Клостридии анаэробной раневой инфекции

Анаэробная раневая инфекция – полимикробное заболевание. В его возникновении и развитии принимают участие несколько видов клостридий в ассоциации с аэробными бактериями (стафилококками, стрептококками и др., легко инфицирующими раны). Основными возбудителями анаэробной раневой инфекции являются С.perfringens, С.novyi, С.septicum. В патогенезе заболевания участвуют и другие клостридий – С.histolyticum, С.sordellii и др.

Основной возбудитель анаэробной раневой инфекции С.per­fringens чаще других обнаруживается в патологических очагах. Вызывает газовую гангрену, пищевую токсикоинфекцию, если попадает в пищевые продукты и размножается в них. .

Морфология, физиология. Крупные гр+ па­лочки с субтерминально расположенными спорами.

С.perfringens имеет размеры, не обладает жгутиками. В организме животных и человека образует капсу­лу, которая утрачивается при пересевах на питательные среды. С.novyi – наиболее крупные из всех возбудителей ана­эробной инфекции палочки, прямые или слегка изогнутые. Капсул не образуют, имеют жгутики, как и все остальные возбудители этого заболевания. С.septicum– полиморфные, в культурах могут иметь нитевидные формы.

Культивируют клостридий в средах, разработанных для раз­множения анаэробных споровых микроорганизмов. Чувствитель­ность к кислороду у этих бактерий различна. Если С. perfringens (равно как и С. histolyticum и С. sordellii) могут расти и в присутствии небольшого количества кислорода, то С.novyi и С.septicum не выносят даже малого количества кислорода (строгие анаэробы).

Клостридии дифференцируют по культуральным признакам. На сахарно-кровяном агаре С. perfringens образует гладкие сероватые с ровными краями и плотным возвышением в центре колонии; С. novyi–шероховатые колонии с признаками гемо-лиза; С. septicum образует сплошной нежный налет, перепле­тающиеся нити на фоне гемолиза, С. histolyticum – небольшие блестящие колонии с ровными краями и небольшой зоной ге­молиза вокруг, С. sordellii–сероватые колонии с небольшим гемолизом.

В жидких средах клостридий дают диффузное помутнение, затем хлопьями оседают на дно пробирки. С. perfringens в сре­де Китта – Тароцци растет с обильным газообразованием, но более характерен тест в молоке, которое при культивирова­нии микроорганизма быстро и интенсивно свертывается. Образу­ется при этом губка, пронизанная пузырьками газов, подбрасы­вается под самую пробку пробирки.

В столбике агара колонии С. perfringens выглядят либо в виде комочков ваты (R-форма), либо в виде чечевицы (S-форма). С. novyi образует колонии, похожие на нежные хлопья ваты, С. septicum – чечевицеобразные колонии.

Ферментативная активность клостридий различна у отдель­ных видов, что используется в дифференциации. С. perfrin­gens обладает большим набором сахаролитических ферментов сбраживает многие углеводы с образованием кислоты и газов, протеолитические ферменты разжижают желатину, свернутую сыворотку. При росте в питательном бульоне образуется масляная, уксусная кислоты и большое количество газов (С02, H2S, NHs).

№11. Диагностика заболеваний, вызванных условно-патогенными организмами (Klebsiella, Proteus, Pseudomonas).

КЛЕБСИЕЛЛЫ.Род Klebsiella вклю­чает 4 вида, первый из которых К. pneumoniae состоит из трех подвидов: К. subsp. pneumoniae, К. ozaenae и К. rhinoscleromatis.

Морфология. Короткие тол­стые палочки, в препаратах распола­гаются поодиночке, парами и короткими цепоч-ками. Неподвиж­ны, спор не образуют. Характерным признаком клебсиелл явля­ется наличие выраженной капсулы. Не требовательны к пит средам. На плотных средах – блестящие куполообразные слизистые колонии, в жидких средах – интенсивное по­мутнение.

АГ. О-АГ (ЛПС) и 82 К-АГ (ПС), на их основе проводится серотипирование. Некоторые О- и К-АГ клебсиелл являются общими с эшерихиями и сальмонеллами.

Патогенность клебсиелл обусловлена капсулой, защищающей микроорганизмы от фагоцитоза, и действием эндотоксина. Клебсиеллы пневмонии продуцируют термостабильный энтеротоксин, действие которого проявляется в усилении выпота жидкости в просвет тонкой кишки.

