Руководитель модулья «Фармацевт-аналитик»
| Подпись руководителья | |||
| 02.05.2017 | Тема: Ознокомлецне с обяанностмми, порядком выполнения работ фармацевта-аналнтнка, органхимиией и технической оснащенностью рабочего места для выполнения задач контроля качества ЛС. Формирование права вой компетенции- освоение правил ТБ при работе е химическими реактивами. ПРАВИЛА ТЕХНИКИ БЕЮПАСТНОСТИ. СРЕДСТВА ИНДИВИДУАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ 1. При работе в химической лаборатории необходимо надевать халат из хлопчатобумажной ткани. 2. При выполнении работ, связанных с выделением ядовитых газов и пыли, для защиты органов дыхания следует применять респираторы или противогазы и другие средства зашиты. 3. При работе с едкими и ядовитыми веществами дополнительно применяют фартуки, средства индивидуальной защиты глаз и рук. 4. Для защиты рук от действия кислот, щелочей, солей, растворителей применяют резиновые перчатки. На перчатках не должно быть порезов, прокатов и других повреждений. Надевая перчатки, следует посыпать их изнутри тальком. 5. Для защиты глаз применяют очки различных типов, щитки, маски. ПРАВИЛА ПОЖАРНОЙ БЕЗОПАСНОСТИ В ЛАБОРАТОРИИ Все помещения лаборатории должны соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. 1. Лаборатория должна быть оснащена пожарными кранами (не менее одного на этаж) с пожарными рукавами. В каждом рабочем помещении должны быть в наличии огнетушители и песок, а н помещениях с огнеопасными н ;1сгконосмламсняющимнся веществами -дополнительные средства пожаротушения (п. 5.3.2). 2. В помещении лаборатории на видном месте должен быть вывешен план твакуацнн сотрудников в случае возникновения пожара. 3. Распоряжением по лаборатории из числа сотрудников назначается группа (3 - 5 человек), которая организует нее противопожарные мероприятия, получив инструктаж местной пожарной команды. 4. Вес сотрудники лаборатории должны быть обучены правилам обращения с огне- и взрывоопасными веществами, газовыми приборами, а также должны уметь обращаться с противогазом, огнетушителем и другими средствами пожаротушения, имеющимися в лаборатории. 5. В помещениях лаборатории и в непосредственной близости от них (в коридорах, под лестницами) запрещается хранить горючие материалы и |
| устанавливать предметы, загромождающие проходы и доступ к средствам пожаротушения. 6. Курить разрешается только в отведенном и оборудованном для этой цели месте. Курить в помещениях лаборатории строго запрещается! 7. Без разрешения начальника лаборатории и лица, ответственного за противопожарные мероприятия, запрещается установка лабораторных и нагревательных приборов, пуск их в эксплуатацию, переделка электропроводки. 8. Все нагревательные приборы должны быть установлены на термоизолирующих подставках. 9. Запрещается эксплуатация неисправных лабораторных и нагревательных приборов. 10. После окончания работы необходимо отключить электроэнергию, газ и воду во всех помещениях. 11. Каждый сотрудник лаборатории, заметивший пожар, задымление или другие признаки пожара обязан: - немедленно вызвать пожарную часть по телефону; - принять меры по ограничению распространения огня и ликвидации пожара; - поставить в известность начальника лаборатории, который в свою очередь должен известить сотрудников, принять меры к их эвакуации и ликвидации пожара. Обязанности фармацевта-аналитика а) владеть всеми видами химического и физико-химического методов анализа; б) осуществлять контроль за соблюдением технологии приготовления и условий хранения лекарств и медицинских препаратов, сроками хранения концентратов и полуфабрикатов; в) в необходимых случаях давать консультации по вопросам хранения, технологии приготовления и контроля лекарств, санитарного режима и др.; г) проводить выборочно качественный анализ препаратов, вызывающих сомнение; д) проводить полный химический изъятых проб медицинских препаратов; е) проводить в установленном порядке изъятие образцов препаратов на переконтроль; ж) руководить работой подведомственного фармацевтического персонала; з) о всех случаях ошибок докладывать руководителю аптеки и принять меры к их устранению. Хранение химических реактивов в лаборатории 1. В рабочих помещениях допускается хранить нелетучие и малотоксичные твердые вещества и водные растворы, разбавленные кислоты и щелочи, в количествах, необходимых для анализов. 2. Концентрированные кислоты в объеме не более 2 куб. дм хранятся в |
