Определение группы крови по системе АВО.

Перед определением группы крови необходимо проверить сроки годности стандартных сывороток.

1. Первоначально, строго соблюдая последовательность, на пластинку (тарелку) в один ряд наносят по 3 капли (0,1 мл) сыворотки стандартного набора системы АВО одной серии в следующем порядке: 0(1), А(11), В(Ш). Затем, симметрично, в той же последовательности, помещают сыворотку другой серии.

2. Рядомс каждой каплей сыворотки наносят по маленькой капле (0,01 мл) исследуемой крови.

3. Перемешивают каждую пару капель новым и чистым уголком предметного стекла.

4. За ходом реакции наблюдают 5 минут, слегка покачивая пластинку.

5. В те капли, где наступила агглютинация, через 3 минуты добавляют по капле изотонического раствора хлорида натрия и продолжают наблюдение до истечения 5 минут.

Таблица 1. Оценка результатов определения группы крови.

Группа исследуемой крови	Результат реакции с сывороткой
0(1)	А(П)	В (III)
0(1)	-	-	-
(П)	+	-	+
В(Ш)	+	+	-
АВ(IV)	+	+	+

Проба на групповую совместимость.

При проведении пробы на пластинку или тарелку наносят 2-3 капли сыворотки, полученной путем центрифугирования крови больного. Добавляют в 5 раз меньшую каплю крови донора. Перемешивают, периодически покачивают пластинку и через 5 минут оценивают результат реакции.

Отсутствие агглютинации эритроцитов указывает на совместимость крови донора и реципиента в отношении групп крови по системе АВО.

8.1.3.6 Проба на совместимость по резус-фактору в сывороточной среде
(на чашке Петри).

Проба проводится в чашке Петри при температуре 46-48° в течение10 минут.

Для исследования нельзя использовать новую чашку Петри. Перед применением ее следует прокалить в течение 20 минут при температуре 150-180°.

На чашке написать фамилию, инициалы и группу крови больного, фамилию, инициалы и группу крови донора. Номер флакона с кровью.

В середину чашки накапать 2-3 капли сыворотки больного. Добавить к ним 1 маленькую каплю крови донора так, чтобы соотношение крови и сыворотки было приблизительно равным 1:10. Для удобства рекомендуется сначала выпустить через иглу несколько капель крови донора на край чашки Петри. Затем перенести маленькую каплю концомсухой стеклянной палочки в сыворотку больного, смешать их, после чего опустить чашку Петри на 10 мин. в водяную баню температурой 46-48⁰.

По истечении этого времени вынуть чашку из водяной бани и просмотреть при покачивании над источником света.

Если сыворотка больного вызвала агглютинацию эритроцитов донора (агглютинаты видны в виде мелких, реже крупных комочков на фоне просветленной или полностью обесцвеченной сыворотки), то кровь донора несовместима с кровью больного и недолжна быть перелита ему.

Если смесь эритроцитов и сыворотки осталась гомогенно-окрашенной, без признаков агглютинации, значит, кровь донора совместима с кровью больного в отношении резус-фактора RhO (D).

Пробы на резус-фактор.

Проба с использованием 33% раствора полиглюкина проводится без подогрева.

На дно пробирки вносят 2 капли сыворотки больного, 1 каплю донорской крови и 1 каплю 33% раствора полиглюкина (специально приготовленного для лабораторных целей).

Содержимое пробирки перемешивают путем встряхивания. Затем пробирку наклоняют почти до горизонтального положения и медленно в течение 5 минут поворачивают таким образом, чтобы содержимое растекалось по стенкам. После этого в пробирку доливают 3-4 мл изотонического раствора NаСI и содержимое перемешивают путем двух-, трехкратного переворачивания ее, избегая взбалтывания.

Появление агглютинации указывает на несовместимость крови реципиента и донора, что является противопоказанием к переливанию.

Проба с использованием 10% раствора желатины производится в пробирках при температуре 46-48° в течение 10 мин.

На дно пробирки помещают 1 каплю эритроцитов донора, предварительно отмытых 10-кратным объемом изотонического раствора NаСI. Добавляют 2 капли подогретого до разжижения 10% раствора желатины и 2-3 капли сыворотки больного (раствор желатины должен быть прозрачным). Содержимое пробирки перемешивают путем встряхивания и помещают на водяную баню температурой 46-48° на 10 мин. Затем ее извлекают, добавляют 5-8 мл изотонического раствора NаС1, один-два раза перевёртывают и просматривают на свет.

Появление агглютинации указывает на несовместимость крови реципиента и донора, следовательно, переливание крови в данном случаепротивопоказано.

Биологическая проба.

1. Перед, переливанием эритроцитарную массу или плазму, взятую из холодильника, выдерживают при комнатной температуре в течение 30-40 мин.

2. После этого, подключают систему для переливания, приступают к проведению биологической пробы. С этой цельюструйно переливают 10-15 мл крови или ее компонентов. В течение 3 мин наблюдают за состоянием больного.

3. При отсутствии реакции на переливание (учащение пульса, дыхания, одышка, затрудненное дыхание, гиперемия лица, озноб, головные боли, боли в пояснице, стеснение в груди и т. п.) вводят еще 10-15 мл крови. В течение 3 мин. вновь наблюдают за больным. Затем в третий раз проводят аналогичную пробу. При отсутствии реакции трансфузию продолжают. Биологическая проба в таких случаях расценивается как отрицательная.

При появлении у больного признаков реакции или осложнений, переливание компонентов крови должно быть немедленно прекращено путем пережатия и отключения системы. При этом иглу оставляют в вене, подсоединяют к ней систему с физиологическим раствором. Незамедлительно приступают к проведению лечебных мероприятий в зависимости от характера реакции или осложнения.

4. После переливания флакон с остатками трансфузионной среды должен храниться в холодильнике в течение 2 суток.

5. По окончаниипереливания на протяжении 2 часов реципиент должен соблюдать постельный режим. Наблюдение за ним осуществляет врач.

6. В течение 3 часов у больного ежечасно измеряют температуру тела, артериальное давление, фиксируют эти показатели в истории болезни.

7. На следующий день после переливания назначается общий анализ крови и мочи.

8. Медицинский работник, проводивший переливание компонентов крови, обязанзаписать в истории болезни: показания к трансфузии; паспортные данные каждого флакона (фамилию и инициалы донора, группу крови, резус принадлежность, номер флакона, дату заготовки крови). Результат контрольной проверки групповой принадлежности крови реципиента по системе АВО. Результат контрольной проверки групповой принадлежности крови донора, взятой из флакона. Результат пробы на групповую совместимость крови донора и реципиента по системе АВО и резус-фактору; результат биологической пробы.

Занятие 9