Экология и распространение. Обитают у ч-ка и Ж! в кишечнике, на коже и слизистых. Широко распростра­нены. Благодаря капсуле устойчивы к факторам окр среды, длительно сохраняются в почве, в воде, на предметах. Чувствительны к растворам обычных дезинфектантов.

Патогенез. Являются возбудителями ЗОД (риносклерома, озена, пневмония), могут поражать слизистые век, мочеполовых органов, мозговой оболочки, суставов, способны вызывать сепсис, острые кишечные инфекции, гнойные послеродовые осложнения. У новорожденных → тяжелые пневмонии, кишечные инфекции, токсико-септические состояния. Вызывают внутрибольничные инфекции, часто микст–инфекции.

Клебсиеллы ОЗЕНЫ вызывают хронические ЗОД. Воспаление сопровождается выделением вязкого секрета, со зловонным запахом.

Клебсиеллы РИНОСКЛЕРОМЫвызывают хронические вос­палительные процессы слизистых ВДП с образованием инфильтратов, которые затем рубцуются. Возбудители располагаются в гранулемах внутри и вне клеток.

Иммунитет. АТ к клебсиеллам вырабатываются, но они не обладают выраженными протективными свойствами, основная роль принадлежит фаго­цитозу, который активируется специфическими опсонинами. Воз­никновению хронических форм клебсиеллезов способствует вну­триклеточная локализация возбудителя и развитие ГЗТ.

Лабораторная диагностика – выделение чистой культуры, дифференциация (от других энтеробактерий) и идентификации вида, определении серовара. Серодиагностика проводится в РСК с А-АГ клебсиелл.

Профилактика и лечение. Вакцинопрофилактика не разработана. Для лечения применяют АБ. За послед­ние годы отмечается широкое распространение антибиотикорезистентных штаммов клебсиелл.

ПРОТЕИ. –род Proteus (3 вида, часто встречаются Р. vulgaris и Р. mirabilis).

Морфология. Палочки (встречаются кокковидные и нитевидные формы), спор и капсул не образуют, имеют перитрихиально расположенные жгутики.

Протеи хорошо растут на простых питательных средах. На агаровой среде дают «ползучий» рост (роящиеся Н-формы). Штаммы, не способные к роению, образуют крупные с ровными краями колонии (О-форма). Некоторые штаммы вызывают гемолиз эритроцитов в кровяных средах.

Ферментируют многие углеводы с образованием кис­лоты, разжижают желатину, продуцируют H₂S. Виды различают по способности продуцировать индол, расщеплять мальтозу, давать реакцию Фогеса–Проскауэра и др. Имеют уреазу и способны

АГ. Имеют 49 О- и 19 Н-АГ, очень многие из них перекрестно реагируют с другими энтеробактериями.

Патогенез.Относятся к условно-пат БАКТЕРИИ. Токсические свойства связаны с ЛПС, которые освобождаются после разрушения мкÒ. При попадании ↑ доз протея в ЖКТ возникает пищевая токсикоинфекция (проявляется в виде острого гастроэнтерита).

Р. mirabilis чаще, чем Р. vulgaris, вызывают гнойно-воспа­лительные заболевания (особенно МПТ), это м.б. следствием заражения, а порою раз­виваются как аутоинфекции при иммунодефицитных состояниях. Особенно опасны заражения новорожденных: попадание про­теев в пупочную ранку → бактериемия или менингит.

Экология и распространение. Обитателями в кишечнике ч-ка и Ж!! В окружающей среде более устойчивы, чем эшерихии, способны сохранять жизнедеятельность в слабых растворах фенола и других дезин­фектантов. В природе распространены широко, участвуют гниении.

Лабораторная диагностика. Бактериологическим методом. Выделенные чистые культуры идентифицируют по культуральным и БХ свойствам. Этиологическая роль устанавливает­ся так же, как и всех других условно-патогенных микроорга­низмов.

Профилактика и лечение. Профилактика. Лечение используют АБ и бактериофаг (местно или в полость поражения) после проверки чувствительности к фагу выделенного возбудителя. В случаях смешанных инфекций, вызванных эшерихиями и протеем, приме­няют коли–протейный бактериофаг.