| 03.05.2017 | Стеклянной посуде с притертыми стеклянными крышками или пластмассовыми пробками в эксикаторе или стеклянной емкости с крышкой в вытяжном шкафу. Для лучшей герметичности надевают резиновые колпачки. 3. Концентрированные растворы щелочей хранят в вытяжном шкафу отдельно от кислот, в полиэтиленовой таре. Вместе с щелочами хранится аммиак. 4. Хранение легковоспламеняющихся жидкостей (ЛВЖ) допускается в толстостенных герметичными пробками бутылях, вместимостью не боле 1 куб. дм, особо опасные ЛВЖ – в объеме не более суточной потребности (таблица 1). Бутыли с ЛВЖ помещают в специальные металлические ящики вдали от источников тепла и окислителей (хлоратов, нитратов, азотной кислоты, перекиси водорода, перманганатов). Тема:Изучение нормативных документов, методической литературы и форм ведения отчетности, есть два ЛС в испытательной лаборатории. Проведение анализа лекарственных средств с применением современной аппаратуры: Фотометрия в УФ области спектра · основы законодательства РК об охране здоровья граждан и соответствующие директивные документы · теоретические основы фармацевтического анализа: · общие статьи Государственной Фармакопеи, приказы и инструкции Минздрава РК, инструктивно-методические материалы по изготовлению и контролю качества лекарственных средств, изготовляемых в аптеках, условия и правила хранения, в том числе содержащих ядовитые и наркотические лекарственные вещества: · систему организации службы контроля качества лекарственных средств; порядок проведения организационно-методической работы провизора-аналитика в аптеке; · правила прописывания и оформления рецептов (требований) в том числе, содержащих сильнодействующие, ядовитые и наркотические вещества, их высшие и разовые дозы. · технологию различных видов лекарственных форм, в том числе особенности изготовления стерильных лекарственных форм, концентратов, полуфабрикатов, внутриаптечной заготовки, настоев, отваров, суппозиториев и др; · правила и нормы санитарно - гигиенического и противоэпидемического режима, правила асептики изготовления лекарственных средств, фармацевтический порядок в соответствии с действующими нормативными документами, приказами и инструкциями; · правила получения, сбора и хранения воды очищенной и воды для инъекций; · правила хранения лекарственных средств в аптеке. · условия хранения и сроки годности лекарственных форм, внутри аптечной заготовки, полуфабрикатов и концентратов, изготовленных в аптеке; · все виды внутриаптечного контроля лекарственных средств в соответствии с требованиями действующей Инструкции по контролю качества лекарственных средств, изготовляемых в аптеках (приемочный, письменный, опросный, органолептический, физический, химический и контроль при отпуске); · экспрессные методы качественного анализа лекарственных средств в условиях аптеки. Краткую теорию флюоресцентного и микрокристаллического методов идентификации лекарственных веществ |
| основными с возбуждением электронов. Поглощение света инфракрасной области спектра (ИК) обусловлено молекулярными колебаниями В зависимости от диапазона длин волн, при которых измеряют светопоглощение растворов химических веществ, методы, основанные на измерении светопоглощения, подразделяються на спектрофотометрию в УФ – области спектра 9400-760 нм) и спектрофотометрию в инфракрасной области спектра (760-20 000нм). Но обычно единицей измерения длин волн ИК- спектров является микрон ( 1 мк= = 10 -4 см) или волновое число (см -1), т.е, число волн 1 см. В фармацевтическом анализе чаще используется спектроскопия в УФ – ивидимой области спектра. Метод УФ- спектроскопии включен в ГФ IX, ГФ Х и МФ II, а также в последние издания фармакопеи почти всех стран для определения подлинности, чистоты и количественного определения вещества в препаратах. При построении кривых спектров погашения в УФ – и видимой части спектров можно использовать величины удельных показателей погашения (J 1%i см) или молярного показателя поглощения (е )2, где е – оптическая плотность 1М раствора вещества при вещества в 100 мл раствора при толщине слоя в 1 см. Эти величины определяются экспериментально, для многих веществ они приведены в литературе. Характеристикой спектра поглощения является положения максимумов (минимумов) поглощения света веществом, а также интенсивность поглощения, что характеризуется оптической плотностью (D) или удельным показателем поглощения (J 