Электродуговые лампы (Xe, Hg)

Электродуговые лампы (Xe, Hg)

1. Ртутные лампы имеют значительное излучение в ИК диапазоне

2. Ксеноновые лампы имеют значительное излучение в ИК диапазоне

3. Ртутные лампы имеют значительное излучение в УФ диапазоне

4. Ксеноновые лампы имеют значительное излучение в УФ диапазоне

5. Ртутные лампы имеют значительные пики, один из которых 546 нм

6. Ксеноновые лампы имеют значительные пики, один из которых 546 нм

Повреждающее действие света

1. Основное повреждающее (фототоксическое) действие УФ излучение вызывает из-за разрыва ковалентных связей и образования свободных радикалов

2. Основное повреждающее (фототоксическое) действие ИК излучение вызывает из-за разрыва ковалентных связей и образования свободных радикалов

3. Основное повреждающее действие ИК излучение вызывает из-за тепловой денатурации белков

4. Основное повреждающее действие УФ излучение вызывает из-за тепловой денатурации белков

4. Светофильтры (впишите названия фильтров)

1. Для регуляции потока света от Xe, Hg ламп используются _нейтральные_ фильтры

2. Для выделения узкой полосы спектра (монохроматического света с точностью до 1 нм) из излучения источника используются _интерфереционные_ фильтры

3.Учитывая комплиментарный характер субстрактивных цветов, для лучшей контрастности полупрозрачного образца, окрашенного в синий цвет, следует использовать желтый_ светофильтр

4. Человеческий глаз лучше всего воспринимает монохроматический свет желто-зеленого цвета ~555нм; темновое 515нм

Использование цвета

1. При просмотре изображения на мониторе компьютера используется __RGB(аддитивная)__ палитра

2. При публикации изображений на бумаге используется _CMYK(субстрактивная)__ палитра

3. Все цвета из аддитивной палитры могут быть воспроизведены при помощи субстрактивной палитры (Не верно)

Преломление

1. Покровное стекло нельзя разглядеть когда оно помещено в сосуд с иммерсионным маслом

2. Угол преломления луча зависит только от коэффициентов преломления двух сред

( нет, еще от длины волны)

Геометрическая оптика

1. Увеличение тонкой двояковыпуклой линзы зависит только от её фокусного расстояния (от радиуса кривизны) (нет, ещё от N и от расстояния до объекта)

2. Условием создания увеличенного изображения объекта на экране за тонкой двояковыпуклой линзой является расположение объекта на расстоянии __от -F до -2F__ от линзы и экрана на расстоянии __более 2F_____ от линзы с противоположной стороны

3. Условием формирования изображения на сетчатке глаза является _расхождение_ оптических лучей

4. Условием видимости мнимого изображения при использовании тонкой двояковыпуклой линзы является расположение объекта на расстоянии _меньше -F__ от линзы

Вопросы 2:

Геометрическая оптика

1. При монохроматическом освещении и использовании тонкого препарата при

открытой апертурной диафрагме невозможно точно сфокусировать микроскоп. Какой

тип(ы) аберрации могут присутствовать ? сферическая

2. При монохроматическом освещении невозможно сфокусировать края изображения. Какой тип(ы) аберрации присутствует ? Как можно скорректировать микроскоп для их

уменьшения ? Кома (закрыть апертурную диафрагму)

3. При монохроматическом освещении невозможно одновременно сфокусировать

центр и края изображения. Какая дисторсия присутствует ? Кривизна поля

Объективы

1. Числовая апертура объектива это мера угла, образуемого _крайними_

входящими в объектив лучами. (NA=n*sinθ)

2. Вам необходимо исследовать точные размеры клеток по всему полю зрения в

белом свете. Какой объектив Вы используете? Планапохромат

3. Вам необходимо исследовать очень тускло флуоресцирующий объект. Какой тип

объектива предпочтителен ? флуорит

4. Для освещения препарата используется УФ (355нм) свет в режиме эпи-

иллюминации. На что следует обратить внимание при выборе объектива, иммерсионного

масла ? тип иммерсии, используется ли эпи-иллюминация, прозрачность обьектива для УФ

5. Для электрофизиологического исследования Вы хотите использовать

инфракрасный осветитель и видеокамеру, какой конструкционный тип объектива лучше

выбрать, на что обратить внимание ? инвертированный

6. Вы собираетесь исследовать ультраструктуру цитоскелета клетки, какой объектив

следует выбрать ?