ПСЕВДОМОНАДЫ

Семейство Pseudomonadaceae включает 4 рода: Pseudomonas – облигатно патогенные для чело­века: Р. mallei (сап), Р. pseudomallei (мелиоидоза) и большая группа условно-пат (Р. aeruginosa).

Микроорганизмы рода Pseudomonas — грамотрицательные палочки размерами 0,5—1,ОХ 1,5—4,0 мкм, не образующие спор, капсул. Многие виды подвижны, имеют один или несколько по­лярно расположенных жгутиков.

Различа­ют виды внутри рода Pseudomonas по подвижности, пигменто-образованию, БХ активности.

к условно-патогенным микроорганизмам. В настоящее время частота возникновения воспалительных процессов, в этиологии которых зарегистрирована синегнойная палоч-ка, значительно возросла.

Морфология. Гр– подвижная палоч-ка (имеет 1-2 полярных жгутика). Оюлигатный аэроб, к питательным средам не требовательны. На плотных средах дает круглые слизистые колонии (капсулоподобной слизи), в жидких – равномер­ную муть. Культуры издают запах, напоминающий аромат жас­мина.

Сахаролитческая активность не выреженна, но ферментируют глюкозу. Протеолитическая активность ↑: разжижают желатин, свернутую сыворотку, гидролизуют казеин. На кровяных средах – ГЕМОЛИЗ. Есть ОКСИДАЗА. Продуцируют 2 ПИГМЕНТА – зеленого флюоресцеина и пиоциазина (неко­торые культуры ещё и корич­нево-красный пиорубин, красный эритроген, черный меланоген, а некоторые – лишены пигмента).

АГ. Синегнойная палоч-ка обладает О- и Н-АГ. АГ свойствами также обладают слизистое веще­ство, токсины, адгезин, фимбрий, экзоферменты. Созданы наборы диагностических сывороток, но антигенная общность с дру­гими псевдомонадами не позволяет надежно использовать их в практике.

Патогенность. Имеет фимбрии (адгезия); продуцирует ряд токсинов и ферментов: экзо­токсин А – основной, ведущий фактор патогенности, обладает цитотоксическим действием, гемолизины, лейкоцидин, ферменты – коагулаза, эластаза и др. Патогенность обусловлена также слизью капсулоподобного вещества, защищающей от фагоцитоза.

Экология и распространение. Обитает в почве, воде, на растениях. Широко распространена Þ легко инфицирует человека. Выделяясь от больных, мкÒ длительное время сохраняются на предметах обихода, мед инструментах, особенно долго – в раневом отделяемом. Чувствительны к многим дезинфектантами t°С. В больницах распространены эковары синегнойной палочки высокоустойчивые к АБ и антисептикам (могут контаминировать лекар­ственные препараты, оставаясь жизнеспособными в антисепти­ках, дезинфицирующих растворах).

Патогенез. Гнойно-воспалительные процессы в различных тканях и органах при инфицировании ран, мочевых путей и ожоговых поверхностей (особенно часто). Присутствует при смешанных инфекциях. Чаще возникает у детей, у людей пожилого воз­раста и у лиц со сниженным иммунным статусом. Один из главных возбудителей внутрибольничной инфекции.

Диагностика Выделение культу­ры из пат материалов и изучение ее биологических свойств. Основные дифференцирующие признаки: восстановление нитрита до газообразного азота, разжижение 15% желатины, окисление глюкозы. Внутривидовую дифференциацию проводят фагами, пиоцианами, устанавливают варианты по чувствительности к антибио­тикам и антисептикам.

Профилактика и лечение. Для специфической профилактики разработана ассоциированная вакцина, включающая АГ синегнойной палочки, протея, стафилококка. При ожогах местно можно применять пиоиммуноген.

В терапии используют АБ и гетерологичный Ig (местно), пиоиммуноген (при ожогах), иммунную плазму.

№12 Нейссерии. Микробиологическая диагностика менингококковой инфекции.

Заб-я у ч-ка вызы­в 2 вида кокков рода Neisseria: N.meningitidis – менин­гококки и N.gonorrhoae – гонококки. Остальные представители этого рода являются обитателями носоглотки здоровых людей и редко вызывают заболевания.

