Инактивированные (убитые) вакцины. Анатоксины. Получение, применение. Достоинства и недостатки. Роль адъювантов.

Инактивированные вакцины в качестве действующего начала включают убитые хи­мическим или физическим методом культу­ры патогенных бактерий или вирусов (цельноклеточные, цельновирионные вакцины) или же извлеченные из патогенных микробов (иногда вакцинных штаммов) комплексы, содержащие в своем составе протективные антигены (субклеточные, субвирионные вак­цины). Для инактивации бактерий и вирусов применяют формальдегид, спирт, фенол или температурное воздействие, ультрафиолето­вое облучение, ионизирующую радиацию.

Для выделения из бактерий и вирусов анти­генных комплексов (гликопротеинов, ЛПС, белков) применяют трихлоруксусную кис­лоту, фенол, ферменты, изоэлектрическое осаждение, ультрацентрифугирование, уль­трафильтрацию, хроматографию и другие фи­зические и химические методы.

Получают инактивированные вакцины путем выращивания на искусственных питательных

средах патогенных бактерий или вирусов, ко­торые затем подвергают инактивации, разру­шению (в случае необходимости), выделению антигенных комплексов, очистке, конструи­рованию в виде жидкого или лиофильно вы­сушенного препарата. В препарат обязательно добавляют консервант, иногда — адъюванты.

Дозируют вакцину в антигенных единицах; применяют, как правило, подкожно, внут­римышечно в виде нескольких инъекций на курс вакцинации.

Анатоксины (токсоиды)

Примером молекулярных вакцин являютсяанатоксины: дифтерийный, столбнячный, ботулинический (типов А, В, Е), гангренозный (перфрингенс, нови и др.), стафилококковый, холерный.

Принцип получения анатоксинов состоит в том, что образующийся при культивировании соответствующих бактерий токсин в молеку­лярном виде превращают в нетоксичную, но сохраняющую специфическую антигенность форму — анатоксин путем воздействия 0,4% формальдегида и тепла (37 °С) в течение 3-4 недель. Полученный анатоксин подвергают очистке и концентрированию физическими и химическими методами для удаления балласт­ных веществ, состоящих из продуктов бактерий и питательной среды, на которой они выращи­вались. К очищенному и концентрированному анатоксину для повышения его иммуноген- ности добавляют адъюванты, обычно сорбен­ты — гели А1(ОН)₃ и А1(Р0₄). Полученные та­ким образом препараты назвали очищенными сорбированными анатоксинами.

Дозируют анатоксины в антигенных еди­ницах: единицах связывания (ЕС) анатоксина специфическим антитоксином или в едини­цах флокуляции (LI). Анатоксины относятся к числу наиболее эффективных профилактичес­ких препаратов. Благодаря иммунизации диф­терийным и столбнячными анатоксинами рез­ко снижена заболеваемость и ликвидированы эпидемии дифтерии и столбняка. Очищенные сорбированные анатоксины применяют под­кожно или внутримышечно по схеме, предус­мотренной календарем прививок.

Адъюванты

Как было сказано выше, для усиления иммуногенности вакцин применяют адъюванты (от лат. adjuvant — помощник). В качестве адъювантов используют минеральные сорбен­ты (гели гидрата окиси и фосфата аммония), полимерные вещества, сложные химические соединения (ЛПС, белково-липополисахаридные комплексы, мурамилдипептид и его производные и др.); бактерии и компоненты бактерий, например вытяжки БЦЖ, из ко­торых готовят адъювант Фрейнда; инакти­вированные коклюшные бактерии, липиды и эмульгаторы (ланолин, арлацел); вещест­ва, вызывающие воспалительную реакцию (сапонин, скипидар). Как видно, все адъю­ванты являются чужеродными для организма веществами, имеют различный химический состав и происхождение; сходство их состоит в том, что все они способны усиливать иммуногенность антигена. Механизм действия адъювантов сложный. Они действуют как на антиген, так и на организм (А. А. Воробьев). Действие на антиген сводится к укрупнению его молекулы (сорбция, химическая связь с полимерным носителем), т. е. превращению растворимых антигенов в корпускулярные. В результате антиген лучше захватывается и активнее представляется фагоцитирующими и другими иммунокомпетентными клетками, т. е. превращается из тимусзависимого в ти- муснезависимый антиген. Кроме того, адъю- ванты вызывают на месте инъекции воспали­тельную реакцию с образованием фиброзной капсулы, в результате чего антиген длительно сохраняется, депонируется на месте инъек­ции и, поступая из «депо», длительное время действует по принципу суммации антигенных раздражений (ревакцинирующий эффект). В связи с этим адъювантные вакцины назы­вают депонированными. Адъюванты также непосредственно активируют пролиферацию клеток Т-, В-, А-систем иммунитета и уси­ливают синтез защитных белков организма. Адъюванты усиливают иммуногенность ан­тигенов в несколько раз, а такие растворимые молекулярные белковые антигены, как диф­терийный, столбнячный, ботулинический анатоксины, — до ста раз

Роль адъювантов:

Применяют для усиления иммуногенности вакцин. Используют минеральные сорбенты(гели фосфата аммония и гидрата окиси),полимерные вещества, бактерии и компоненты бактерий и т.д. Все адъюванты являются чужеродными для организма веществами.Они способны усиливать иммуногенность антигена. Адъюванты действуют как на организм так и на антиген.Действие на антиген сводится к укруплению его молекулы т.е. превращение растворимых антигенов в корпускулярные. В результате антиген лучше захватывается и активнее представляется фагоцитирующими и другими иммунокомпетентными клетками т.е. превращается из тимус зависимого в тимуснезависимый антиген. Кроме того адъюванты вызывают на месте инъекции воспалительную реакцию с образованием фиброзной капсулы в результате чего антиген долго сохраняется депонируется на месте инъекции. Адъюванты также непосредсвенно активируют пролифирацию клеток Т и В, А систем иммунитета и усиливают синтез защитных белков организма

1. Школьнику 9-го класса Дмитрию К. был вызван участковый врач. Мальчик болен 30 день. При обследовании врач констатировал большую температуру (38,5), кожа чистая, сыпи нет, сухой грубый кашель, веки отечны, слизистая конъюнктивы гиперемирована, нос заложен, слизистая носоглотки гиперемирована, на слизистой щек имеются пятна Филатова-Коплика. Врач поставил предварительный диагноз «Кроь, катаральный период» Опишите патогенез кори, охарактеризуйте тропизм вируса. Какие методы лабораторной диагностики следует применить для подтверждения диагноза? Какие биопрепараты применяют для спец. Профилактики и серотипировании кори?

Патогенез. Возбудитель проникает через сли­зистые оболочки верхних дыхательных путей и глаз, откуда попадает в подслизистую оболоч­ку, лимфатические узлы. После репродукции он поступает в кровь (вирусемия) и поражает эндотелий кровеносных капилляров, обуслав­ливая тем самым появление сыпи. Развиваются отек и некротические изменения тканей.

Тропизм.

Вначале отмечаются острые респира­торные проявления (ринит, фарингит, ко­нъюнктивит, фотофобия, температура тела 38,8—39,0 °С). Затем, на 3—4-й день, на сли­зистых оболочках и коже появляется пят­нисто-папулезная сыпь, распространяюща­яся сверху вниз: сначала на лице, затем на туловище и конечностях. За сутки до появ­ления сыпи на слизистой оболочке щек по­являются мелкие пятна (диаметр около 1 мм) Филатова—Коплика, окруженные красным ореолом. Заболевание длится 7—9 дней, сыпь исчезает, не оставляя следов.

Микробиологическая диагностика. Исследу­ют смыв с носоглотки, соскобы с элементов сыпи, кровь, мочу. Вирус кори можно обна­ружить в патологическом материале и в зара­женных культурах клеток с помощью РИФ, РТГА и реакции нейтрализации. Характерно наличие многоядерных клеток и антигенов возбудителя в них. Для серологической диа­гностики применяют РСК, РТГА и реакцию нейтрализации.

Специфическая профилактика. Активную специфическую профилактику кори прово­дят подкожным введением детям первого года жизни или живой коревой вакцины из атте- нуированных штаммов (Л-16), или ассоции­рованной вакцины (против кори, паротита, краснухи). В очагах кори ослабленным детям вводят нормальный иммуноглобулин чело­века. Препарат эффективен при введении не позднее 7-го дня инкубационного периода.

1. Состав и применение бактериофага коли жидкого

Состав. Бактериофаг коли представляет собой фильтрат кишечных палочек.Выпускаетсяво флаконах 100,0 мл и в ампулах по 5,0 и 10,0 мл.Назначение. Применяют для лечения и профилактики гнойных инфекций кожи и висцеральных органов, вызванных кишечной палочкой. Бактериофаг применяют для лечения фурункулов, карбункулов, гпдроаденитов, абсцессов, гнойно-осложненных ран, инфицированных кишечной палочкой, плевритов, бурситов, термических ожогов, хронических остеомиелитов, флегмон, тендовагинитов, маститов, циститов, холециститов и др., а также с профилактической целью при свежеинфицированных ранах (при операциях брюшной и грудной полости). Препарат для лечения применяется при выделении от больных штаммов кишечной палочки чувствительных к фагу.Обладает способностью специфически лизировать эшерихии коли, выделенные при гнойных инфекциях.Способ применения и дозировка. Основное условие — раннее применение бактериофага. В зависимости от характера очага инфекции бактериофаг применяется: местно в виде орошения, примочек, тампонирования в зависимости от размера пораженного участка в количестве 5,0—200,0 мл.При фурункулах и карбункулах препарат вводят непосредственно в очаг или под основание инфильтрата, вокруг очага методом обкалывания. Инъекции проводят ежедневно или через день в возрастающих дозах: на 1 инъекцию 0,5 мл, затем 1,0; 1,5; 2,0 мл. За цикл лечения проводят 3—5 инъекций.При абсцессах препарат вводят в полость очага после отсасывания гноя.При хронических остеомиелитах после хирургической обработки бактериофаг вливают в рану. Для лечения глубоких форм пиодермитов препарат применяют внутрикожно в малых дозах: 0,5 мл в одно место или до 2,0 мл в нескольких местах. Всего 10 инъекций через каждые 24 часа.Введение в брюшную, плевральную и другие полости - от 30,0 до 100,0 мл бактериофага.При циститах вводят в полость мочевого пузыря через катетер.При плевритах, бурситах или артритах коли бактериофаг вводят в полость в количестве 50,0 —200,0 мл и больше через день, всего 3—4 раза.С профилактической целью его применяют в количестве 15,0 до 50,0 мл для орошения послеоперационных ран, полости влагалища или матки после родов.Прививочные реакции. Осложнений не отмечено.Противопоказаний нет.

Экзаменационный билет №32