Типы объективов фирмы Лейка

C PLANпланахромат, не рекомендуется для использования с флуоресценцией

N PLANпланапохромат

N PLAN Lпланапохромат, большая рабочая дистанция

PL FLOUTARпланапохромат флуотар (подходит для флуоресцентной микроскопии)

PL FLOUTAR Lпланапохромат флуотар, большая рабочая дистанция

HCX PL APOпланапохромат для работы с конфокальным микроскопом

HCX PL APO L U-V-Iпланапохромат для работы с конфокальным микроскопом, большая рабочая дистанция,

УФ — видимый — ИК

Ахромат- хроматически скорректирован на красный (656) и синий (486) свет,

сферическая аберрация скорректирована для 540 нм

Флуорит– сделан из CaF2, прозрачен для близкого УФ, очень прозрачен в видимом

свете, обладает низкой дисперсией, обычно скорректирован хроматически и по

кривизне поля

Апохромат- полностью скорректирована хроматическая аберрация красный,

зелёный, голубой и синий цвета, сферическая аберрация скорректирована для

зелёного и синего, характеризуются высокой числовой апертурой (до 1.4). Однако не

очень высокое пропускание света

ПланАпохромат– то же, что Апохромат, но кривизна поля полностью

Скомпенсирована

Техники микроскопии:

Проходящий свет, тёмное поле, флуоресценция и ДИК микроскопия обычно не упоминаются

BD- тёмное поле при эпиосвещении

PH- фазовый контраст

L- большая рабочая дистанция

RC- контраст отраженного света

POL,P- Объективы без напряжения оптических элементов для поляризованного света

LMC- контрастирование по хоффману (модуляционный контраст)

/- Объектив не подходящий для эпииллюминации

3.Расшифруйте обозначения на следующих объективах, отметьте увеличение, толщину

покровного стекла, числовую апертуру, использование иммерсии и её тип

Дальше картинки объективов

Конденсоры

1. Для объективов < 20x следует использовать конденсор с NA _меньше_ 0,5

2. Для больших увеличений следует использовать конденсор с NA≥ 0,5

3. При этом, предпочтительно, чтобы NA конденсора был _равен_ NA объектива

Общее увеличение микроскопа должно лежать в пределах 500-1000 значений числовой апертуры выбранного объектива.

Меньшее увеличение – не использование разрешающей способности объектива

Большее увеличение – “пустое” увеличение, без соответствующей разрешающей способности.

Окуляры

1. Вы используете объектив 60х с NA=0,9. Вам необходимо получить

максимальную детализацию объекта, избежав «пустого увеличения». Какой/какие из

окуляров Вы выберете ? (2.5х 5х 7х 10х 15х 20х 25х)

2. При тех же условиях какие окуляры следует выбрать, если бинокулярная

насадка даёт увеличение 1.5x ? (2.5х 5х 7х 10х 15х 20х 25х)

6. При настройка микроскопа по методу Кёллера прежде всего надо:

1. Закрыть все диафрагмы

2. Открыть все диафрагмы

3. Увеличить яркость осветителя

Освещение по Кёллеру

Сфокусируйтесь на препарате

Конденсора

В полевой плоскости

6. Качество наблюдаемого изображения не удовлетворительно, при просмотре

плоскости осветителя видна пыль — назовите плоскости, которые нужно проверить на

наличие пыли. Апертурная диафрагма, задняя поверхность обьектива

7. Волновая оптика

1. Длина оптического пути зависит от расстояния, которое проходит луч света

2. Длина оптического пути зависит от коэффициента преломления

3. Волны, прошедшие разный оптический путь будут всегда отличаться по фазе

8. Согласно критерию Релея 2 точечных объекта можно различить, если образуемые

ими в плоскости изображения диски Айри находятся на расстоянии:

1. Половины длины волны

2. Длины волны

3. Первого дифракционного минимума (кольца)

4. Второго дифракционного максимума (кольца)

9. Известно, что для NA конденсора >= NA объектива, размер диска Айри = λ/2NA, а

первый максимум находится на расстоянии в 1.22 диаметра диска Айри. Рассчитайте каков теоретический предел разрешающей способности микроскопа, NA объектива которого = 1.3,

NA конденсора =1.4, использующего монохроматическое освещение с длиной волны

546nm ?