МЕНИНГОКОККОВАЯ ИНФЕКЦИЯ

Морфология. Имеют овоидную форму, напоминают кофей­ное зерно. Располагаются парами. Имеют нежную капсулу, которая утрачи­вается при пересевах на средах в лабораторных условиях. Для размножения на пит ср нуж­даются в сыв или кр. Растут лучше в атмосфере 5–8% CO2. На поверхности сывороточного агара об­разуют нежные бесцветные колонии вязкой консистенции.

БХ активность выражена слабо: продуцируют ферменты, расщепляющие глюкозу и мальтозу с образованием кислоты.

АГ. На основании различий капсульного антигена ме­нингококки делятся на 8 серологических групп (А,В,С,D,X,Y,Z,W-135). Белковые антигены наружной мембраны клеточ­ной стенки различны → серовары (обозначают цифрами).

Экология и распространение. Растут на слизистой носоглотки человека-носителя. В окр среде быстро погибают, не выдерживая высушивания, охлаждения и и t°С. Обычные дезинфицирующие вещества убивают менингококки почти моменталь­но. Чувствительны к АБ пенициллинового ряда, тетрациклину, эритромицину.

Главн ИСТОЧНИК – больной. У боль­шинства заразившихся менингококками заболевание не воз­никает, у нек развивается остр назофарингит и лишь у отдельных лиц – генерализованные формы бо­лезни: менингит, менингококкемия. Механизм ПЕРЕДАЧИ – воздушно-капельный. Заражение происходит только при тесном и длительном контакте с инфицированным лицом (например, в детских садах, школах, казармах и др.).

ЭПИДЕМИЧЕСКИЕ вспышки обуслов­ливаются чаще менингококками серогруппы А, возникают периодически с интервалом 20–30 лет, что зависит от ↑ числа восприимчивых людей за счет родившихся после предыдущей эпидемии.

Патогенез. В Ò здорового человека, менингококки с по­мощью фимбрий прикрепляются к клеткам эпителия слизистой носоглотки. Капсула обеспечивает им устойчивость к фагоцитозу и инвазивные свойства.

КЛИНИЧЕСКИ менингококковая инфекция проявляется по-раз­ному. Различают 3 основные формы: назофарингит, менингит и менингококкемию. Возникновение заболевания и кли­нические проявления зависят от состояния МКÒ и от свойств менингококков, их вирулентности.

Путь распространения возбудителя вÒ – гема­тогенный. Распространение мкÒ по тканям обеспечивают гиалуронидаза и нейраминидаза. Возникающая бактериемия сопровождается массивным распадом микробных ## → токсинемией. Чем больше эндотоксина (ЛПС # стенки) циркулирует в организме заболевшего, тем тяжелее протекает болезнь. При массовой гибели большого числа менингококков и одновременном высвобождении эндотоксина часто наступает бактериальный или эндотоксический шок: поражение сосу­дов, свертывание в них крови, гипоксия, ацидоз.

Генерализация менингококковой инфекции м.б. вследствие ↓ сопротивляемости Ò при вирусных инфекциях (особенно грипп), травмах и других воздействиях, изменяю­щими иммунологический статус организма, создающими иммунодефицитное состояние. Т.о., в патогенезе менингококковой ин­фекции сочетаются септические и токси­ческие процессы + аллергические реакции.

Иммунитет после перенесенного заболевания (генерализованные формы) формируется прочный. Повторные заболевания возникают редко. В сыворотке крови больных обнаруживаются антимикробные (бактерицидные) АТ, ко­торые обеспечивают защиту от последующего заболевания.

Лабораторная диагностика. Материал – слизь с задней стенки глотки (на носительство и при назофарингитах), спинномозговая жидкость (при симптомах ме­нингита), кровь (при подозрении на менингококкемию). Из сп-м жидкости и кр делают мазки, окрашивают по Гр, микроскопируют. Полученную чистую культуру иден­тифицируют, определяют серогруппу.

При менингите можно провести исследование спинномозговой жидкости на наличие в ней менингококковых антигенов поста­новкой реакции встречной диффузии методами ИЭФ или РИА со специфическими групповыми сыворотками. Для серодиагностики применяют РНГА с эритроцитами, на которых адсорбированы группоспецифические ПС АГ.

Профилактика и лечение. Для специфической профилактики используют менингококковую химическую вакцину (из ПС АГ серогрупп А и С), эффективна при иммунизации людей в коллективах, где широко распрост­ранено носительство менингококков этих серогрупп. Этиотропное лечение – АБ (пенициллина, левомицетина) и сульфаниламиды.

