную или аркообразную фор­му, размеры 4-7х 2-4 мкм, один из концов простейшего заострен, другой закруглен. Цитоплазма токсоплазм голу­бого цвета, ядро рубиново-красного цвета располагается в центре паразита, занимая 1/3-1/4 цитоплазмы (рис. 42).

Биопроба -заражение материаломот больных белых мышей, у которых развивается острая форма токсоплазмоза, при этом паразиты обнаруживаются в перитонеальном экссудате, реже во внутренних органах. Через 2-3 недели в головном мозге появляются цисты токсоплазм, которые можно обнаружить при микроскопии нативных или окрашенных по Романовско­му-Гимзе препаратов.

Рис. 42. Возбудитель токсоплазмоза (Toxoplasma gondii)

Серологический метод -постановка реакции с красителем Сэбина—Фельдмана (РСФ - антиген-нейтрализующая реакция, основанная на утрате токсоплазмами способности прижиз­ненно воспринимать окраску после воздействия специфических антител), РИФ, РСК, РНГА с парными сыворотками крови больных с целью определения антител к токсоплазмам. Применяется также аллергическая проба с токсоплазмином.

Аллергодиагностика –постановка внутрикожной аллергической пробы с токсоплазмином выявляет наличие сенсибилизации организма в резуль­тате инфицирования токсоплазмами. Результаты аллергической пробы учитывают в сочетании с данными серологического исследования. Поло­жительная проба с токсоплазмином при отрицательных результа­тах серологических реакций указывает на давно перенесенную ин­вазию; положительная РИФ в низких титрах в сочетании с от­рицательной РСК свидетельствует о затухании процесса; све­жая инфекция характеризуется наличием антител, выявляемых с помощью РИФ при отрицательных РСК и аллергической пробе. Диагноз врожденного токсоплазмоза ставят при наличии типичных клинических прояв­лений и нарастания титра специфических антител у ребенка в сочетании с положительными результатами серологических реак­ций у матери.

Трипаносомоз

У человека трипаносомоз описан в 2 формах - африканс­кой (сонная болезнь) и американской (болезнь Шагаса).

Возбудителями сонной болезни являются Trypanosoma bruceiвариант gambienseи Trypanosoma brucei вариант rhodesiense, болезни Шага­са - Trypanosoma cruzi. Морфологически эти три вида трипаносом сходны между собой.

Материалом для исследования являются кровь, спинномозго­вая жидкость, пунктат лимфатических узлов, грудины, кусочки пораженных тканей.

Микроскопический метод –выявление трипаносом в мазках из исследуемого материала, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Трипаносомы располагаются внеклеточно, имеют размеры 17-30х1,4-2,0 мкм, крас­но-фиолетовое ядро, расположенное в средней части тела простейшего; на заднем конце трипаносомы имеется блефаропласт, от которого отходит волнообразный жгутик, направляющийся к на­ружной оболочке трипаносомы и далее - до переднего конца трипаносомы. Между телом трипаносомы и жгутиком находится про­зрачная ундулирующая мембрана. Сзади от блефаропласта расположен палочковидный или круглый кинетопласт (рис. 43).

При острой стадии болезни Шагаса трипаносомы можно обна­ружить в крови. При хронической форме заболевания микроскопическое исследование малоинформативно из-за небольшого количества трипаносом в крови.

Серологический метод(РСК, РП, РА, РИФ, ИФА для определения антител в крови больных)применяется при болезни Шагаса.

Биопроба –заражение морских свин­ок (Т. cruzi),белых мышей или крыс (Т.rhodesiense), мартышек (Т.gambiense)с последующим микроскопическим исследованием окрашенных по Романовскому-Гимзе мазков-отпечатков из внутренних органов с целью выявления трипаносом.

Рис. 43. Возбудитель трипаносомоза (Trypanosoma gambiense)

Лейшманиоз

Возбудителем кожного лейшманиоза является Leishmania tropica, вис­церального лейшманиоза - Leishmania donovani. Лейшмании паразитируют у позвоночных животных и челове­ка в лейшманиальной (внутриклеточной, амастиготной безжгути­ковой) форме. Другим хозяином и переносчиком яв­ляются москиты, у которых паразиты находятся в лептомонадной (промастиготной, жгутиковой) форме. Жгутиковые формы образуются также при куль­тивировании лейшманий на искусственных питательных средах.

Микроскопический метод(микроскопия мазков костного мозга, пунктата лимфатических узлов и селезенки, окрашенных по Романовскому—Гимзе) являетсянаиболее информативным в диагностике висцерального лейшманиоза. Амастиготы расположены в цитоплазме гистиоцитов, имеют овальную или круглую форму размером 3-5x1-3 мкм, цитоплазму серо-голубого цвета, центрально расположенное ядро красно-фиолетового цвета и лежащий рядом с ним ярко окрашенный кинетопласт.

