Вопрос Определение количества гемоглобина

Первую каплю крови снимают стерильной ваткой, а вторую набирают (насасывают) в капилляр Саля с резиновой трубкой до метки. Это следует делать осторожно, чтобы не насосать» крови больше необходимого количества и не набрать пузырьков воздуха.

Как только уровень взятой крови достигнет метки, резиновую трубку зажимают пальцами, вытирают кончик капилляра ваткой, еще раз проверяют уровень крови и опускают капилляр в пробирку Сали, наполненную децинормальным раствором хлористоводородной кислоты до 10-го деления, но только так, чтобы кончик слегка погрузился в кислоту, и начинают осторожно выдувать кровь в пробирку. Последнюю каплю крови выдувают не в хлористоводородную кислоту, а на стенку выше уровня кислоты, последующим наклоном пробирки каплю крови смывают.

Красная жидкость быстро, на глазах, приобретает коричневую окраску различной интенсивности в зависимости от содержания гемоглобина. Капилляр Сали еще раз наполняют путем насасывания жидкости из пробирки, чем достигается полное смывание крови с его стенок, а затем, заметив время, ставят пробирку в штатив.

Гемоглобин определяют колориметрическим методом, т. е. путем сравнения цвета стандартного раствора гемоглобина с цветом образовавшегося в хлористоводородной кислоте хлорида гематина (рис. 10).

Прибор для определения гемоглобина- так называемый гемометр- представляет собой деревянный штатив с тремя гнездами; два боковых гнезда заняты пробирками со стандартными растворами, а в среднее гнездо вставляют градуированную пробирку с исследуемым раствором солянокислого гематина и сравнивают цвета. Если цвет в исследуемой пробирке сразу же окажется светлее, чем в стандартной, набирают еще раз такое же количество крови из пальца, а при подсчете полученный результат делят пополам. Если же исследуемая жидкость темнее стандартной, то через 10 мин приступают к колори-метрированию.

Для этого гемометр берут в левую руку и держат на уровне глаз, а правой в исследуемую жидкость пипеткой добавляют по каплям дистиллированую воду и размешивают стекляной палочкой. Воду прибавляют до тех пор, пока цвет содержимого исследуемой пробирки и боковых стандартов не станет одинаковым. Деления на градуированной пробирке обозначают содержание гемоглобина в исследуемой крови. Уровень жидкости в градуированной пробирке (одинаковой с цветом стандарта) укажет процентное содержание гемоглобина в определяемой крови.

При определении количества гемоглобина допускается ошибка в пределах 5%.

Современные гемометры имеют две шкалы. Одна из них показывает содержание гемоглобина в крови в грамм-процентах (количество граммов гемоглобина на 100 мл крови), вторая выражает то же количество гемоглобина в условных единицах (16,6 г% гемоглобина соответствует 100 ед). В норме количество гемоглобина у женщин несколько меньше, чем у мужчин.

Рис. 10. Гемометр Сали.

Билет №15.

СОЭ по Панченкову.

Кровь при движении - устойчивая суспензия. При помещении ее в стеклянный сосуд, эритроциты в силу их тяжести оседают.

Скорость оседания эритроцитов зависит от состояния организма. При некоторых физиологических состояниях (например, беременность) и при целом ряде заболеваний (туберкулез, ревматизм и др.) оседание эритроцитов бывает незначительно ускоренным.

Рис. 1. Аппарат Панченкова для определения СОЭ

Для определения СОЭ применяют прибор Панченкова, состоящий из штатива, в котором могут быть зажаты в вертикальном положении специальные капилляры. Капилляры градуированы в миллиметрах. Метка 0 стоит на расстоянии 100 мм от конца. На капилляре есть еще две метки: К (кровь) - на высоте нуля и метка Р (реактив) - на уровне 50 мм.

Для работы необходимо: прибор Панченкова, часовое стекло, стерильный скарификатор, вата, 5% раствор цитрата натрия, спирт, эфир, йод. Работу проводят на человеке.

Ход работы. Капилляр промывают 5% раствором цитрата натрия. Затем набирают цитрат натрия до метки Р на уровне 50 мм и выдувают его на часовое стекло. Затем в тот же капилляр набирают кровь из пальца человека до метки К дважды.

Следует иметь в виду, что для успешного взятия крови прокол должен быть довольно глубоким; капилляр следует держать горизонтально, погрузив его кончик в каплю крови, при этом кровь сама наполняет капилляр.

Обе порции выпускают на часовое стекло, смешивая с имеющимся там цитратом натрия. Полученную таким образом на часовом стекле смесь крови с цитратом натрия в отношении 4:1 набирают в капилляр до метки 0 и ставят капилляр в штатив. Через час смотрят, какова высота в миллиметрах образовавшегося верхнего столбика плазмы в капилляре. Его величина и является мерой СОЭ. В норме СОЭ составляет от 4 до 10 мм/ч; показания от 10 до 15 мм/ч расцениваются как незначительное ускорение; 15-30 мм/ч - среднее ускорение, 30 мм/ч и выше - резкое ускорение.

Примечание. Для практической работы допустимо набирать половинное количество крови и цитрата натрия, т.е. цитрата – до 25 мм, крови – до 100 мм в капилляре Панченкова.

Билет №16.