1%i см) при определенных длинах волн. УФ- спектрофотометрическое измерения проводят обычно в растворах. В качестве · принцип работы приборов (микроскопа, ультрафиолетового облучателя); · количественный анализ лекарственных средств использованием различных титриметрических, рефрактометрического, колориметрического, нефелометрического и фотоэлектроколомерического методов. Применение перечисленных методов, их возможности и точность; · определение величины рН растворов с использованием индикаторных бумаг, индикаторов и поенциометрического метода. Принцып работы рН- метра, иономера, правила работы с ними; · методы оределения концентрации этилового спирта в водно- спиртовых растворах; · инструкцию по оценке качества лекарственных средств, изготовляемых в аптеках. Характер и причины ошибок при изготовлении лекарственных средств и фасовке промышленной продукции в аптеках. Характер и причины ошибок при изготовлении и отпуске лекарственных средств. Порядок учета внутриаптечных ошибок; · лекарственные растения, произрастающие в области (крае), (календарные сроки сбора; общие правила и техника сбора; способы сушки) – требования Государственной Фармакопеи к качеству лекарственного растительного сырья. Показатели брака растительного сырья. Предварительный контроль лекарственного растительного сырья. · организацию рабочего места провизора- аналитика, оборудование контрольно- аналитического кабинета (стола); · номенклатура титрованных растворов, реактивов, правила при их приготовлении. Составление заявок на реактивы и титрованные растворы; · затруднительные, нерациональные и несовместимые лекарственные прописи. Классификация несовместимостей. Порядок отпуска лекарственных средств при наличии несовместимостей или технологических затруднений; · учет работы провизора – аналитика аптеки. Ведение журналов регистрации результатов контроля; · нормы и правила охраны труда, техники и безопасности и противопожарной безопасности. · Правила внутреннего трудового распорядка; Фотометрические (абсорбционные методы анализа основаны на способности анализируемого вещества избирательно поглощать свет. Анализ вещества, основанный на измерении светопоглощения, включает спектрофотометрическую и фотоколориметрическую. Спектрофотометрия основана на поглощении монохроматического света, т.е. света определенной длины волны (1-2 нм) в видимой, ультрафиолетовой и инфракрасной областях спектра. Такого рода измерения поглощения света осуществляются при помощи спектрофотометров различных марок, в которых используется всегда монохроматический поток световой энергии, получаемый посредством оптической системы, называемой монохроматором. Поглощение в ультрафиолетовой (УФ) и видимой областях спектра связоно в |
| 04.05.2017 | растворителей используется дистиллированная вода, кислоты, щелочи, спирты (этиловый, метиловый) и некоторые другие органические растворители.  ИК-спектр гидрокортизона Растворитель не должен поглощать свет в той области спектра, что и исследуемое вещество. Характер спектра может изменяться в различных растворителях, а также при изменении рН среды. Тема: Фотометрия в видимой области спектра. Фотометрические детекторы.  Наиболее часто в ЖХ применяют фотометрические детекторы, работа которых основана на измерении поглощения (абсорбции) света в ультрафиолетовой или видимой областях спектра. Это связано с тем, что большинство химических соединений имеют достаточно интенсивные полосы поглощения в диапазоне длин волн 200-800нм. Наличие подходящих растворителей, прозрачных в этом диапазоне длин волн, делает фотометрические методы особенно пригодными для градиентного элюирования. Фотометрические детекторы имеют достаточно высокую чувствительность для поглощающих свет веществ, широкий линейный динамический диапазон (до 105), малый рабочий объем ячеек (<1мкл), небольшое экстраколоночное расширение пиков и высокую воспроизводимость показаний. Они являются недеструктивными, относительно нечувствительными к колебаниям потока подвижной фазы и изменениям температуры. Чувствительность фотометрических ультрафиолетовых детекторов может доходить до 0,001 единиц оптической плотности на всю шкалу при 1% шума. При такой высокой чувствительности могут быть зафиксированы малые количества (до нескольких нг) слабо абсорбирующих УФ веществ. Широкая линейная область позволяет анализировать как примеси, так и основные компоненты на одной хроматограмме. | |