Культуральный метод– посев на средуNNN, культивирование при 22 °С в течение 8-40 дней. В препарате «раздавленной» капли лейшмании удлиненной формы (10-12 мкм), имеется жгутик (рис. 44).

Биопроба –заражение лабораторных животных, микроскопия окрашенных по Романовскому-Гимзе мазков-отпечатков из внутренних органов с целью поиска паразита.

Серологический метод -постановкаРИФ, РСК, ИФА с целью определения антител к лейшманиям с диагностическими и эпидемиологическими целями. Чувствительным, специфичным, экономичным и высокоинформативным является ИФА (диагностический титр 1:400).

Рис. 44. Возбудитель лейшманиоза - Leishmania donovani

Лямблиоз

Возбудитель лямблиоза — Giardia lamblia (Lamblia intestinalis)имеет грушевидную форму с билатеральной симметрией, встречаясь как в вегетативной форме в дуоденальном содер­жимом или жидком кале, так и в виде цист исключительно в кале.

Материалом для исследования служат дуоденальное содержимое или фекалии.

Микроскопический метод.В нативных препаратах лямблии обладают плавной поступательной и враща­тельной подвиж­ностью вокруг продольной оси. Передний конец лямблий широкий, закруглен­ный с присасывательным диском в виде светлого округлого участка; задний (хвостовой) - вытянутый, заостренный, загнутый на выпуклую дор­сальную сторону; размеры паразита 10-28х 8-12 мкм .

В окрашенных препаратах в ци­топлазме вегетативных форм лямблий расположены 2 симметрично расположенных ядра, внутри тела по средней линии 2 аксостиля, отходящих от базальных зерен вблизи ядер и выходящих наружу в виде хвостовых жгутиков на заднем конце паразита (рис.45). От самостоятельных базальных зерен отходят передняя, средняя и вентральная пары жгутиков, а между задней и средней частями тела лямб­лий располагаются медиальные или парабазальные тела серповидной или треугольной формы.

Цисты лямблий при окраске раствором Люголя имеют правильную овальную форму, размеры 7-17х 5-12 мкм, ко­ричневый или желтый цвет, тон­кую, гладкую, двуконтурную оболочку, в передней части - слабо очерченные ядра (2 в незрелых, 4 в зрелых цистах), внутри цитоплазмы - нити аксонем и свернутые жгу­тики, а в задней части - серповидные парабазальные тела. Могут встречаться более мелкие погибшие или дегенеративные цисты серо-голубого цвета. Более четкая микрокартина наблюдается в препаратах, окрашенных желез­ным гематоксилином.

Рис. 45. Возбудитель лямблиоза - Giardia lamblia

Трихомониаз

Трихомонады вызывают у человека кишечный трихомоноз (возбудитель Trichomonas hominis,паразитирует только в вегетативной форме и обнаруживается лишь в жидких фекалиях)и мочеполовой трихомониаз (возбудитель Trichomonas vaginalis). Трихомонады цист не образуют.

Материалом для исследования являются жидкие фекалии, выделения из влагалища, шейки мат­ки, мочеиспускательного канала, секрет предстательной железы.

Микроскопический метод- исследование нативных или окрашенных по Романовскому-Гимзе и по Граму пре­паратов.

В нативных препаратах Trichomonas hominis имеют веретенообразную форму с перед­ним закругленным и задним заостренным концом тела, размеры 5-10х5 мкм; движе­ния толчкообразные поступательные и вокруг продольной оси за счет пучка из 3-5 жгутиков, отходящих от переднего конца тела, и ундулирующей мембраны (расположена продольно, окружена аксиальной нитью, закан­чивается у заднего конца паразита в виде свободного концевого жгу­тика). Ундулирующая мембрана и концевой жгутик совершают периодические, волнообразные движения от переднего конца тела трихомонады к заднему. Ядро три­хомонад в нативных препаратах обнаружить не удается. В цитоплазме трихомонад обнаруживают бактерии, реже — эритроциты.

Аналогична морфология Trichomonas hominis в окрашенных препа­ратах. В передней части паразита расположен малозаметный цитостом и пузырьковид­ное ядро, впереди от него блефаропласты с отходящими от них жгутиками и аксиальной нитью c плохо заметной ундулирующей мембраны, с противоположной стороны от ядра - парабазальное тело. Жгутики трихомонад в окрашенных препаратах заметны мало. Сбоку от ядра вдоль тела трихомонады проходит аксостиль, заканчивающийся на заднем конце в виде длинного шило­видного выроста или хвоста.

Т. vaginalisимеют грушевидную или веретеновидную форму, длину 10-30 мкм. Ядро расположено в передней части широкого конца тела паразита, спереди ядра от блефаропластов отходит 4 одинаковых жгутика длиной, равной длине тела трихомонады; ундулирующая мембрана занимает переднюю половину длины тела и не имеет свободной концевой нити. На заднем конце трихомонады тонкий аксостиль выглядит в виде шипика. Со стороны, противо­положной аксостилю, ядро огибает удлиненная парабазальная фиб­рилла. В цитоплазме трихомонад находят многочислен­ные хроматоидные гранулы. Окрашенные трихомона­ды выглядят как округлые клетки с вытянутыми или треугольны­ми ядрами (рис. 46).