1. ~0,16 mkm

2. ~0,21 mkm

3. ~0,26 mkm

4. ~0,32 mkm

10. Будет ли возможным детектировать объект, размеры которого меньше предела

разрешающей способности? Можно детектировать

11. Глубина резкости микроскопа (Z) зависит от:

1. Длины волны – чем больше длина волны, тем меньше глубина резкости

2. Длины волны – чем меньше длина волны, тем меньше глубина резкости

3. Коэффициента преломления иммерсионной жидкости (n) - чем больше n , тем

меньше глубина резкости

4. Коэффициента преломления иммерсионной жидкости (n) - чем больше n , тем

Больше глубина резкости

5. Числовой апертуры объектива – чем больше числовая апертура тем больше глубина

резкости

6. Числовой апертуры объектива – чем больше числовая апертура тем меньше глубина

Резкости

12. Вам необходимо получить максимальную разрешающую способность от

оптической системы микроскопа. Для этого Вы используете:

1. Полихроматическое освещение (белый свет)

2. Монохроматическое освещение с большой длиной волны (красное)

3. Монохроматическое освещение с малой длиной волны (синее)

4. Объектив с высоким значением числовой апертуры

5. Объектив с низким значением числовой апертуры

6. Конденсор с большим, чем у объектива, значением числовой апертуры

7. Конденсор с меньшим, чем у объектива, значением числовой апертуры

8. Конденсор со значением числовой апертуры, примерно равным значению

Числовой апертуры объектива

9. Приоткроете полевую диафрагму

10. Прикроете полевую диафрагму

11. Приоткроете апертурную диафрагму конденсора

12. Прикроете апертурную диафрагму конденсора

Вопросы 4:

1. Фазово-контрастная микроскопия отличается следующими особенностями

1. Позволяет визуализировать амплитудные объекты

2. Позволяет визуализировать фазовые объекты

3. Визуализирует разницу только в толщине фазовых объектов

4. Визуализирует разницу только в коэффициенте преломления фазовых объектов

5. Визуализирует разницу в оптическом пути

6. Требует установки поляризатора и анализатора

7. Разрешающая способность зависит от ориентации объекта

8. Имеет артефакт на границы фаз – гало

9. Не позволяет точно измерить разницу оптического пути для протяжённых объектов из-за затенения

10. Использует только D – лучи (образовавшиеся в ходе дифракции на объекте)

2. DIC микроскопия (Номарский)

1. Позволяет визуализировать амплитудные объекты

Электродуговые лампы (Xe, Hg)

1. Ртутные лампы имеют значительное излучение в ИК диапазоне

2. Ксеноновые лампы имеют значительное излучение в ИК диапазоне

3. Ртутные лампы имеют значительное излучение в УФ диапазоне

4. Ксеноновые лампы имеют значительное излучение в УФ диапазоне

5. Ртутные лампы имеют значительные пики, один из которых 546 нм

6. Ксеноновые лампы имеют значительные пики, один из которых 546 нм

Повреждающее действие света

1. Основное повреждающее (фототоксическое) действие УФ излучение вызывает из-за разрыва ковалентных связей и образования свободных радикалов

2. Основное повреждающее (фототоксическое) действие ИК излучение вызывает из-за разрыва ковалентных связей и образования свободных радикалов

3. Основное повреждающее действие ИК излучение вызывает из-за тепловой денатурации белков

4. Основное повреждающее действие УФ излучение вызывает из-за тепловой денатурации белков

4. Светофильтры (впишите названия фильтров)

1. Для регуляции потока света от Xe, Hg ламп используются _нейтральные_ фильтры

2. Для выделения узкой полосы спектра (монохроматического света с точностью до 1 нм) из излучения источника используются _интерфереционные_ фильтры

3.Учитывая комплиментарный характер субстрактивных цветов, для лучшей контрастности полупрозрачного образца, окрашенного в синий цвет, следует использовать желтый_ светофильтр

4. Человеческий глаз лучше всего воспринимает монохроматический свет желто-зеленого цвета ~555нм; темновое 515нм

Использование цвета

1. При просмотре изображения на мониторе компьютера используется __RGB(аддитивная)__ палитра

2. При публикации изображений на бумаге используется _CMYK(субстрактивная)__ палитра

3. Все цвета из аддитивной палитры могут быть воспроизведены при помощи субстрактивной палитры (Не верно)