Фотометрические детекторы подразделяют на детекторы с фиксированной длиной волны, дететоры со сменной с помощью фильтров длиной волны и спектофотометрические детекторы с плавно изменяемой длиной волны в определенной длин волн. Характерной особенностью многих фильтровых УФ детекторов является использование в них источников линейчатого спектра. Кроме ртутной применяют кадмиевую и цинковую лампы с линиями на 229 и214 нм соответственно. Применяют также преобразователи излучения с 254 на 280-290 нм и другие длины волн, отсутствующие в спектре ртути. Фильтровый УФ детектор, например, с четырьмя интерференционными филтрами на 217 нм (полуширина полосы пропускания 20 нм)6, 254 нм(42 нм)6 263 нм (15 нм)6 279 нм (12 нм) перекрывает область 200-300 нм и реализует полные возможности 4-волновой записи хроматограмм, в том числе получение разностных хроматограмм и спектральных отношений. В этих случаях хроматографически неразделенные пики можно выделить количественно вычитанием стандартного сигнала из сигнала проб. В связи с вышеизложенным, применение Уф детекторов с дейтериевой лампой в качестве источника света и набором широкополосных фильтров позволяет выпускать недорогие 2-х -4-хволные детекторы с выбором длин в диапазоне 200-300 нм. Дополнительные возможности в детектировании дают спектрофотометрические детекторы, позволяющие работать в многоволновом режиме. Такие детекторы предназначены для фотометрирования элюата, выходящего из хроматографической колонки при различных длинах волн, например, в спектральном диапазоне 190-360 нм. Спектрофотометрической детекторы состоит из источника чвета, монохраматора и фотометра. В качестве источника света применима дейтериевая лампа. Изменение длины волны осуществляется поворотом дифракционной решетки монохраматора с помощью шагового двигателя. Монохроматический световой пучок, управляемой вибратором, поочередно проходит через рабочию и сравнительную проточные ячейки. На мониторе ВЭЖХ прибора фиксируется хроматограмма при нескольких аналитических длинах волн, в остановленном потоке имеется возможность зарегистрировать спектр поглащегия индивидуального сорбента.  1. Никотиновая кислота. 2. Тиамин 3. Пиридоксин 4. Цианокоболамин 5. Аскорбиновая кислота 6. Рибофлавин. Хроматограмма стандартно смеси водорастворимых витаминов. Колонка: Synergi Hydro-Rp 150x4.6 мм 4 мкм; защитная колонка: SecurityGrand C18 Aq 4x3.0 мм, подвижная фаза : А-1% Н3РО4 в воде, В-ацетонитрил; градиент: А/В (97:3)- 1 мин, А/В (55:43) – за 8мин, А/В (10/90) – за мин. А/В (90/10) – 4 мин, А/В (97/3) – за 0,5 мин, А/В (97/3) – 6,5 мин; расход: 0,9мл/мин; оюъем пробы: 20мкл; детектирование: спектофотометрическое, длина волны 254нм. Одним из песпективных направлений развития фотометрических детекторов | ||
| является применение фотодиодной матрицы. В таких детекторах непрерывное излучение источника проходит через проточную рабочую ячейку и попадает на дифракционную решетку. Луч отклоняется и фокусируется на плоскости, где расположено фотодиодная матрица, состоящая из 200-250 элементарных фото-диодов. Детектор выдает информацию сразу обо всем диапазоне длин волн 190-600 нм с дискретностью 2-5 нм в течение 10 мс. В связи с тем, что при регистрации спектра создается большое массив информации, обработка и запись спектров производится с помощью быстродействующих компьютера и регистратора. Фотодиодные матричные детекторы позволяют получить за время одного анализа до 200-250 хроматограмм при разных длинах волны или трех-мерную спектрохроматограмму, в которой по одной оси откладывается время удерживается, по другим- оптическим плотность и длина волны. Замечательная особенность детекторов на фотодиодной матрице заключается в том, что они позволяют проводить количественные оценки даже в случае, когда хроматографические пики не разделяются и перекрываются на всех длинах волн. Фотометрия, раздел прикладной физики, занимающийся измерениями света. С точки зрения фотометрии, свет-это излучение, способное вызывать ощущение яркости при воздействии на человеческий глаз. Такое ощущение вызывает вызывает излучение с длинами волн от ~0.39до~0,78 мкм, причем самым ярким представляется излучение с длиной волны ок. 0,555 мкм (желто-зеленого цвета). Поскольку чувствительность глаза к разным длинам волн у людей неодинакова, в фотометрии принят ряд условностей. В 1931 Международная комиссия по ос-вещению (МКО) ввела понятие «стандартного