Культуральный метод.Кишечные трихомонады удается выделить путем посева испражнений на среду Рейса (сывороточный МПБ). Для культи­вирования Т. vaginalis используют среды Павловой (натрия хлорид, натрия фосфат, калия гидрофосфат, лошадиная сыворотка), Джонсона—Трассела (пептон, агар, цистеин солянокислый, мальтоза, печеночный экстракт, раствора Рингера, раствор метиленового синего, сыворотка человека или лошади, пенициллин и стрептомицин для подавления роста сопутствую­щей микрофлоры; рН 5,8-6,0) или на среде, содержащей МПБ, 1 % глюкозы и 5-10 % инактивированной сыворотки крови человека или лошади, антибиотики (пенициллин и стрептомицин) для подавления роста посторонней микрофлоры.

Рис. 46. Возбудитель трихомониаза- Trichomonas vaginalis

Амебиаз

Возбудителем амебиаза является дизентерийная амеба (Entamoeba histolytica),цикл развития которой состоит извегетативной стадии и стадии покоя (цисты). Описано 4 формы амебы в вегетативной стадии: 1) тканевая; 2) большая вегетативная (magnum)3) просветная - мелкая вегетативная (minuta)и 4) предцистная.

Острый амебиаз характеризуется наличием тканевой и большой ве­гетативной форм; у реконвалесцентов и цистовыделителей обычно обнаруживают просветную и предцистную формы. Просветные формы в дистальном отделе кишечника превращаются в цисты, способные выживать в неблагоприятных условиях.

Материалом для исследования являются испражнения, гной из пораженных органов, мокрота и др.

Микроскопический метод. При исследовании нативногопрепарата тканевая форма дизентерийной амебы выглядит в виде крупных сильно преломляющих свет образований неправильной формы, размером 18-45 мкм, с разграничением цитоплазмы на внутреннюю зернистую темную часть (эндоплазма) с пищеварительными вакуолями и наруж­ную светлую прозрачную (экзоплазма). При температуре 20 — 40⁰ С аме­бы подвижны за счет выброса псевдоподий.

В окрашенных препаратах тканевая форма дизентерийной амебы имеет вытянутое или округлое тело, размеры 12-45 мкм, светлую го­могенную эктоплазму и мелкозернистую темную эндоплазму, в которой видны темноокрашенные эрит­роциты, ядро размером 3-5 мкм с тонкой оболочкой, в центре которого расположена пяти­угольная кариосома (рис. 47).

Рис. 47. Дизентерийная амеба (Entamoeba histolytlca)

Просветная формадизентерийной амебы обнаруживается в значительных количествах в начальной стадии кишечного амебиаза или в конце периода обострения, в небольшом количестве у здоро­вых носителей. Эта форма имеет размеры 7-25 мкм. Разграничение тела амебы на эндо- и эктоплазму можно выявить только при образовании псевдоподий. В пищеварительных вакуолях эритроциты отсутствуют. В окрашенных препаратах просветная форма дизентерийной амебы имеет те же размеры, выявляется ядро диаметром 2-5 мкм, зерна периферического хро­матина образуют серповидное скопление под ядерной обо­лочкой, что позволяет дифференцировать тканевую и просветную форму.

Цистыдизентерийной амебы при обработке раствором Люголя имеют правильную округлую или овальную форму, глад­кую оболочку желтого или коричневого цвета, раз­меры 10-15 мкм; цитоплазма зрелых цист содержит 4 мелких ядра, незрелых – 1-2 крупных ядра правильной округлой формы с тонкой оболочкой и мелкую точечную или пятиугольную центрально расположенную кариосому. Цитоплазма незрелых цист содержит гликогеновые вакуоли светло-бурого цвета со смазанными контурами. В одном и том же препарате обнаруживают цисты различной степени зрело­сти.

Культуральный метод-посев исследуемых материалов на среды Павловой, с печеночным экстрактом и др.

Серологический метод -постановка РНГА, РА, РСК, РВИЭФ, ИФА для определения антител в крови больных, особенно для диагностики внекишечных форм амебиаза.

Балантидиаз

Возбудитель балантидиаза является Balantidium coli.Материалом для иссле­дования при этой инвазии служит кал.

Микроскопический метод –исследование нативных и окрашенных препаратов. Балантидии имеют большие размеры (30-200х20-55 мкм), яйцевидную форму, макронуклеус, цитостом, сократительную и пищеваритель­ные вакуоли, в которых находят эритроциты, лейкоциты или бактерии на разных стадиях переваривания. На поверхности балантидий обычно видны реснички с прилипшим к ним питательным субстатом.

Цисты В.coli,размером 40 — 65 мкм, в содержимом кишечника человека образуются редко, они имеют круглую форму, двухконтурную оболочку и бобовидное ядро.