Преломление

1. Покровное стекло нельзя разглядеть когда оно помещено в сосуд с иммерсионным маслом

2. Угол преломления луча зависит только от коэффициентов преломления двух сред

( нет, еще от длины волны)

Геометрическая оптика

1. Увеличение тонкой двояковыпуклой линзы зависит только от её фокусного расстояния (от радиуса кривизны) (нет, ещё от N и от расстояния до объекта)

2. Условием создания увеличенного изображения объекта на экране за тонкой двояковыпуклой линзой является расположение объекта на расстоянии __от -F до -2F__ от линзы и экрана на расстоянии __более 2F_____ от линзы с противоположной стороны

3. Условием формирования изображения на сетчатке глаза является _расхождение_ оптических лучей

4. Условием видимости мнимого изображения при использовании тонкой двояковыпуклой линзы является расположение объекта на расстоянии _меньше -F__ от линзы

Вопросы 2:

Геометрическая оптика

1. При монохроматическом освещении и использовании тонкого препарата при

открытой апертурной диафрагме невозможно точно сфокусировать микроскоп. Какой

тип(ы) аберрации могут присутствовать ? сферическая

2. При монохроматическом освещении невозможно сфокусировать края изображения. Какой тип(ы) аберрации присутствует ? Как можно скорректировать микроскоп для их

уменьшения ? Кома (закрыть апертурную диафрагму)

3. При монохроматическом освещении невозможно одновременно сфокусировать

центр и края изображения. Какая дисторсия присутствует ? Кривизна поля

Объективы

1. Числовая апертура объектива это мера угла, образуемого _крайними_

входящими в объектив лучами. (NA=n*sinθ)

2. Вам необходимо исследовать точные размеры клеток по всему полю зрения в

белом свете. Какой объектив Вы используете? Планапохромат

3. Вам необходимо исследовать очень тускло флуоресцирующий объект. Какой тип

объектива предпочтителен ? флуорит

4. Для освещения препарата используется УФ (355нм) свет в режиме эпи-

иллюминации. На что следует обратить внимание при выборе объектива, иммерсионного

масла ? тип иммерсии, используется ли эпи-иллюминация, прозрачность обьектива для УФ

5. Для электрофизиологического исследования Вы хотите использовать

инфракрасный осветитель и видеокамеру, какой конструкционный тип объектива лучше

выбрать, на что обратить внимание ? инвертированный

6. Вы собираетесь исследовать ультраструктуру цитоскелета клетки, какой объектив

следует выбрать ?

Типы объективов фирмы Лейка

C PLANпланахромат, не рекомендуется для использования с флуоресценцией

N PLANпланапохромат

N PLAN Lпланапохромат, большая рабочая дистанция

PL FLOUTARпланапохромат флуотар (подходит для флуоресцентной микроскопии)

PL FLOUTAR Lпланапохромат флуотар, большая рабочая дистанция

HCX PL APOпланапохромат для работы с конфокальным микроскопом

HCX PL APO L U-V-Iпланапохромат для работы с конфокальным микроскопом, большая рабочая дистанция,

УФ — видимый — ИК

Ахромат- хроматически скорректирован на красный (656) и синий (486) свет,

сферическая аберрация скорректирована для 540 нм

Флуорит– сделан из CaF2, прозрачен для близкого УФ, очень прозрачен в видимом

свете, обладает низкой дисперсией, обычно скорректирован хроматически и по

кривизне поля

Апохромат- полностью скорректирована хроматическая аберрация красный,

зелёный, голубой и синий цвета, сферическая аберрация скорректирована для

зелёного и синего, характеризуются высокой числовой апертурой (до 1.4). Однако не

очень высокое пропускание света

ПланАпохромат– то же, что Апохромат, но кривизна поля полностью

Скомпенсирована

Техники микроскопии:

Проходящий свет, тёмное поле, флуоресценция и ДИК микроскопия обычно не упоминаются

BD- тёмное поле при эпиосвещении

PH- фазовый контраст

L- большая рабочая дистанция

RC- контраст отраженного света

POL,P- Объективы без напряжения оптических элементов для поляризованного света

LMC- контрастирование по хоффману (модуляционный контраст)

/- Объектив не подходящий для эпииллюминации

3.Расшифруйте обозначения на следующих объективах, отметьте увеличение, толщину

покровного стекла, числовую апертуру, использование иммерсии и её тип

Дальше картинки объективов