Вакцина бруцеллезная живая сухая.

Состав. Вакцина представляет собой лиофилизированную живую культуру вакцинного штамма Вг. abortus 19-ВА.

Выпускаетсяв ампулах во 1,0 мл (5-10 доз), по 5 ампул в упаковке, имеет вид однородной аморфной или кристаллической массы белого или желтоватого цвета.

Назначение. Вакцина предназначена для профилактики бруцеллеза козье - овечьего вида у взрослых с 18 лет. Обеспечивает развитие иммунитета продолжительностью 10—12 мес.

Способ введения и дозировка. Вакцинацию проводят однократно накожно или подкожно, ревакцинацию — накожно, интервал между прививками составляет 10— 12 мес. Для вакцинации накожным способом препарат вводят в наружную поверхность средней трети плеча. 2 капли вакцины наносят на расстоянии 30 - 40 мм друг от друга, кожу натягивают и стерильным оспопрививателем пером производят через каждую каплю 6 насечек. При ревакцинации применяют половинную дозу, т. е. наносят 1 каплю, через которую делают 6 насечек. Для вакцинации подкожным способом препарат вводят по 1 мл в область наружной поверхности плеча. Прививочная доза препарата в 25 раз меньше, чем при накожной вакцинации.

Противопоказания— острые инфекционные и неинфекционные заболевания, хронические заболевания в стадии обострения или декомпенсации, аллергические заболевания, коллагенозы, болезни крови, беременность, переболевшие бруцеллезом (положительная серологическая или аллергическая реакция на бруцеллез), лечение стероидными гормонами, антиметаболитами, рентгенотерапия, злокачественные новообразования.

Экзаменационный билет №27

Иммуноферментный анализ, радиоиммунный анализ, иммуноблоттинг. Механизм, компоненты, применение.

Ответ: Иммуноферментный метод, или анализ (ИФА)ИФА — выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой. После соединения антигена с ме­ченной ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом, и изменяется цвет продукта реакции — интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связав­шихся молекул антигена и антител.

Твердофазный ИФА — наиболее распростра­ненный вариант иммунологического теста, когда один из компонентов иммунной реак­ции (антиген или антитела) сорбирован на твердом носителе, например в лунках план­шеток из полистирола (рис. 13.11).

При определении антител в лунки планше­ток с сорбированным антигеном последова­тельно добавляют сыворотку крови больного, антиглобулиновую сыворотку, меченную фер­ментом, и субстрат (хромоген) для фермента.

Каждый раз после добавления очередного компонента из лунок удаляют несвязавшие- ся реагенты путем тщательного промывания. При положительном результате изменяется цвет раствора хромогена. Твердофазный но­ситель можно сенсибилизировать не только антигеном, но и антителами. Тогда в лунки с сорбированными антителами вносят иско­мый антиген, добавляют иммунную сыворот­ку против антигена, меченную ферментом, а затем субстрата для фермента.

Конкурентный вариант ИФА: искомый ан­тиген и меченный ферментом антиген кон­курируют друг с другом за связывание ог­раниченного количества антител иммунной сыворотки. Другой тест — искомые антитела и меченые антитела конкурируют друг с дру­гом за антигены.

ИФА применяют для диагностики вирус­ных, бактериальных и паразитарных болезней в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепатита В и др., а также определения гормо­нов, ферментов, лекарственных препаратов и других биологически активных веществ, содержащихся в исследуемом материале в ми­норных концентрациях — 10 ^|(|н-10 ¹² г/л.

Радиоиммунологический метод, или анализ (РИА)

Высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген—антитело с примене­нием антигенов или антител, меченных ра­дионуклидом (¹²⁵J, ¹⁴С, ³Н, ⁵¹Сг и др.). После их взаимодействия отделяют образовавшийся радиоактивный иммунный комплекс и опре­деляют его радиоактивность в соответствую­щем счетчике (бета- или гамма-излучение):

интенсивность излучения прямо пропорцио­нальна количеству связавшихся молекул ан­тигена и антител.

При твердофазном варианте РИА один из компонентов реакции (антиген или антитела) сорбирован на твердом носителе, например в лунках микропанелей из полистирола. Другой вариант метода — конкурентный РИА. ис­комый антиген и меченный радионуклидом антиген конкурируют друг с другом за свя­зывание ограниченного количества антител иммунной сыворотки. Этот вариант исполь­зуют для определения количества антигена в исследуемом материале.

РИА применяют для выявления антигенов микробов, определения гормонов, фермен­тов, лекарственных веществ и иммуноглобу­линов, а также иных веществ, содержащихся в исследуемом материале в минорных концент­рациях — 10"'°-н10"¹² г/л. Метод представляет определенную экологическую опасность.

Иммуноблоттинг

Иммуноблоттинг (ИБ)— высокочувстви­тельный метод, основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА.

Антиген выделяют с помощью электрофоре­за в полиакриламидном геле, затем переносят его (блоттинг — от англ. blot, пятно) из геля на активированную бумагу или нитроцеллюлоз- ную мембрану и проявляют с помощью ИФА. Фирмы выпускают такие полоски с «блотами»

антигенов. На эти полоски наносят сыворотку больного. Затем после инкубации отмывают от несвязавшихся антител больного и наносят сыворотку против иммуноглобулинов челове­ка, меченную ферментом. Образовавшийся на полоске комплекс антиген + антитело больно­го + антитело против Ig человека выявляют до­бавлением субстрата/хромогена, изменяющего окраску под действием фермента (рис. 13.12).

ИБ используют как диагностический метод при ВИЧ-инфекции и др.

2. Пациент С., 27 лет был направлен в инфекционную клинику с симптомами гепатита. Больной жалуется на слабость, быструю утомляемость, отсутствие аппетита. За последние дни повысилась температура до 37,8 градусов, моча приобрела цвет пива, кал обесцветился. При обследовании отмечается боль в эпигастральной области справа, печень уплотнена и болезненна. Из анамнеза известно, что больной имел несколько месяцев назад интимную связь с женщиной, которая впоследствии заболела вирусным гепатитом В. Врач поставил предварительный диагноз «вирусный гепатит В, острый период заболевания». Какие результаты позволяют поставить диагноз «гепатит В» и позволяют отдиферинцировать и его от других вирусных гепатитов? С помощью каких маркеров можно определить, что имеет место первичное инфицирование, а не обострение хронического гепатита В?

Ответ:Диагноз гепатит В позволяют поставить следующие симптомы: боль в эпигостральной области справа, печень уплотненная, болезненная, так как клиническая картина гепатита В характеризуются поражением печени. От других видов гепатита позволяет отдеференцировать то, что заболевание передается при половом контакте, через микротравмы.

Переход острой фор­мы в хроническую обеспечивается наруше­нием Т-клеточного иммунитета. Первичная инфекция характеризующаяся исчезно­вением из крови НВе-антигена и появлением антител к нему: анти-HBc-IgM анти-HBe-IgM, анти- HBc-IgG, анти-HBs антител