Реакции нейтрализации (pH) токсина антитоксической сывороткой

Этот тип иммунологической реакции основан на способности специфических антител — антитоксинов подавлять биологическую активность экзотоксинов бактерий.

Реакции нейтрализации токсина антитоксической сывороткой in vitro

1) Реакция флокуляции. Феномен флокуляции — помутнение — внешнее проявление образования комплекса экзотоксин (анатоксин) + антитоксин в оптимальных количественных соотношениях ингредиентов.

Реакция применяется:

- для определения специфической активности токсинов (анатоксинов) по стандартной антитоксической сыворотке (МЕ/мл), которая обозначается Ыглез ?1осси!а1юп15 (и — порог флокуляции) или иммуногенной единицей (ИЕ). и — это то количество токсина (анатоксина), которое даёт интенсивную, ^-инициальную» флоккуляцию с 1МЕ сыворотки;

- для титрования антитоксических сывороток по известному анатоксину или токсину (метод Рамона). Активность сывороток выражается в МЕ/мл принимается то минимальное количество сыворотки, которое даёт интенсивную «инициальную» флокуляцию с Ш анатоксина (токсина). Например, эта реакция применяется для определения активности дифтерийного, столбнячного, ботулинического, гангренозного анатоксинов и титрования противодифтерийной, противостолбнячной, протиаоботулинической, прогивогангренозной и др. антитоксических сывороток.

2) Выявление токсигенности возбудителя дифтерии в РП в геле по Оухтерлоне (см. раздел «РП).

Реакции нейтрализации токсина антитоксической сывороткой (in vivo)

1. Реакция нейтрализации на животных применяется:

- для определения специфической активности анатоксинов (дифтерийный, столбнячный и др.) по стандартной антитоксической сыворотке и по опытной дозе токсина. Активность анатоксинов выражается в единицах связывания (ЕС), ЕС -количество анатоксина, которое целиком связывается с ШЕ/мл антитоксической сыворотки;

- для идентификации бактерий (возбудители газовой анаэробной инфекции, столбняка, ботулизма и др.) по стандартной антитоксической сыворотке;

- для титрования антитоксических сывороток (противодифтерийная, противостолбнячная и др.) по стандартному токсину. Титрование — это определение количества антитоксинов в 1 мл сыворотки. Специфическая активность сывороток выражается в международных антитоксических единицах (МЕ). 1МЕ —минимальное количество сыворотки, которое способно нейтрализовать определенную дозу токсина, выражающуюся в стандартных единицах: смертельных, некротических или реактивных дозах, в зависимости от вида токсина и способа титрования.

Титрование антитоксических сывороток может производиться следующими методами:

Метод Эрлиха. Титрование антитоксических сывороток по известной смертельной (опытной) дозе токсина.

Проводится в 2 этапа:

1) определение опытной дозы токсина. Смертельная доза — это количество токсина, которое в смеси с 1МЕ стандартной сыворотки вызывает гибель 50 % взятых в опыт животных;

2) к различным разведениям испытуемой сыворотки добавляют опытную дозу токсина, инкубируют 45 минут и вводят животным. По результатам производят расчет

титра сыворотки.

Метод Ремера. Титрование антитоксических сывороток по известной некротической дозе токсина. Проводится в 2 этапа:

1) определение опытной некротической дозы токсина путём внутрикожного введения морской свинке различного количества токсина со стандартной сывороткой. Некротическая доза токсина — это его минимальное количество, которое в смеси с 1/50МЕ стандартной сыворотки вызывает на месте внутрикожного введения некроз на 4-5-и день;

2) к различным разведениям испытуемой сыворотки добавляют опытную дозу токсина и вводят внутрикожно морской свинке.

По результатам производят расчёт титра сыворотки. Так титруется противодифтерийная сыворотка.