наблюдателя» как некоего среднего для людей с нормальным восприятием. Этот эталон МКО – не что иное, как таблица значений относительной световой эффективности излучения с длинными волн в диапазоне от 0,380 до 0,780 мкм через каждые 0,001 мкм. Яркость, измерения в соответствии с эталоном МКО, называется фотометрическое яркостью или просто яркостью. Фотометрические величины. Поток световой энергии измеряется в люменах. Определить световой поток в 1 лм невозможно, не обращаясь к светящимся телам, и основной мерой света долгое время была «свеча», которая считалась единицей силы света. Настоящие свечи уже более века не используются в качестве меры света, так как с 1862 стала применятся специальная масленая лампа, а с 1877- лампа, в которой сжигался пентан. В 1979 была принята несколько отличающаяся от нее международная единица, названая кандела (кд). Кандела равна силе света в данном направлении источника, испускающего монохроматическое излучения частоты 540Ч1012 Гц (1=555нм), энергетическая сила светового излучения которого в этом направлении составляет 1/683 Вт/ср. Протяженный источник света или освещения предмет характеризуется определенной яркостью (фотометрическое яркости). Если сила света, испускаемого 1 и2 такой поверхности в данном направлении, равна 1 кл, то ее яркость в этом направлении равна 1 кд/м2.(Яркость большинства тел и источника света в разных направлениях неодинакова,) Виды фотометрических измерений. Основные виды фотометрических измерений таковы: 1) Сравнение силы света источника;2) измерение полного потока от источника света;3) измерение освещенности в заданной полоскости;4) измерение яркости в заданном направлении;5) измерение доли света, пропускаемой частично | ||
| 05.05.2017 | прозрачными объектами; 6) измерение доли света, отражаемой объектами. ОБЩИЕ МЕТОДЫ ФОТОМЕТРИИ Существуют два общих метода фотометрии: 1) визуальная фотометрия, в которой при выравнивании механическими или оптическими средствами яркости двух полей сравнения используется способность человеческого глаза ощущать различия в яркости; 2) физическая фотометрия, в которой для сравнения двух источников света используются различные приемники света иного рода – вакуумные фотоэлементы, полупроводниковые фотодиоды и т.д. При обоих методах для того, чтобы результаты имели универсальную значимость, условия наблюдения (или работы приборов) должны быть такими, чтобы фотометр реагировал на разные длины волн в точном соответствии со «стандартным наблюдателем» МКО. Важно также, чтобы световой выход лампы не изменялся в ходе измерений. Для стабилизации и измерения тока и напряжения в таких условиях обычно требуется довольно сложная электрическая аппаратура. В самых точных фотометрических измерениях приходится стабилизировать ток через лампу с точностью до (2 – 3)Ч10–3%. Визуальная фотометрия. История визуальной фотометрии начинается с П.Бугера (1698–1758), замечательного ученого, который в 1729 изобрел способ сравнения двух потоков света и сформулировал почти все основные принципы фотометрии. И.Ламберт (1728–1777) далее систематизировал теорию фотометрии, и дальнейшее ее развитие шло в основном по линии совершенствования методов. В настоящее время визуальная фотометрия применяется ограниченно – при измерении весьма слабых световых потоков, когда трудно однозначно интерпретировать результаты физической фотометрии. Физическая фотометрия. Начало физической фотометрии положили Ю.Эльстер и Г.Гейтель, открывшие в 1889 фотоэффект. В 1908 Ш.Фери разработал электрический фотометр, чувствительность которого к разным длинам волн была близка к чувствительности человеческого глаза. Но лишь в 1930-х годах, после усовершенствования вакуумных фотоэлементов и изобретения селенового фотодиода, физическая (электрическая) фотометрия стала широко применяемым методом, особенно в промышленных лабораториях. Тема: Тонкослойная хроматография Тонкослойная хроматография (ТСХ) является планарной разновидностью жидкостной хроматографии, в которой подвижная фаза двигается в пористой структуре адсорбента |