ГОНОКОККИ.N. gonorrhoeae.

Морфология. Имеют форму, сходную с менингококками, – похожи на кофейные зерна, рас­полагаются парами, вогнутыми поверхностями друг к другу. В мазках из гноя располаг-ся внутри лейкоцитов (незавершенный фагоцитоза). Под влиянием лекарственных веществ становятся крупными шарами или, наоборот, мелки­ми зернами. Под действием пенициллина переходят в L-форму.

Для культивирования гонококков на пит ср тре­буется добавление к ним человеческого белка (сыворотки, крови или асцитической жидкости). Растут лучше при содержа­нии в атмосфере 3–10% С02. На асцит-агаре образуют прозрачные колонии с ровными краями и блестящей поверхностью. БХ св!! слабо выражены – из углеводов расщепляют только глюкозу, образуют каталазу и оксидазу. Протеолитической активностью не обла­дают.

АГ структураизменчива.

Экология и распростране­ние. Единственный хозяин – человек. Вне Ò человека гонококки быстро погибают, не выдерживая высыхания, охлаждения, t°С. Но в тол­стой капле гноя на влажных предметах гонококки могут оставаться жизнеспособными в тече­ние суток. Чувствительны к дезинфектантам (хлоргексидин, фенол) и к АБ – пенициллину, тетрациклину, эритромицину. Од­нако высокая заболеваемость гонореей в последние годы и само­лечение больных привели к широкому распространению устойчивых к сульфаниламидам и АБ гоно­кокков.

Патогенез. Передается от больного человека половым путем, реже – через предметы обихода (губки, полотенца и др.). Наличие фимбрий обеспечивает адгезию при контакте с рецепто­рами эпителиальных клеток МПТ. Соединяясь с ворсинками цилиндрического эпителия слизистой оболочки уретры (у ♀ ещё и эндоцервикального канала), гонококки проникают внутрь ## путем эндоцитоза. Возникает острый уретрит, цервицит. У женщин, помимо матки, поража­ются придатки (трубы, яичники), у мужчин–семенные пузырь­ки, предстательная железа. Повреждающим началом является эндотоксин – ЛПС # стенки.

Возможна и экстрагенитальная локализация гнойно-воспали­тельного процесса (в прямой кишке, глотке), осложнения (артрит, эндокардит, менингит, фарингит), а также гонококко­вая септикопиемия.

Гонококки вызывают конъюнктивит – бленнорею у новорож­денных – при прохождении родовых путей больной гонореей матери.

Иммунитет. Образующиеся АТ не обладают защитн свойствами, клеточный иммунитет не формируется.

Лабораторная диагностика. Бактериоскопический метод. У мужчин исследуется отделяемое уретры, у женщин -- отделяемое уретры, шейки матки и прямой кишки. Из материала готовят мазки, окрашивают по граму или метиленовой синькой. Обнаружение при микроскопировании бобовидных гр– диплококков внутри лейкоцитов, дает основание ставить диагноз «гонорея». Если обследуемый больной уже лечился АБ, сульфаниламидными препаратами, то возможны изменен­ные формы возбудителя, что следует учитывать при микроско­пии мазков.

При отсутствии гонококков в мазках проводится бактериоло­гическое исследование – выделение и идентификация культуры возбудителя. Гнойный уретрит могут вызывать и другие мкÒ: стафилококки, кишечная палоч-ка, хламидии, микоплазмы и др. Одновременно с гонореей могут возникать урогенитальный хламидиоз, гарднереллезная инфекция, трихомо­ноз и даже сифилис. Это делает сложной диагностику урогенитальных инфекций.

Гонорея может переходить в хроническую форму. В этих случаях используют серодиагностику – РСК или РНГА.

Профилактика и лечение. Вакцинопрофилактика гонореи раз­рабатывается Þ индивидуальная профилактика. Для предупреждения бленнореи всем только что родившимся детям на конъюнктиву глаза закапывают раствор пенициллина или другой АБ, к которому чувствительны гонококки. Лечение гонореи проводят АБ.

№13 Возбудители брюшного тифа и паратифов. Патогенез инфекции. Методы культивирования, основные свойства. Лабораторная диагностика.