Скорость оседания эритроцитов
2.6.1Метод Панченкова
СОЭ — это процесс разделения свежевыпущенной крови с примесью антикоагулянтов на два слоя: нижний — эритроциты, верхний — плазма и лейкоциты. СОЭ выявляет изменения в соотношении белковых компонентов плазмы крови, а также числа и объема эритроцитов при различных заболеваниях.
Капилляр Панченкова - это пипетки с делениями от 0 (верхняя отметка) до 100 мм. На уровне деления 50 нанесена буква « Р.» (реактив), а на уровне отметки 0- буква « К» - (кровь).
Аппарат Панченкова - представляет собой штатив для установки стеклянных капилляров в вертикальном положении. Каждому капилляру соответствует порядковый номер на штативе.
Методика определения.
1.Капилляр Панченкова промывают 5% раствором цитрата натрия.
2. В пробирку наливают 5% раствор цитрата натрия в объеме 1/4 части капилляра.
3. Кровь из пальца забирают до верхней метки — цифры «О» (буква «К» — кровь) капилляра.
4.Кровь выдувают из капилляра в пробирку и смешивают с цитратом натрия.
5.Полученную смесь набирают в капилляр до верхней метки и ставят вертикально в аппарат Панченкова при температуре 18-22.°С (при более низкой температуре оседание замедляется, а при более высокой — ускоряется).
6.Через 1 час отмечают величину образовавшегося столбика плазмы в миллиметрах.
Пределы нормальных колебаний СОЭ у мужчин — 1—10 мм/ч, у женщин — 2—15 мм/ч. Более высокая СОЭ у женщин может быть объяснена меньшим количеством эритроцитов и большим содержанием фибриногена.
Клинико-диагностическое значение: В механизме СОЭ принимают участие физические, физико-химические и биологические факторы. Их влияние в целом объясняется адсорбционной теорией, суть которой состоит в том, что эритроциты адсорбируют белковые частицы плазмы, образуют агломераты (скопления эритроцитов) и смещаются вниз при отстаивании крови. В конечном итоге СОЭ зависит от количества эритроцитов и соотношения концентрации «агломеринов» и сил, удерживающих эритроциты в состоянии взвеси. Наибольшее влияние на СОЭ оказывает соотношение белков плазмы, поэтому СОЭ можно считать пробой коллоидной устойчивости сыворотки крови. Альбумины (мелкодисперсные белки, составляющие в норме 60% от общего белка сыворотки крови) оказывают сильное защитное действие на эритроциты и препятствуют их оседанию. Увеличение же количества глобулинов (грубодисперсные белки, составляющие в норме 40% белка сыворотки), например, при воспалительных заболеваниях и опухолях, резко увеличивает СОЭ. Яркой иллюстрацией «содружественного» влияния обоих факторов на величину СОЭ является нефротический синдром. При нем имеет место как значительное снижение альбуминов за счет потери их с мочой, так и абсолютное увеличение у - и р-глобулинов и накопление в крови аномальных грубодисперсных белков — парапротеинов; значительно увеличивается и холестерин крови — липид плазмы, который также способствует ускорению СОЭ. СОЭ достигает высшей степени (70—80 мм/ч) при различных видах парапротеинемии (миелома, макроглобулинемия). Напротив, при взаимной «нейтрализации» патологических факторов, действующих антагонистически на процесс оседания эритроцитов, СОЭ может оставаться нормальной, например, при остром гепатите. При этом пока не наступило значительного понижения фибриногена, оседание эритроцитов может увеличиваться в соответствии с уменьшением соотношения альбумины/глобулины. При наступлении выраженной фибриногенопении и увеличении содержания желчных кислот происходит компенсация влияния на СОЭ уменьшения соотношения альбумины/глобулины, вследствие чего оседание эритроцитов возвращается к норме или даже замедляется.
Таким образом, СОЭ увеличивают:
• изменение белкового «спектра» крови: увеличение глобулинов, снижение альбуминов, появление парапротеинов, увеличение содержания фибриногена, что наиболее часто наблюдается при воспалительных и неопластических процессах;
• уменьшение числа эритроцитов (анемии);
•увеличение объема эритроцитов и увеличение содержания в них гемоглобина. Такие эритроциты (мегало- и макроциты) имеют большой удельный вес, тяжелее обычных, поэтому оседают скорее, чем нормо-микроциты. Поэтому при мегалобластических анемиях скорость оседания эритроцитов больше, чем при железодефицитных;
•увеличение содержания холестерина в крови (атеросклероз и вторичные гиперлипидемии).
СОЭ замедляют:
•увеличение числа эритроцитов (эритремия);
•понижение рН крови - развитие ацидоза (при сердечной недостаточности);
•увеличение содержания желчных кислот в крови (механическая и паренхиматозная желтухи).
Это интересно!
Метод Панченкова имеет ряд принципиальных недостатков обусловленных плохой стандартизацией производимых промышленностью капилляров, необходимостью использовать для анализа только капиллярную кровь, а также невозможностью адекватно отмыть капилляр при многократном применении. В последние годы метод Панченкова стал применяться для определения СОЭ венозной крови, не смотря на то, что никаких научно-практических исследований по референтным величинам для этого метода, по изучению влияния различных факторов при исследовании венозной крови проведено не было. Поэтому метод Панченкова в настоящее время является источником ошибочных результатов и проблем в работе КДЛ и деятельности врачей-клиницистов, не используется в других странах (кроме стран бывшего СССР) и должен быть исключен из практики лабораторий.