 Общие сведения Процесс подобен бумажной хроматографии, но его преимуществом является большая скорость анализа, более высокое качество разделения, и возможность выбора одной из неподвижных фаз, обладающей наиболее подходящими свойствами. В настоящий момент тонкослойная хроматография (ТСХ) является одним из основных методов анализа смесей органических веществ в научных лабораториях и полностью вытеснил бумажную хроматографию. Техника  Пластина с нанесенными каплями образцов (смесь красного и синего компонента) в процессе разделения. Варианты тонкослойной хроматографии Самым простым вариантом планарной хроматографии является бумажная хроматография, когда разделение производят с использованием специальной бумаги. Для разделения используется пластины на основе оксида алюминия и силикагеля. Наиболее распространены пластины на основе силикагеля. Оксид алюминия и силикагель, как правило, размещается на стеклянной, металлической или пластиковой основе. В ряде случаев к сорбенту добавляется флуоресцентный индикатор синего или зеленого цвета. |
 хроматограмма 10 эфирных масел, проявлена ванилином. Также существуют NH2-, CN-, ДИОЛ, и RP модифицированные сорбенты для анализа веществ не разделяющихся на силикагелях напрямую. Разделение, как правило, производится в специальных герметичных камерах для ТСХ. Препаративная и аналитическая ТСХ Аналитическая ТСХ является качественным методом анализа веществ. Необходимо помнить, чтоинтенсивность цвета пятен далеко не всегда является даже приблизительной количественнойхарактеристикой. Такая оценка возможна при использовании универсальных проявителей, тогдадетектирование производится визуально либо с помощью денситометра. Препаративная ТСХ является методом выделения вещества или группы близких веществ из смеси. В этомслучае смесь наносится на старт в виде сплошной полосы. Далее отрезается край пластины (илизакрывается вся остальная часть) и производится проявление. Часть пластины, соответствущая целевомувеществу соскребается, вещество отделяется от адсорбента. Препаративную ТСХ следует использовать, еслив лаборатории нет высокоэффективного жидкостного хроматографа (ВЭЖХ). Фотогалерея Рахвитие процесса хроматогирования во времени: ВЭЖ  Х, ГХ Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ, англ. HPLC, High performance liquid chromatography) — один из эффективных методов разделения сложных смесей веществ, широко применяемый как в аналитической химии, так и в химической технологии. Основой хроматографического разделения является участие компонентов разделяемой смеси в сложной системе Ван-дер- | ||||||
| Ваальсовых взаимодействия (преимущественно межмолекулярных) на границе раздела фаз. Как способ анализа, ВЭЖХ входит в состав группы методов, которая, ввиду сложности исследуемых обьектов, включает предварительное разделение исходной сложной смеси на относительно простые. Полученные простые смеси анализируются затем обычным физико-химическими методами или специальными методами, созданными для хроматографии. Принцип жидкостной хроматографии состоит в разделении компонентов смеси, основанном на различии в равновесном распределении их между двумя несмешивающимися фазами, одна из которых неподвижна, а другая подвижна. Отличительной особенностью ВЭЖХ является использование высокого давления ( до 400 бар) и мелкозернистых сорбентов (обычно 3 – 5 мкм, сейчас до 1,8 мкм). Это позволяет разделять сложные смеси веществ быстро и полно (среднее время анализа от 3 до 30 мин). Метод ВЭЖХ находит широкое применение в таких областях, как химия, нефтехимия, биология, биотехнология, медицина, пищевая промышленность, охрана окружающей среды, производство лекарственных препаратов и во многих других. По механизму разделения анализируемых или разделяемых веществ ВЭЖХ делится на адсорбционную, распределительную, ионообменную, эксклюзионнкю, лигандообменную и другие. Следует иметь в виду, что в практической работе разделение часто протекает не по одному, а по нескольким механизмам одновременно. Так, эксклюзионное разделение бывает осложнено адсорционными эффектами, адсорбционное – распределительными, и наоборот. При этом чем больше различие веществ в пробе по степени ионизации, основности или кислотности, по молекулярной массе, поляризуемости и другим параметрам, тем больше вероятность проявления другого механизма разделения для таких веществ. Нормально – фазовая ВЭЖХ Неповижная фаза более полярна, чем подвижная, поэтому в составе элюента преобладает неполярный растворитель: · Гексан: изопропанол = 95:5 (для малополярных веществ) · Хлороформ: метанол = 95:5 (для среднеполярных веществ) · Хлороформ: метанол = 80:20 (для сильнополярных веществ) Обращенно – фазовая ВЭЖХ Неподвижная фаза менее полярно, чем подвижная, поэтому в составе элюента почти всегда присуствует вода. В этом случае всегда можно обеспечить полное растворение БАС в подвижной фазе, почти всегда возможно использовать УФ – деткетирование, почти все подвижные йазы взаимно смешиваются, можно использовать градиентное элюирование, можно быстро переуравновесить колонку, колонку можно регенерировать. | ||||||
