Увеличение возможностей микроскопии при использовании явления флуоресценции

Виды микроскопии	Пространственное разрешение	Исследуемые параметры	Возможность иденти-фикации на уровне вида
Световая	³ 0,2 мкм	только морфологические	нет
Флуоресцент-ная	³ 0,05 мкм	морфологические и функциональные (например, жизнеспособность, синтез белка, нуклеиновых кислот и проч.) - за счет имеющихся природных и синтетических флуоресцирующих красителей, избирательно связывающихся с разными веществами (ДНК,РНК) и структурами клетки.   Рисунок 1. Препарат окрашен акридиновым оранжевым: живые микробы с высоким уровнем синтеза НК - зеленого цвета, погибшие микробы - оранжевые	да, при использовании иммунофлуоресцентного метода (флуорохром связан с антителами, специфичными исследуемому микробу. В этом случае визуализи-руются только связавшие метку микробы).   Рисунок 2. Препарат (аналогичный изображенному на рис.1) обработан антителами к E.coli, меченными ФИТЦ (флуорохром). Эти антитела связались только соответствующи-ми бактерииями, кокки и палочки др. вида не визуализируются. В пре-парате идентифицированы E.coli

В большинстве случаев микроскопические препараты из бактерий подвергают сложным методам окраски. К таким методам относятся метод Грама, Циля-Нильсена, Ожешко, Гинса-Бурри и другие (табл.4,5). Сложные методы основаны на различиях избирательности прокрашивания разных клеточных структур, что позволяет идетифицировать разные группы микробов по тому или иному признаку.

Таблица 4.