2.6.2 Метод Вестергрена
В данном методе используются стандартные капилляры из стекла или пластика длиной 300 мм ± 1,5 мм (рабочей является длина капилляра 200 мм), диаметром – 2,55 мм ± 0,15 мм, что повышает чувствительность метода. Время измерения – 1 ч. Для анализа может быть использована как венозная, так и капиллярная кровь. Методика определения СОЭ методом Вестергрена включает следующие этапы:
Ход определения
1. венозная кровь берется в вакуумные пробирки с К-ЭДТА (капиллярная кровь берется в пробирки с К-ЭДТА);
2. пробу венозной (капиллярной) крови смешать с 5% раствором натрия цитрата в соотношении 4:1;
3. произвести забор крови в капилляр Вестергрена;
4. через 1 ч измерить СОЭ по высоте столба прозрачной плазмы.
Метод Вестергрена в настоящее 41 время полностью автоматизирован, что существенно повышает производительность КДЛ и качество результатов. Вместе с тем, необходимо понимать, что классический метод Вестергрена имеет целый ряд модификаций, сущность которых состоит в уменьшении длины капилляра (например, используются моноветты или вакуумные пробирки с раствором натрия цитрата рабочая длина которых составляет 120 мм, а не 200 мм, как в классическом методе Вестергрена), изменении угла установки капилляра (например, ряд фирм использует установку вакуумных пробирок под углом 18°), укорочении времени для наблюдения за оседанием эритроцитов (до 30–18 мин) или сочетании этих изменений. Насколько такие модификации можно называть методом Вестергрена в научной литературе не решен.
На результаты определения СОЭ методом Панченкова и классическим методом Вестергрена могут оказывать существенное влияние ряд факторов преаналитического и аналитического этапов (не связанных с заболеванием пациента) производства лабораторных анализов:
• температура в помещении где проводится анализ (повышение температуры в помещении на 1 °С увеличивает СОЭ на 3%);
• время хранения пробы (не более 4 ч при комнатной температуре);
• используемый антикоагулянт (рекомендован цитрат натрия);
• правильная вертикальность установки капилляра;
• длина капилляра;
• внутренний диаметр капилляра;
• степень разведения крови антикоагулянтом (рекомендуемое разведение 4:1);
• величина гематокрита.
2.7.Индексы красной крови
2.7.1 Подсчет индексов красной крови
Цветовой показатель ( Ц. П )
Ц. П. – индекс отражает относительное содержание гемоглобина в эритроцитах. Вычисляют цветовой показатель по формуле:
Hb г/л х 3
три первые цифры числа эритроцитов
например: концентрация гемоглобина 150 г/л, число эритроцитов 4,5 х 10 12 в 1 л крови= 150х 3/ 450= 1,0
Нормальные величины. У здоровых цветовой показатель находится в пределах 0,86—1,05.
Клиническое значение. По величине цветового показателя принято делить анемии на гипохромные, нормохромные и гиперхромные. Гипохромные анемии (с цветовым показателем менее 0,86) широко распространены и наблюдаются, прежде всего при дефиците железа, вызванном различными причинами. Особенно выраженной гипохромией (0,6—0,5 и ниже) характеризуются железодефицитные анемии, обусловленные хроническими кровопотерями.
Менее выраженная гипохромия эритроцитов (0,7—0,8) наблюдается при железодефицитной анемии беременных, при инфекциях, опухолях. Редко встречаются гипохромные анемии, не связанные с дефицитом железа и обусловленные нарушением синтеза гемоглобина в результате свинцового отравления или наследственного повреждения синтеза порфиринов и цепей глобина (Р-талассемии, а-талассемии и др.).
Повышение цветового показателя — гиперхромия — является характерным лабораторным признаком различных В-дефицитных и фолиево-дефицитных анемий. Особенно выражена гиперхромия эритроцитов (1,2—1,3) при рецидиве анемии Аддисона — Бирмера. Нормохромные анемии наблюдаются при некоторых гемолитических формах малокровия, острых кровопотерях, лейкозах, сопутствуют циррозу печени.
Среднее содержание гемоглобина в одном эритроците (СГЭ)
Наряду с Ц. П. высчитывают более достоверную абсолютную величину - весовое содержание гемоглобина в пикограммах (пг) в одном эритроците - СГЭ получают путем деления количества гемоглобина в граммах на 1 л на число эритроцитов в миллионах: содержание гемоглобина в эритроците:
СГЭ= гемоглобин г/л
эритроциты млн.
В норме СГЭ составляет 27- 35 пг.
Например: количество гемоглобина 145 г/л, количество эритроцитов 4,9 х 10 12 / л (число миллионов эритроцитов- 4,9):
СГЭ= 145
4,9
Клиническое значение: Снижение отражает гипохромию и наблюдается при железодефицитных анемиях, повышение имеет место при макроцитарных и особенно мегалоцитарных анемиях