| Обычными элюентами для обращенно-фазовой ВЭЖХ являются: · Ацетонитрил:вода · Метанол:вода · Изопропанол: вода Прививки неподвижной фазы Нормально – фазовая ВЭЖХ: · Неподвижная фаза с пропилнитрильной прививки (нитрильной); · Неподвижная фаза с пропиламинной прививкой (аминной). Обращенно – фазовая ВЭЖХ: · Неподвижная фаза с алкильной прививкой; · Неподвижная фаза с алкилсилильной прививкой. Энд – кэппирование – защита непривитых участков сорбента дополнительной прививкой «маленькими» молекулами. Гидрофобный энд – кэппинг (С1, С2) : выше селективность, хуже смачиваемость; гидрофильный энд – кэппинг (диол): ниже селективность, выше смачивемость. Детектор для ВЭЖХ · Ультрафиолетовый · Фотодиодно – матричный · Флуориметрический · Электрохимический · Рефрактометрический · Масс – селективный Газовая хроматография Газовая хроматография –разновидность хроматографии, метод разделение летучих компанентов, при котором подвижной фазой служит инертный газ (газ – носитель), протекающий через неподвижную фазу с большой поверхностью. В качестве подвижной фазы используют водород, гелий, азот, аргон, углекислый газ. Газ – носитель не реагирует с неподвижной фазой и разделяемыми веществами. Различают газо – твердофазную и газо – жидкостную хроматографию. В первом случае неподвижной фазой является твердый носитель (силикагель, уголь, оксид алюминия), во втором – жидкость, нанесенная на поверхность инертного носителя. Газо – жидкостная хроматография – разделение газовой смеси вследствие различной растворимости кампанентов пробы в жидкости или различной стабильности образующихся комплексов. Неподвижной фазой служит жидкость, нанесенная на инертный носитель, подвижной – газ. Разделение основано на различиях в летучести и растворимости ( или адсорбируемости) компонентов разделяемой смеси. Этот метод можно использовать для анализа газообразных, жидких и твердых веществ с молекулярной массой меньше 400, которые должны удовлетворять | |||
Определенном требованиям, главные из которых – летучесть, термостабилность, инертность, легкость получения. Этим требованиям в полной мере удовтетворяют, как правило, органические вещества, поэтому газовую хроматографияю широко используют как серийный метод анализа органических соединеий. Оборудования для газовой хроматографии
|
Хроматографические колонки
Под колонкой подразумевается сосуд, длина которого значительно больше диаметра. Для газовой хроматографии используют 2 типа колонок — капиллярные и насадочные. Насадочные колонки имеют внешний диаметр от 2 до 4 мм и длину от 1-го метра до 4-х метров. Внутренний диаметр капиллярных колонок (ID — inner diameter) — 0,15-0,53 мм,, а длина — 15-100 м. Материалом для изготовления колонок служит стекло, нержавеющая сталь, медь, иногда фторопласт. В последнее время наибольшее распространение получили капиллярные колонки изготовленные из плавленного кварца, с нанесенной внутри неподвижной фазой. Длина подобных колонок может достигать сотен и даже тысяч метров, хотя чаще используются колонки длиной 30-60 м.
Крайне важно плотное наполнение колонок неподвижной фазой, а также обеспечение постоянства температуры колонки в течение всего процесса хроматографирования. Точность поддержания температуры должна составлять 0,05-0,1 °C. Для точного регулирования и поддержания температуры используют термостаты.
Детекторы
Детекторы предназначены для непрерывного измерения концентрации веществ на выходе из хроматографической колонки. Принцип действия детектора должен быть основан на измерении такого свойства аналитического компонента, которым не обладает подвижная фаза.
В газовой хроматографии используют следующие виды детекторов:
· пламенно-ионизационный детектор
· детектор по теплопроводности (катарометр)
· детектор электронного захвата
· пламенно-фотометрический детектор
Описание.Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок, без запаха, горького вкуса. На языке вызывает чуство онемения. Расворимость.Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте, мало растворим в хлороформе, практически нерастворим в эфире. Подлинность.Препарат Наши рекомендации